膵癌の高危険群選別を目的とした超微量腫瘍細胞の特異的検出系の開発

开发超痕量肿瘤细胞特异性检测系统，筛选胰腺癌高危人群

• 批准号: 04557035
• 负责人: 今井 浩三
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04557035/
• 关键词: 膵炎; 早期診断; PCR; モノクローナル抗体; MUSE11; 膵癌; 腫瘍細胞; ムチン抗原遺伝子; RT-PCR法

1)MUSE11抗原遺伝子のクローニングに成功したので、体液中に存在する微量癌細胞よりmRNAを抽出、これを2組のプライマーを用いたRT-PCR2回法を行ないMUSE11抗原遺伝子に対応するcDNAを増幅し、特異オリゴヌクレオチドを用いたサザンブロット法により検出した。この場合、基礎研究として培養癌細胞を用い、これを正常白血球と混じ、2回PCR法の感度を確立した。また、K-rasのmutation特異的プライマーを用いたPCRを確立し、この場合もさらに外側のプライマーで2回増幅を行ない超微量細胞の検出系を確立する。2)次に腹水、胸水等の体液を用いて、その上清中のMUSE11抗原量をモノクローナル抗体で測定すると同時に、本法により対応DNAおよびRNAを検出し、抗原量との関連性を比較した。さらに、細胞診の成績との間に比較を行ない、本検出法が有用であることを確認した。3)さらに末梢血液を出発材料として同様の検索を行ない、高危険群を選別した。4)二次検査として、各種画像診断、各種腫瘍マーカーの検索を行ない、早期膵癌を発見しつつある。

1) MUSE11 antigen gene was successfully cloned into the genome, and there were trace amounts of cancer cell mRNA in the body fluid. Two sets of PCR were used to detect the mRNA of MUSE11 antigen gene. In this case, basic research, culture of cancer cells, mixing of normal leukocytes, and sensitivity of 2-plex PCR were established. K-ras mutation specific amplification was established by PCR, and in this case, the outer amplification was established by PCR. 2)In addition, the correlation between the amount of MUSE11 antigen and the amount of MUSE11 antigen in ascites, pleural effusion and other body fluids was compared. The results of cellular diagnosis were compared and confirmed. 3) The peripheral blood release materials are selected from the same group of high-risk groups. 4)Secondary examination, diagnosis of various images, detection of various tumors, early cancer detection

项目成果

Imai et al.: "Detection of circulating pancreas cancer-associated antigen MUSE 11 by a new monoclonal antibody" Oncology(Life Sci,Adv.). 11. 51-57 (1992)

Imai 等人：“通过新型单克隆抗体检测循环胰腺癌相关抗原 MUSE 11”Oncology（Life Sci，Adv.）。

Bara,J.: "A fucose residue can mask the MUC-1 epitopes in normal and cancerous gastric mucosal." Int.J.Cancer. 54. 607-613 (1993)

Bara,J.：“岩藻糖残基可以掩盖正常和癌性胃粘膜中的 MUC-1 表位。”

Yamashita,K.: "Immunohistochemical study of mucin carbohy drates and core proteins in hepatolithiasis and cholangiocarcinoma" Int.J.Cancer. (1993)

Yamashita,K.：“肝结石和胆管癌中粘蛋白碳水化合物和核心蛋白的免疫组织化学研究”Int.J.Cancer。

Hinoda et al.: "Circulating tumor-associated antigens detected by monoclonal antibodies against the polypeptide core of mucin." Gastroenterol.Jpn.27. 390-395 (1992)

Hinoda 等人：“通过针对粘蛋白多肽核心的单克隆抗体检测到循环肿瘤相关抗原。”