ヒトVHL癌抑制遺伝子産物に結合する細胞性蛋白質の同定と単離

与人 VHL 肿瘤抑制基因产物结合的细胞蛋白的鉴定和分离

• 批准号: 07770172
• 负责人: 土屋 晴生
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770172/
• 关键词: VHL; 癌抑制遺伝子; 結合蛋白; 腎癌

遺伝病であるvon Hippel-Lindau(VHL)病の原因遺伝子は、本症に合併する腎癌のみならず自然発生の腎癌(clear cell type)でも高率にC末端に変異を起こしていることが報告されている。最近アメリカのグループは免疫沈降により、VHL蛋白はelongation factor S-IIIのsubunitであるelonginBおよびCと結合することを報告しVHL蛋白の転写伸長抑制作用を示唆した。一方申請者らは2-hybrid systemを用いてLHVに結合する蛋白を独自にクローニングしelonginCの他に未知の遺伝子(クローンV67)を単離した。クローンV67のコードする蛋白はエピトープタッグシステムを使った免疫沈降にてもVHL蛋白との結合が確認された。また免疫沈降による解析では、C末端の166アミノ酸を欠失したVHL蛋白との結合能を失っていた。すたわちクローンV67のコードする蛋白は、VHL蛋白の領域のうち特に種を超えて保存されている部分に結合することが明らかになった。この領域は先に示したように、腎癌で変異を起こしている。腎癌で種々の変異を起こしたVHL蛋白のうちいくつかについてはelonginとの結合能を失うことが報告されている。しかしVHLの変異体のうちいくつかはelonginとの結合能を失わないことから、VHLとelonginの結合による転写伸長抑制作用のみでは腎癌発生の機序は説明できない。我々はクローンV67のコードする蛋白とVHL蛋白の変異体との結合能を調べ、このクローンV67の腎癌発生における役割を解明していきたい。

Heritage 伝 disease で あ る von Hippel Lindau - (VHL) disease の reason heritage 伝 は, this disease に merger す る kidney の み な ら ず natural born 発 の kidney cancer (clear cell type) で も に C terminal に high rate variations since different を こ し て い る こ と が report さ れ て い る. Recent ア メ リ カ の グ ル ー プ は immune sink に よ り, mutated protein は elongation factor S - III の subunit で あ る elonginB お よ び C と combining す る こ と を report し VHL protein の planning write elongation inhibition を in stopping し た. One applicant ら は 2 - hybrid system を with い て LHV に combining す る protein を に alone ク ロ ー ニ ン グ し elonginC の he に unknown の heritage 伝 child (ク ロ ー ン V67) を 単 from し た. ク ロ ー ン V67 の コ ー ド す る protein は エ ピ ト ー プ タ ッ グ シ ス テ ム を make っ た immune sink に て も VHL protein と の combining が confirm さ れ た. ま た immune sink に よ る parsing で は, C terminal の 166 ア ミ ノ acid を owe lost し た VHL protein と の binding energy lost を っ て い た. す た わ ち ク ロ ー ン V67 の コ ー ド す る protein は, mutated protein の の う ち に kinds of を super え て save さ れ て い る part に combining す る こ と が Ming ら か に な っ た. The <s:1> <s:1> field に first に shows たように, and the で variation of renal cancer を begins with る て る る る る. Kidney で kind 々 の - different を up こ し た VHL protein の う ち い く つ か に つ い て は elongin と の binding energy lost を う こ と が report さ れ て い る. し か し VHL の - variant の う ち い く つ か は elongin と の binding energy lost を わ な い こ と か ら, VHL と elongin の combining に よ る planning write elongation inhibition の み で は kidney 発 raw の machine sequence は illustrate で き な い. I 々 は ク ロ ー ン V67 の コ ー ド す る protein と VHL protein の - variant と の binding energy を べ, こ の ク ロ ー ン V67 の kidney 発 raw に お け cut を る service interpret し て い き た い.