课题基金 / 基金详情

耐熱性をもつ複合触媒性酵素の開発と制御

耐熱性をもつ複合触媒性酵素の開発と制御
耐热复合催化酶的开发和控制
批准号：
62604576
负责人：
左右田 健次
金额：
$1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1987 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62604576/
关键词：
耐熱性酵素複合触媒能の付与ロイシン脱水素酵素NAD酵素ピリドキサル酵素アラニンラセマーゼアミノ酸ラセマーゼ

项目摘要

项目成果

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1.複合触媒能を示す脱水素酵素の中でも応用酵素学的にも特に重要なロイシン脱水素酵素をとり挙げ, 各種好熱性細菌における本酵素の分布を検索し, 中等度好熱性細菌に属するBacillus stearothermophilusに高い活性が存在することを見出した. 本菌よりロイシン脱水素酵素を均一に精製し, その酵素化学的性質を検討した結果, 常温菌B Sphaericusの本酵素よりも耐熱性が20°C以上高く, 物理化学的に非常に安定であることが判明した. また, B steasothermaphiliesの本酵素遺伝子を大腸菌にクローン化し, クローン株内で大量に発現させることに成功すると共に, 耐熱性を利用する効率の良い酵素精製法を開発した. また, 本酵素遺伝子のDNA配列を解析し, 本酵素タンパク質の全一次配列を明らかにすると共に, 立体構造既知の他の脱水素酵素と比較することにより補酵素NADや基質の結合部位を推定した. 現在, タンパク質工学的手法を用いて本酵素の超耐熱化や複合機能化を試みつつある.2.ピリドキサル酵素は一種類の補酵素の関与のもとにアミノ酸のラセミ化アミノ基転移, 脱炭酸など多くの反応を触媒する複合触媒性酵素である. 本研究は, ピリドキサル酵素の中でも最も根元的な反応を触媒するラセマーゼ特にアラニンラセマーゼを対象とした. 本酵素の好熱性細菌における存在を確認すると共に, 本酵素遺伝子のクローン化ならびに本耐熱性酵素の精製と酵素化学的性質の解明を行なった. さらに, 高発現株の作成とX線結晶解析を行ない, 本酵素のタンパク質構造に関する基礎的な知見を得た. 現在, 触媒機能に関与するアミノ酸残基の人工交換による複合触媒性の付与の可能性を検討中である.
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专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
K.Tanizawa,A.Ohshima,A.Scheidegger,K.Inagaki,H.Tanaka andK.Soda: Biochemistry. 27. (1988)
K.Tanizawa、A.Ohshima、A.Scheidegger、K.Inagaki、H.Tanaka 和 K.Soda：生物化学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
D.J.Neidhart,M.D.Distefano,K.Tanizawa,K.Soda,C.T.Walsk and G.A.Petsko: J.Biol.Chem.262. 15323-15326 (1987)
D.J.Neidhart、M.D.Distefano、K.Tanizawa、K.Soda、C.T.Walsk 和 G.A.Petsko：J.Biol.Chem.262。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Nagata,K.Tanizawa,N.Esaki,Y.Sakamoto,T.Ohshima,H.Tanakaand K.Soda: Biochemistry. 27. (1988)
S.Nagata、K.Tanizawa、N.Esaki、Y.Sakamoto、T.Ohshima、H.Tanaka 和 K.Soda：生物化学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
好冷性酵素の構造と低温での特性に関する研究
  • 批准号：
    12878112
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    左右田 健次
  • 依托单位：
    Kansai University
酵素による立体選択的酸化と電極還元を組合せた新規キラル合成法開発
  • 批准号：
    07215238
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $0.64万
  • 财政年份：
    1995
  • 负责人：
    左右田 健次
  • 依托单位：
    Kyoto University
ハロ酸分解性微生物酵素の構造機能相関の解析、環境浄化への応用
  • 批准号：
    07263233
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.09万
  • 财政年份：
    1995
  • 负责人：
    左右田 健次
  • 依托单位：
    Kyoto University
ハロ酸分解性微生物酵素の遺伝子工学的研究と環境浄化への応用
  • 批准号：
    06271240
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $0.83万
  • 财政年份：
    1994
  • 负责人：
    左右田 健次
  • 依托单位：
    Kyoto University