導入オンコジ-ンの体細胞突然変異誘発による個体発癌の研究

引入癌基因体细胞诱变个体致癌研究

基本信息

批准号：
02152109
负责人：
勝木元也
金额：
$ 6.78万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

〔研究目的〕個体発癌の要因として,がん遺伝子の活性化やがん抑制遺伝子の不活性化が関与していることが指摘されている。本研究は,ヒトのがんから最も頻繁に活性型が検出されるras群遺伝子の体細胞での突然変異発生の機構と,腫瘍発生の組織特異性との関係を調べることを目的に,ヒトcーHaーras遺伝子導入マウスを作成した。〔研究成果〕ヒトcーHaーras導入トランスジェニック(以下Tgと略)マウスは,高頻度に血管内腫を発症し,その血管肉腫の全例において導入遺伝子の第61番コドンに体細胞突然変異が認められた。この事実は,挿入部位の異なる3系統のトランスジェニックマウスで同一であったことから,ヒトcーHaーras遺伝子に特有のものであり,挿入部位によらないことが示唆された。そこでマウスcーHaーras遺伝子導入によるras遺伝子の過剰発現系の確立を試みることにした。今年度は,マウスゲノムcーHaーras遺伝子の単離を行ない全エキソンを含むゲノム遺伝子の単離に成功した。この遺伝子導入マウスは現在作成中である。次に,ヒトcーHaーras導入Tgマウスに化学癌物質を投与し,その発癌性を検討した。アルキル化剤メチルニトロソウレア(MNU)を腹腟に1回投与し,2週間毎に全臓器での腫瘍発生を調べてみた結果,投与後約4週で,前胃に乳頭腫の発生が60%のTgマウスに認められ,6週目には全Tgマウスに前胃乳頭腫が検出された。非Tgマウスにはまったく腫瘍の発生は認められなかった。発生した前胃乳頭腫の導入遺伝子の突然変異を調べた結果56例中55例において,第12番コドンの第2文字に変異が確認され,活性化していることが判明した。以上の事実は,組織特異的発癌の機構を調べるために良い系を提供している。さらに化学発癌物質のスクリ-ニングに用いることができることが示された。

[目的是研究]有人指出，癌基因的激活和癌症抑制基因的失活是单个癌变的因素。这项研究旨在研究RAS基因的体细胞中突变机制之间的关系，其中最常在人类癌症中检测到活性形式，而肿瘤发育的组织特异性与人C-HA-RAS转基因小鼠的关系。 [研究结果]人C-HA-HA-RAS转基因小鼠（以下称为TG）经常出现血管瘤，并且在所有血管肉瘤的情况下，在转基因的密码子61上观察到体细胞突变。在三只具有不同插入位点的转基因小鼠中，这一事实是相同的，这表明它是人类C-HA-RAS基因独有的，而不是依赖于插入位点。因此，我们决定通过转导小鼠C-HA-RAS基因来建立RAS基因的过表达系统。今年，我们成功地分离了小鼠基因组C-HA-RAS基因，并分离了包含所有外显子的基因组基因。该转基因鼠标目前正在建设中。接下来，对人C-HA-HA-RAS引入的TG小鼠进行了化学癌症，并检查了其致癌性。烷基化剂甲硝基库（MNU）一次施用到心室阴道，并每2周检查所有器官的肿瘤发育。给药后大约4周，在60％的TG小鼠中观察到了乳头状瘤的发育，在第6周，在所有TG小鼠中都检测到前胃乳头瘤。在非TG小鼠中未观察到肿瘤的发展。我们研究了在56例中的55例中发达的进前乳头瘤的转基因中的突变，并发现在密码子12的第二个字母中证实了突变并被激活。以上事实为检查组织特异性癌变机制提供了一个良好的系统。还已经证明它可用于筛选化学致癌物。