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酵素による立体選択的酸化と電極還元を組合せた新規キラル合成法開発

酶立体选择性氧化与电极还原相结合的手性合成新方法的开发

基本信息

批准号：
07215238
负责人：
左右田健次
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アミノ酸オキシダーゼ反応と電極還元を組み合わせることによる新しい物質変換系を開発することを目的として、本年度は新規アミノ酸オキシダーゼの検索を行った。プロリンあるいはピペコリン酸を唯一の炭素源あるいは窒素源として生育する微生物を土壌より分離し、プロリン及びピペコリン酸を酸化する新しい酵素を生産するカビを分離する。得られた新規酵素を用いて、各種α-アミノ酸の光学変換系を構築した。すなわち、D-アミノ酸から生成したα-ケト酸をL-アミノ酸デヒドロゲナーゼを用いてL-アミノ酸に変換し、消費されたNADHをギ酸デヒドロゲナーゼ反応との共役によって再生する系で、アラニンデヒドロゲナーゼ、ロイシンデヒドロゲナーゼ、フェニルアラニンデヒドロゲナーゼ、グルタミン酸デヒドロゲナーゼを用いることにより、アラニン、セリン、ロイシン、バリン、チロシン、フェニルアラニン、グルタミン酸など、多種多様なアミノ酸のD体をL体に変換することができた。変換率は88〜97%で、生成物の光学純度は99%以上であった。L-アミノ酸のD体への変換はL-アミノ酸オキシダーゼとD-アミノ酸トランスアミナーゼの反応共役によって行った。すなわち、L-アミノ酸から生成したα-ケト酸をD-アミノ酸トランスアミナーゼでD体に変換し、反応で消費されるD-アラニンはピルビン酸を通じ、アラニンデヒドロゲナーゼ反応とアラニンラセマーゼ反応の共役によって再生した。NADHの再生には、上記の変換系と同様、ギ酸デヒドロゲナーゼを用いた。D-グルタミン酸、D-ロイシン、D-フェニルアラニン、D-チロシンなどの各種D-アミノ酸を転換率70〜98%、光学純度99%以上で生産することができた。NADHの再生系としてギ酸デヒドロゲナーゼ反応を用いているが、これは既報の電極還元系で代替できると考えられる。

This year's new regulations on the development of new materials and materials for the production of new materials and materials The isolation of microorganisms from the sole source of carbon and the production of new enzymes from the sole source of carbon. The new enzyme was used to construct the optical conversion system of various α-amino acids. The production of α-C_2H_2O_3 and L-C_2H_2O_3 in the production of α-C_2H_2O_3 and L-C_2H_2O_3 in the production of α-C_2H_2O_3 and L-C_2H_2O_3 in the production of α-C_2H_2O_3 and L-C_2H_2O_3 in the production of α-C_2H_2O_2 and L-C_2H_2O_2O_2 in the production of α-C_2H_2O_2O_2 and L-C_2H_2O_2O_A variety of acids, such as D and L, can be used to change the structure of a compound. The conversion rate is 88~97%, and the optical purity of the product is more than 99%. L-D-D D-acid is produced from α-acid, D-acid. For the regeneration of NADH, similar to the above conversion system, the acid generator must not be used. The conversion rate of D-amino acid, D-amino acid and D-amino acid is 70~98%, and the optical purity is more than 99%. The NADH regeneration system is composed of two parts: one part is composed of NADH and the other part is composed of NADH and NADH.