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イノシトールリン脂質代謝と小胞体からのCa^<2+>遊離機構の研究

肌醇磷脂代谢及内质网Ca^2+释放机制研究

基本信息

批准号：
60223024
负责人：
平田雅人
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60223024/
关键词：
マクロファージ小胞体【Ca^(2+)】遊離 Ins【P_3】光親和標認

项目摘要

イノシトール1,4,5-三リン酸(Ins【P_3】)によるマクロファージ(Mφ)小胞体からの【Ca^(2+)】遊離機構を検討し、小胞体上のIns【P_3】受容分子を光親和標識するためのIns【P_3】の光感受性誘導体を合成した。1.Ins【P_3】による【Ca^(2+)】遊離機構の解明:小胞体膜は本来【Ca^(2+)】に対して不透過性で、膜が強い拡散障壁となっている。Ins【P_3】による速い【Ca^(2+)】遊離はこの拡散障壁の破壊を意味する。この原因として、【◯!1】【Ca^(2+)】ポンプの抑制、【◯!2】小胞体の【Ca^(2+)】保持能の低下、【◯!3】【Ca^(2+)】透過性の亢進等が考えられた。【Ca^(2+)】ポンプ活性を完全に抑制する濃度のバナジン酸を添加したり、あるいはアピラーゼやヘキソキナーゼによってATPを枯渇したりすることによる【Ca^(2+)】遊離は極めて緩徐であり、またIns【P_3】は小胞体への受動的【Ca^(2+)】流入も促進した。これらの結果は上記【◯!3】の可能性、すなわちIns【P_3】により小胞体膜の【Ca^(2+)】透過性が亢進することを強く示唆する。そして低温にしてもIns【P_3】の効果は影響されないことから担体ではなく、チャンネルを介した透過性亢進であると考えられた。2.Ins【P_3】の光感受性誘導体の合成と利用:光感受性基としてP-アジド安息香酸(pAB)を用い、カルボニルジイミダゾールを触媒としてIns【P_3】と混和する。セルロース薄層クロマトグラフィーによって分離するとIns【P_3】のRfは0.20であるのに対して0.50のところにIns【P_3】-pABを得た。収率は約10%でIns【P_3】とpABのモル比は約1:1であった。既報のサポニン処理Mφ(S-Mφ)をIns【P_3】-pABとともに紫外線照射した後、S-Mφを洗浄した。このS-Mφを用いて【Ca^(2+)】輸送を調べると、Ins【P_3】による【Ca^(2+)】遊離はもはや認められなかった。【Ca^(2+)】遊離の抑制は、S-MφをIns【P_3】やpABとともに紫外線照射した時や、また Ins【P_3】-pABとともに10倍量のIns【P_3】を添加した時にも認められなかった。

The photoaffinity labeling of Ins [P_3] receptor molecules on microsomes and the synthesis of photoreceptors of Ins [P_3] were studied. 1. The mechanism of Ca ^(2+) dissociation in Ins: the membrane of small cells is impermeable to Ca^(2 +), and the membrane is a strong barrier to diffusion. Ins [P_3],[Ca ^(2 +)],[Ca^(2+),[Ca^(2+)],[Ca ^(2+)],[Ca ^(2 +),],[Ca ^(2 +],],[Ca ^(2+]),[Ca ^(2 The reason for this is! 1][Ca^(2+)][] 2)[Ca^(2+)] of small cells keeps energy low,[! 3][Ca^(2+)] Permeability and hyperactivity are examined. [Ca^(2+)] free electrode [Ca^(2+) free electrode] free electrode [Ca ^(3 + free electrode] free electrode] free electrode [Ca^(2+ free electrode] free electrode] free electrode [Ca ^(3 + free electrode] free electrode] free electrode [Ca The result is that they will be remembered. 3) The possibility of increasing the permeability of [Ca^(2+)] to [P_3] in small cell membranes The effect of low temperature on the permeability of the substrate 2. The synthesis and utilization of photosensitive-inducer of Ins [P_3]: photosensitive-base, P-benzoic acid (pAB), photosensitive-base, and photosensitive-base. The Rf of Ins [P_3] is 0.20 and the Rf of Ins [P_3] is 0.50. The ratio is about 10%. The ratio is about 1:1. The paper reports that Mφ(S-Mφ) is treated by UV irradiation and S-Mφ is washed by UV irradiation. S-Mφ is used to transfer Ca^(2+) and Ins [P_3] to Ca^(2+). [Ca^(2+)] free inhibition, S-Mφ Ins [P_3] and pAB and when irradiated with ultraviolet rays, Ins [P_3]-pAB and when added with 10 times the amount of Ins [P_3]