細胞形態変化を指標とした細胞増殖因子のシグナル伝達機構の解明

以细胞形态变化为指标阐明细胞生长因子的信号转导机制

• 批准号: 61571073
• 负责人: 伊藤 文昭
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Setsunan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61571073/
• 关键词: 細胞増殖因子; 上皮増殖因子; 細胞形態; A-431細胞; リチウムイオンとリン酸化反応

Epidermal growth factor(EGF)は特異的な受容体結合後早い時期に、受容体のチロシン特異的リン酸化活性や、イノシトールリン脂質の代謝回転を促進するなど多様な活性を誘発し、その後DNA合成、細胞分裂を誘発することが知られている。しかしながら、EGFのシグナルがどのように伝達され増殖促進を惹起するか全く不明である。我々はのシグナル伝達機構解明のために、早期反応後に観察されるEGFによるヒト上皮性腫瘍細胞株A-431の形態変化に注目した。A-431細胞をDMEM,あるいはDulbecco'sPBS中でEGF(100ng/ml)により処理すると、コロニー周囲に薄く伸展したシート状突起と、尖った指状突起が形成され、この形態変化はEGF添加後1〜2時間で最も顕著になった。EGF依存性のA-431細胞の形態変化は、NaCl溶液(150mM NaCl+1mM Ca【Cl_2】+0〜5mM Mg【Cl_2】+0.1%グルコース)では観察されないが、NaClの代わりにLiClを用いると、尖った指状突起がLiCl濃度に依存して観察された。また、NaCl溶液中にバナジン酸イオンを添加しても、EGFにより尖った指状突起が形成された。さらにNaCl、あるいはLiCl溶液にリン酸イオンを加えるとEGFによりシート状突起が形成され、培地のイオン組成により、形態変化を指標としたA-431細胞のEGFに対する応答性の変化することがわかった。リチウムイオン、リン酸イオン、バナジン酸イオンはいずれもリン酸化、あるいは脱リン酸化反応に影響を与えることが知られているので、EGFによる形態変化に細胞内リン酸化反応の関与が示唆され、現在この問題について検討している。他の増殖を促進する因子のインシュリン、FGF(fibroblast growth factor),TPA,A23187を単独あるいは組み合わせて添加した場合は、いずれも形態変化を起こさなかった。EGF以外の増殖因子が細胞形態の変化を起こさないことは、A-431細胞のEGF受容体数が異常に多いことと関係あるかもしれない。

Epidermal growth factor(EGF) is known to induce multiple activities such as receptor-specific acidification activity, promotion of lipid metabolism, induction of post-receptor DNA synthesis, and induction of cell division during early post-receptor binding. The growth promotion of EGF was initiated by the government. The morphological changes of epithelial tumor cell line A-431 were observed after the early reaction of EGF. A-431 cells were treated with EGF(100ng/ml) in Dulbecco's PBS in DMEM, and their morphology changed 1 ~ 2 days after EGF addition. EGF-dependent morphological changes of A-431 cells were observed in NaCl solution (150mM NaCl+1mM Ca [Cl_2]+0 ~ 5 mM Mg [Cl_2]+0.1% NaCl), in NaCl solution, in LiCl solution, in the presence of LiCl, and in the presence of LiCl concentration. In addition, EGF was added to the NaCl solution to form pointed fingers. In addition to NaCl and LiCl, EGF can also be used as an indicator for the formation and morphology of EGF in A-431 cells. In addition, EGF is also responsible for the change of EGF morphology, intracellular acidification and its relationship with the expression of EGF, and is currently under discussion. In addition, the growth promotion factors such as FGF(fibroblast growth factor),TPA,A23187, etc., can be used independently. Growth factors other than EGF cause changes in cell morphology, and the number of EGF receptors in A-431 cells is abnormal.

项目成果

Nobuko EmuraーYamaguchi: Cell Structure and Function. 12. 23-33 (1987)

Nobuko Emura-Yamaguchi：细胞结构和功能。12. 23-33 (1987)。