新しいがん遺伝子検出用細胞の確立

新型癌症基因检测细胞的建立

• 批准号: 04152072
• 负责人: 三好 淳
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152072/
• 关键词: がん遺伝子; SHOK細胞; cot遺伝子; 蛋白質キナーゼ; 細胞増殖シグナル伝達系; 遺伝子発現

cotがん遺伝子は、SHOK細胞系を用いて検出されたSer/Thr Kinase系のがん遺伝子であり、C末端則のtruncationにより活性化されている。cot proto-oncogeneは、細胞増殖シグナル伝達系に関連する分子であると予想されるが、その生理的役割はまだ明らかではない。cot proto-oncogeneの遺伝子産物は、58kDおよび52kDの2つの分子である。これらは、29アミノ酸離れた2つの翻訳開始点から読み取られており、両者の生化学的特性は、自己リン酸化活性や半減期に関してわずかに異なっていた。また、cot cDNAを導入したSHOK細胞を同調培養すると、S期、G2/M期に自己リン酸化活性が高い傾向を示した。マウスcot proto-oncogeneのクローニングし、その組織特異的発現について検討した。cot遺伝子の発現は全般に低いが、多くの臓器で発現が見られた。新生マウスでは、小腸および大腸、成熟マウスでは、甲状腺、胸腺、脾臓、肺での発現が比較的高い。第3、6、9、12週齢のマウスの骨髄、胸腺、脾臓におけるcot遺伝子発現をRNA-PCRを用いて比較すると骨髄では3及び6週齢、胸腺では6および9週齢に発現のピークが認められたが、脾臓における発現レベルは3-12週齢まで一定であった。cotは、mos,raf,cdc2とは遺伝子構造が明らかに異なっており、相同性を示す類縁遺伝子の存在も確認されていない。また、cyclinなどの蛋白と複合体を形成する可能性も示されず、S期、G2/M期の自己リン酸化活性の変動の意義も不明である。cot遺伝子発現のレベルは一般に低く、どの細胞で特異的に発現しているかを判断することが難しい。現在のところ、従来の生化学的解析を続けるよりも、発生工学による解析を進める方がcotの生理活性を明らかにする上で有効ではないかと思われる。そこで、マウスのcot遺伝子変異体を作成してgene targetingやreplacementによるcotがん遺伝子の生理的機能の解析を予定している。

Cot, Shok cell lines are used to detect Ser/Thr Kinase system and C-terminal transcription. Cot proto-oncogene is related to cell proliferation and physiology. Cot proto-oncogene derivative product, 58kD 52kD 2 The biological characteristics of the enzyme are related to its activity and half-life. Cot cDNA was introduced into SHOK cells and showed a high tendency of self-acidification in S, G2/M phases. It's called proto-oncogene, and it's called tissue-specific. The discovery of cot particles is generally low, and the discovery of multiple devices is common. The development of newborn, small intestine, large intestine, mature, thyroid, thymus, spleen and lung is relatively high. The expression of cot genes in the bone marrow, thymus, and spleen at weeks 3, 6, 9, and 12 was compared by RNA-PCR. The expression of cot genes in the bone marrow at weeks 3 and 6, the thymus at weeks 6 and 9, and the expression of cot genes in the spleen at weeks 3-12 were definitely detected. cot, mos,raf,cdc2, etc. The structure of the gene is clearly different, and the identity of the gene is confirmed. The possibility of formation of cyclin protein complexes and the significance of the changes in cyclin activity in S, G2/M phases are unknown. Cot gene expression is generally low, and cell specific expression is difficult to determine. Now, the biochemical analysis of the present and future problems has been carried out. The biological analysis of the present and future problems has been carried out. The physiological activity of the present and future problems have been solved. The analysis of the physiological function of the gene targeting and replacement