導入遺伝子に基づく個体発がんの研究

基于导入基因的个体致癌研究

• 批准号: 05152090
• 负责人: 勝木 元也
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152090/
• 关键词: がん遺伝子; がん抑制遺伝子; H-ras; p53; ジーンターゲッティング; トランスジェニックマウス; 肉腫; リンパ腫

がん遺伝子やがん抑制遺伝子に起る多段階的変異を個体レベルで研究するためには、これらの遺伝子に注目した動物実験系が必要である。そこで本研究では、がん遺伝子としてH-ras、がん抑制遺伝子としてp53を選び、トランスジェニックマウスおよびジーンターゲッティングマウスを作成し、それらの個体発がんを調べることにした。1)H-ras遺伝子には、マウスゲノム由来のものが未だ単離されていなかった。そこで、129/svのゲノムライブラリーから単離を試みた結果、全長20Kbに亘り、すべてのエクソンを含むクローンが採れた。ターゲッティングベクターを構築し、ES細胞に導入後、相同組換え体を選択し、現在キメラマウス作成中である。また、マウスゲノム遺伝子導入トランスジェニックマウスの作成を行なった。2)p53遺伝子は、すでに数ケ所でターゲットされているが、我々は、新しい遺伝子置換法を開発し、p53遺伝子をそっくりlacz遺伝子に置き換えたマウスを作成した。その結果、p53遺伝子は、非常に早い初期胚において強く発現しており、その発現の組織特異性に大きな特徴が認められた。また、p53ホモ型変異体は、肉腫、リンパ腫、奇形腫を生後30週までに頻発し死亡する。個体による差は、p53以外の遺伝子に変異が生ずることによってこれらの腫瘍が発生することを意味しているものと考えられるので、この未知遺伝子を同定する試みも開始した。以上のような動物実験系の確立により、いつ、どこで、どのような変異が個体発がんを起すかが解明できると思われる。

が ん posthumous son 伝 や が ん inhibitory son survived 伝 に る Duan Jie more variations of different individual を レ ベ ル で research す る た め に は, こ れ ら の heritage 伝 son に attention し た animals be 験 department が necessary で あ る. そ こ で this study で は, が ん posthumous son 伝 と し て H - ras, が ん inhibit heritage 伝 son と し て p53 を び, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス お よ び ジ ー ン タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ マ ウ ス を し, consummate そ れ ら の individual 発 が ん を adjustable べ る こ と に し た. 1) The descendants of H-ras, 伝, に, に, ウスゲノム, originated from されて, が, が, だ単, されて, な, った. そ こ で, 129 / sv の ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ ー か ら 単 from を try み た results, the total length of 20 KB に animation り, す べ て の エ ク ソ ン を containing む ク ロ ー ン が mining れ た. タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ ベ ク タ ー に を constructing し, ES cells after import, the same group in え を sentaku し, now キ メ ラ マ ウ ス made in で あ る. Youdaoplaceholder0 and ウスゲノム are left with 伝 to be imported into トラ ウス スジェニッ and ウス ウス to form a を line なった. 2) traces of p53 伝 は, す で に で by several ケ タ ー ゲ ッ ト さ れ て い る が, I 々 は, new し い heritage 伝 son displacement method を open 発 し, p53, but 伝 を そ っ く り lacz heritage 伝 son に buy き in え た マ ウ ス を made し た. そ の results, traces of p53 伝 は, very early に い early embryo に お い て strong く 発 now し て お り, そ の 発 is の tissue specificity に き な, 徴 が recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0, p53ホモ variant また, flesh tumor, リ <s:1> パ tumor, and odd-shaped tumor を frequently cause necrosis death までに within 30 weeks after birth. Poor individual に よ る は, p53 の heritage 伝 に son born - different が ず る こ と に よ っ て こ れ ら の swollen sores が 発 raw す る こ と を mean し て い る も の と exam え ら れ る の で, こ の unknown legacy 伝 son を be す る try み も began し た. Above の よ う な animals be 験 is の establish に よ り, い つ, ど こ で, ど の よ う な - different が individual 発 が ん を up す か が interpret で き る と think わ れ る.

项目成果

Kobayashi,H.Taniguchi,S.et al.: "Expression of alpha-smooth muscle actin in benign or malignant ovarian tumors." Gynecologic Oncology. 48. 308-313 (1993)

Kobayashi,H.Taniguchi,S.et al.：“α-平滑肌肌动蛋白在良性或恶性卵巢肿瘤中的表达”。

Miyado,K. Katsuki,M.,et al.: "Isolation of a yeast cDNA clone that encodes a novel transmembrane protein having a c-terminal highly basic region." Biochem Biophys Res Commun. in press. (1994)

宫户，K.

Takaori,K.Katsuki,M.,et al.: "Biochemical characteristics of human renin expressed in transgenic mice." Clinical Science. 84. 21-29 (1993)

Takaori,K.Katsuki,M.,et al.：“转基因小鼠中表达的人肾素的生化特征。”

Hayashizaki,Y.Katsuki,M.,et al.: "Identification of an imprinted U2af binding protein related sequence on mouse chromosome 11 using RLGS method." Nature Genetics. 6. 33-40 (1993)

Hayashizaki,Y.Katsuki,M.,et al.：“使用 RLGS 方法鉴定小鼠 11 号染色体上印记的 U2af 结合蛋白相关序列。”

Takagi,S.Katsuki,M. et al.: "Direct sequencing of PCR products using unlabelled primers." BioTechniques. 14. 218-221 (1993)

高木，S.Katsuki，M.