T細胞が認識するヒトの内因性ペプチドの分離・精製

T细胞识别的人内源性肽的分离纯化

• 批准号: 04152037
• 负责人: 滝口 雅文
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152037/
• 关键词: ヒトマイナー組織適合抗原ペプチド; CTLクローン; HLAクラスI抗原

1.ヒトマイナー組織適合(mH)抗原の腎培養細胞からの分離昨年、HLA-B35拘束性、ヒトmH抗原特異的CTLクローンを用いて、このCTLクローンが認識するペプチドをB細胞株から分離することができた。このCTLクローンは腎移植患者の末梢血より樹立したので、これらのCTLクローンは腎細胞上のmH抗原を認識していると考えられる。そこでHLA-B35をもっている人から樹立した腎培養細胞を用いて、mH抗原ペプチドの分離を試みた結果、インターフェロンガンマーによってHLAクラスI抗原の発現を高めた腎細胞より、これらのCTLクローンが認識するmHペプチドを分離することができた。2.HLA-B35結合抗原ペプチドの解析CTLクローンが認識するmHペプチドを同定するステップとして、HLA-B35結合自己抗原ペプチドを解析した。抗体によって精製したHLA-B35抗原より酸処理法によってペプチドを分離し、これをさらにHPLCを用いて分離し、特異的なピークをアミノ酸解析した。HLA-B35に結合している自己抗原ペプチドは、9つのアミノ酸からなり、2番目にプロリン、9番目にサイロシンをアンカーとしてもっていることが明らかになった。CTLクローンが認識するmHペプチドも同様にこれらのアミノ酸をアンカーにもっている可能性があると考えられる。

1. Isolation and identification of HLA-B35-binding, HLA-mH antigen-specific CTL from cultured kidney cells. This study is aimed at understanding the mH antigen on renal cells in patients with renal transplantation. The HLA-B35 gene was used in the culture of kidney cells, and the mH antigen was isolated. 2.HLA-B35 binding antigen selection analysis CTL selection analysis for recognition of mH selection selection criteria, HLA-B35 binding antigen selection analysis HLA-B35 antigen purification by acid treatment, separation by HPLC, and acid analysis by HPLC HLA-B35 is a combination of anti-HLA-B35 and anti-HLA-B35 antibodies. The possibility of CTL recognition is discussed below.

项目成果

Yoshifumi Beck: "Expression of human minor histocompatibility antiqen on cultured kidney cells." Eur.J.Immunol.

Yoshifumi Beck：“培养肾细胞上人类次要组织相容性抗原的表达。”

Yoshifumi Beck: "Isolation of human minor histocompatibility peptides from cultured kidneycells." Transpl.Proc.25. 162-166 (1993)

Yoshifumi Beck：“从培养的肾细胞中分离人类次要组织相容性肽。”

Masayuki Sekimata: "Isolation of human minor histocompatibility peptides." Int.Immunol.4. 301-304 (1992)

Masayuki Sekimata：“人类次要组织相容性肽的分离。”

Adrian V.S.Hill: "Molecular analysis of the association of HLA-B53 and resistance to severe malaria." Nature. 360. 434-439 (1992)

Adrian V.S.Hill：“HLA-B53 与对严重疟疾抵抗力之间关系的分子分析。”