新しいイノシト-ル1,4,5ー三リン酸結合蛋白に関する生化学的研究

新型肌醇1,4,5-三磷酸结合蛋白的生化研究

• 批准号: 03670126
• 负责人: 平田 雅人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670126/
• 关键词: IP_3アナログ; IP_3親和性カラム; IP_3結合蛋白

イノシト-ル1,4,5ー三リン酸(IP_3)は細胞内小胞体の含有するCa^<2+>を放出させることにより,細胞内情報伝達系の重要な一翼を担っている。我々は一昨年来,細胞内でIP_3を認識する蛋白質(小胞体上のIP_3受容体やIP_3代謝酵素)の活性中心の構造を調べるため一連のIP_3アナログを化学合成し,IP_3認識蛋白に対する影響を検討してきた。その一連の流れの中でIP_3親和性カラムも作製した。本研究では,このIP_3親和性カラムを用いた研究を遂行し以下の結果を得た。ラット大脳可溶性分画をIP_3カラムにアプライし,2MーNaClを含む溶液で溶出するとIP_3代謝活性を有しないのに強いIP_3結合活性のあることがわかった。この分画をゲルロ過クロマトグラフィ-によりさらに分画すると,分子量130kDaと85kDaの両蛋白が強いIP_3結合活性を担っていた。濃縮してそれぞれの精製蛋白を得た。両蛋白とも結合はIP_3に対して特異的で,かつ1〜3nM程度の高い親和性を有していた。精製蛋白をリジルエンドペプチダ-ゼで限定分解の後,疎水性クロマトグラフィ-により分画した。それぞれ得られた3種のペプチドのアミノ酸配列夜求め,SwissーProtデ-タベ-スでホモロジ-検索を行なった。130kDaの蛋白に類似した蛋白は見い出せなかったが一方,85kDaの蛋白はホスホリパ-ゼC(PLC)のδ型アイソザイムと同じであった。130kDaの蛋白の作用は現在のところ全く不明である。85kDaのPLCδがIP_3結合活性を有していたことから,IP_3のPLCδ活性に及ぼす影響を調べた。その結果,IP_3はμMの濃度範囲でPLCδ活性を抑制することがわかった。生理的には細胞内のIP_3濃度はμMレベルで変化することが知られており,この抑制は生理的意義のあることかもしれない。これら両IP_3結合蛋白とも可溶性分画のみならず,膜分画の界面活性剤による抽出液中からもほぼ同様の技法で精製された。

The cytosome of IP_3 contains Ca ^ & lt;2+>. It is important to report the inside of the cell. In the past year, we have learned that the active center of the intracellular IP_3 protein (IP_3 receptor IP_3 enzyme) has been linked to IP _ 3, chemical synthesis, and IP_3 protein recognition. The IP _ 3 and the gender in the link stream will be linked. In this study, the results of the following results were obtained through the study of IP _ 3 and sexual information. The soluble components of IP_3, NaCl, 2m and NaCl contain solution solution, and the activity of IP _ 3 generation is stronger than that of IP _ 3 binding activity. The molecular weight of 130kDa 85kDa protein is enhanced by IP_3 binding activity. I don't know how to get the protamine. The combination of protein and IP_3 protein shows that the 1~3nM level is high and the sex is sensitive. After the protamine has been limited to decompose, the water-based protein will be separated from each other. You can get a list of three kinds of information in the evening, and you will need to pay for it in the evening, and you will need to pay for it if you want to Prot it. The 130kDa protein type is similar to the protein type, and the 85kDa protein type is similar to the protein type, while the protein type C (PLC) δ is similar to that of the protein group. The effect of 130kDa protein is now unknown. The binding activity of 85kDa PLC δ IP_3 binding activity includes IP_3 PLC δ activity, DNA binding activity and DNA binding activity. The results showed that the activity of PLC δ in the temperature range of IP_3 μ M inhibited the activity of PLC δ. The meaning of physiology is to inhibit the meaning of physiology. the meaning of physiology is different from that of physiology. the meaning of physiology is called IP_3. The soluble protein of IP _ 3 binding protein was separated and the membrane was separated. The interface activity of the membrane separation was determined. The extraction solution was the same as the technique.

项目成果

Fumi Yanaga: "Signal transduction by tumor necrosis factor α is mediated through a guanine nucleotide binding protein in osteoblastーlike cell line,MC3T3ーE1" The Journal of Biological Chemistry.

Fumi Yanaga：“肿瘤坏死因子 α 的信号转导是通过成骨细胞样细胞系 MC3T3-E1 中的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白介导的”《生物化学杂志》。