尋常性および落葉状天疱瘡抗原遺伝子の表皮特異的発現調節機構の解析

寻常型天疱疮和落叶型天疱疮抗原基因表皮特异性表达调控机制分析

• 批准号: 07670927
• 负责人: 玉井 克人
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07670927/
• 关键词: 尋常性天疱瘡抗原; 類天疱瘡抗原; 自己免疫性水疱症; デスモゾーム; ヘミデスモゾーム; 転写調節因子; 組織特異的発現; 落葉状天疱瘡抗原; 自己免疫性水泡症

1.類天疱瘡抗原遺伝子(BPAG1)ヒト培養ケラチノサイトに活性型ビタミンD_3(VitD3)を種々の濃度で添加し、種々の時間インキュベートした後にRNAを抽出し、Northern blotting法及びCATアッセイ法にてBPAG1の発現を検討した。その結果、BPAG1mRNAは、VitD3濃度依存的、時間依存的に減少した。この現象はcycloheximideの同時添加により変化しないため、de-novoの蛋白合成を介さず、既に細胞内に存在する分子機構によることが示された。BPAG1プロモーター・CATプラスミドをトランスフェクトした培養ケラチノサイトを用いた実験系により、このBPAG1の発現抑制は、後転写レベルで生じていることが明らかとなった。BPAG1のケラチノサイト特異的発現を調節しているcis-element、KRE2に対し、POUホメオドメイン遺伝子産物でケラチノサイトで優位に発現しているOct-11が結合し、組織特異的発現を制御していることが明らかとなった。2.ヒト尋常性天疱瘡遺伝子(Dsg3)BPAG1遺伝子と同様に、Dsg3遺伝子の発現もVitD3で制御されることが明らかとなった。BPAG1と異なり、低濃度あるいは短時間のインキュベートでは発現増加、高濃度あるいは長時間では発現抑制が観察され、in vivoにおいてもin vivoと同様に表皮細胞の分化の程度に従ってその発現動態が変化すること、すなわち未分化表皮細胞での発現亢進と、高分化表皮細胞での発現抑制が示された。

1. The expression of pemphigoid antigen (BPAG1) was investigated by Northern blotting and CAT assay. BPAG1mRNA and VitD3 decreased concentration-dependently and time-dependently. This phenomenon is demonstrated by the simultaneous addition of cycloheximide to the medium of protein synthesis and the presence of molecular mechanisms in the cell. BPAG1 can be used to inhibit the occurrence of BPAG1 in the culture medium and in the post-production medium. BPAG-1 regulates cis-element, KRE-2, POU-2, and POU-3 specific expression. Oct-11 regulates binding and tissue-specific expression. 2. Pemphigus vulgaris (Dsg3)BPAG1 gene and the same gene, Dsg3 gene and the development of VitD3 gene control. BPAG1 was found to increase in short time intervals at low concentrations, to inhibit in long time intervals at high concentrations, to inhibit in vivo the development of epidermal cells at the same level of differentiation, to increase the development of undifferentiated epidermal cells, and to inhibit the development of highly differentiated epidermal cells.

项目成果

玉井 克人: "In vivo transfer of a foreign gene to keratinocytes using the hemagglutinating virus of Japan-liposome method" J Invest Dermatol. 108. 195-199 (1997)

Katsuto Tamai：“使用日本血凝病毒-脂质体方法将外源基因体内转移至角质形成细胞”J Invest Dermatol 108. 195-199 (1997)。

玉井 克人: "Cloning of the mouse desmoglein 3 gene(DSSG) : Interspecies conservation within the cadherin superfamily" Genomics. (in press).

Katsuto Tamai：“小鼠桥粒芯糖蛋白 3 基因 (DSSG) 的克隆：钙粘蛋白超家族内的种间保护”基因组学（正在出版）。

玉井 克人: "遺伝子プロモーター研究と皮膚科学" デルマ. (印刷中).

Katsuto Tamai：“基因启动子研究和皮肤病学”Delma（正在出版）。

玉井 克人: "Compound heterozygosity for a nonsense mutation and a splice site mutation in the type VII collagen gene(COL7A1)in recessive dystrophic epidermolysis bullosa" Lab Invest. 76. 209-217 (1997)

Katsuto Tamai：“隐性营养不良性大疱性表皮松解症中 VII 型胶原基因 (COL7A1) 的无义突变和剪接位点突变的复合杂合性”Lab Invest。