DNA除去修復機構とその修復欠損の分子病態

DNA切除修复机制及其修复缺陷的分子发病机制

• 批准号: 08280101
• 负责人: 田中 亀代次
• 金额: $ 143.49万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08280101/
• 关键词: DNA修復; 転写; 発がん; 色素性乾皮症; 酸化的DNA損傷; コケイン症候群; ノックアウトマウス; HNPCC; 遺伝子クローニング; プロテアソーム; p53; マクレオチド除去修復; 塩基除去修復; ミスマッチ修復; 紫外線; 皮膚癌; 光回復; APエンドヌクレアーゼ

田中は、A群色素性乾皮症蛋白質、A及びB群コケイン症候群蛋白質、さらには、RNA polymerase IIと結合し、「転写と共役したヌクレオチド除去修復」及び転写機構に関与するXAB2蛋白質を同定し、XAB2が含まれる蛋白質複合体を精製した。質量分析法により、その構成因子をコードする遺伝子を同定した。マウスXAB2遺伝子をクローニングしてのち、XAB2遺伝子のノックアウトは胎児致死をもたらすことを明らかにした。RLGS法により、c-mycによるアポトーシス抑制に関わる転写因子がXPA欠損マウスの皮膚癌細胞で高発現していることを見つけた。花岡は、XP-V群の損傷DNA複製欠損を相補する蛋白質をHeLa細胞核抽出液より精製し、シクロブタン型ピリミジン2量体を乗り越えて正しく複製できる新規のDNAポリメラーゼであることを明らかにした。5例のXP-V群患者細胞において変異が確認されたことから、これがXPV責任遺伝子であることを証明した。安井は、8-オキソグアニンと誤対合したアデニンを切り出すヒトhMYH蛋白質が、ミトコンドリアと核に存在することを見つけた。また、光回復酵素のマウスホモログが日周リズムに必須の蛋白であることを示した。関は、大腸菌endonuclease IIIの哺乳類ホモログNTHL1遺伝子と結節性硬化症遺伝子TSC2とは、head to headで近接して存在し、両遺伝子の転写は基本的には両方向性のコアプロモーターで調節されていることを明らかにした。山泉は、電離放射線照射後のp53蛋白質セリン15のリン酸化がその安定化・活性化に重要であることを明らかにした。また、DDB2遺伝子に変異を持つXP-E群患者を見出し、この患者細胞ではピリミジン2量体の修復は正常だが6-4光産物の修復に遅れが認められることから、DDB2が6-4光産物の後期の修復に関与している可能性を示唆した。福重は、遺伝性非腺腫症性大腸癌の家系に見られる59種のhMLH1胚細胞変異のうち、50種でhMLH1-hPMS2相互作用の強い阻害を観察し、これがミスマッチ修復機構破壊の主な原因と考えた。

Tanaka び, protein of group A xeroderma pigmentosa, A and び group B コケ protein of <s:1> syndrome of the fallosan gland, さらに, RNA polymerase II と し, "planning to write と existing し た ヌ ク レ オ チ ド remove repair" and び planning write mechanism に masato and す る XAB2 protein を with し, XAB2 が containing ま れ る protein complex を refined し た. The quality analysis method によ によ, そ そ constituent factors をコ をコ ドする residual 伝 factors を all determine た た. マ ウ ス XAB2 posthumous son 伝 を ク ロ ー ニ ン グ し て の ち, XAB2 but 伝 の ノ ッ ク ア ウ ト は tire where death を も た ら す こ と を Ming ら か に し た. RLGS method に よ り, c - myc に よ る ア ポ ト ー シ ス inhibit に masato わ る planning write factor が XPA owe loss マ ウ ス の skin cancer cells で high 発 now し て い る こ と を see つ け た. Granite は, XP - V group is の damage DNA replication owe loss を fill す る protein を HeLa cell nucleus extract よ り refined し, シ ク ロ ブ タ ン type ピ リ ミ ジ ン 2 quantity body を 乗 り more え て is し く copy で き る new rules の DNA ポ リ メ ラ ー ゼ で あ る こ と を Ming ら か に し た. 5 patients with の XP - V group of cells に お い て - different が confirm さ れ た こ と か ら, こ れ が XPV responsibility heritage 伝 son で あ る こ と を prove し た. Ann Wells は, 8 - オ キ ソ グ ア ニ ン と mistakenly polices and し た ア デ ニ ン を り cutting out す ヒ ト hMYH protein が, ミ ト コ ン ド リ ア と nucleus に す る こ と を see つ け た. Youdaoplaceholder0, photoreticulase ウスホモログが ウスホモログが daily リズムに must <s:1> protein である た とを show た た. Masato は, coliform endonuclease III の mammals ホ モ ロ グ NTHL1 posthumous son 伝 と traces of tuberous sclerosis 伝 son TSC2 と は, head to head で nearly meet し て exist し, struck but 伝 の planning write は basic に は struck directional の コ ア プ ロ モ ー タ ー で adjust さ れ て い る こ と を Ming ら か に し た. Mountain spring は after ionizing radiation, の p53 protein セ リ ン 15 の リ ン acidification が そ の stabilization, activeness に important で あ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, DDB2 but 伝 に - different を hold つ を XP -e group of patients see し, こ の cells in patients with で は ピ リ ミ ジ ン 2 quantity body の repair は normal だ が の 6-4 light products repair に 遅 れ が recognize め ら れ る こ と か ら, DDB2 が late 6-4 light products の の repair に masato and し て い を る possibility in stopping し た. F heavy は, but 伝 not swollen glands disorder colorectal cancer の family に see ら れ る 59 の hMLH1 embryonic cells - different の う ち, 50 kinds of で hMLH1 - hPMS2 strong interaction の い resistance against を 観 し, こ れ が ミ ス マ ッ チ repair agency broken 壊 の main な reason と exam え た.

项目成果

Masutani, C.: "Identification and characterization of XPC-binding domain of hHR23B"Mol.Cell.Biol.. 17. 6915-6923 (1997)

Masutani, C.：“hHR23B XPC 结合域的鉴定和表征”Mol.Cell.Biol.. 17. 6915-6923 (1997)

Murai, H., et al.: "Studies of in vivo mutations in rpsL tarnsgene in UVB-irradiated epidermis of XPA-deficient mice"Mutation Res., in press.

Murai, H., 等人：“XPA 缺陷小鼠 UVB 照射表皮中 rpsL tarnsgene 的体内突变研究”Mutation Res.，出版中。

Kobayashi,T.,et.al.: "Mutational analysis of a function of xeroderna pigmentasum group A(XPA)protein in strand specific DNA repair." Nucleic Acid Res.26. 4662-4668 (1998)

Kobayashi,T.,et.al.：“着色性干皮病 A 组 (XPA) 蛋白在链特异性 DNA 修复中的功能突变分析。”

Yonemasu,R.: "Characterization of the alternative excision repair pathway of UV-damaged DNA in Schizosaccharomyces pombe." Nucleic Acids Res.25. 1553-1558 (1997)

Yonemasu,R.：“粟酒裂殖酵母中紫外线损伤 DNA 替代切除修复途径的表征。”

Sugasawa,K.: "HHR23B homolog,stimulates XPC protein in nucleotide excision repair in vitro." Mol.Cell.Biol.16. 4852-4861 (1996)

Sugasawa,K.：“HHR23B 同源物，在体外刺激 XPC 蛋白的核苷酸切除修复。”