転写因子の欠損に起因する発がんにおける基本転写因子の役割と核内シグナル伝達機構

基础转录因子及核信号转导机制在转录因子缺陷癌变中的作用

• 批准号: 15024240
• 负责人: 大熊 芳明
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024240/
• 关键词: 基本転写因子; TFIIE; TFIIH; RNAポリメラーゼII(Pol II); 転写開始; 転写伸長への移行; Znフィンガー領域; メディエーター複合体

1.ヒトTFIIEαのZnフィンガーの機能解析この領域の4個のシステインをアラニンに置換したC129A、C132A、C154A、C157Aと、グルタミン酸E140、アスパラギン酸D164をアラニン、リジンに置換したE140A、E140K、D164A、D164Kの点変異に関して、転写と他の基本転写因子との結合に関して解析した。その結果、ZnフィンガーのN末側は転写開始と伸長への移行の2段階に関わり、C末側は転写開始に機能する結果が得られた。他因子との相互作用を調べると、N末2変異はTFIIFβとの結合が強くなり、一方C末の2変異は、TFIIHのXPBサブユニットとの結合が減弱していたが、これらは転写結果を良く説明する。一方、酸性アミノ酸の点変異に関しては、転写がむしろ促進していた。特にD164Aは、転写活性が大きく増加してした。これら酸性領域には未知因子が機能している可能性が示唆され、今後これを検索していく。2.分裂酵母TFIIEとRNAポリメラーゼII(PolII)の相互作用の解析分裂酵母TFIIEの2サブユニットとPolIIサブユニットとの結合を調べたところ、TFIIEαはRpb5、βはRpb2とRpb12に強く結合した。PolIIは転写開始の際にその構造を変化させるが、その際に構造を変えるのは主にRpb5とRpb2である。これらに各々αとβサブユニットが結合することを我々が明らかにしたことで、転写の際にPolII活性中心近傍にTFIIEが結合するという事実と合わせ、この構造変化をTFIIE、特にそのαサブユニットが制御している可能性が考えられるに至った。3.メディエーター複合体の解析核内シグナル伝達に関わるメディエーターのサブユニットにタグを付け発現させるヒトHeLa細胞株を我々で確立し、これからメディエーターを精製したところ、3つのサブタイプからなることが分った。

1. The TFIIE α Zn data acquisition machine can analyze the four real estate data sets C129A, C132A, C154A, C157A, E140, D164A, E140A, E140K, D164A, D164A, D164K, and write the basic writing factors of each other. The results of the test, the Zn test results, the start of the second phase of the migration cycle, and the start of the C terminal test, the results are satisfactory. The other factors interact with each other, and the results of N-terminal 2-terminal TFIIF β-terminal combined with strong one, one-side C-terminal 2-terminal, TFIIHV-XPBT and TFIIH-XPBL were analyzed in combination with the weak one, and the results were good. On the one hand, the acid is acid, the acid is acid. Special D164A, "write activity", "write", "write" and "write". The possibility of an unknown factor in the acidic field will indicate that it is possible to do so, and in the future, it will be necessary to ask for more information. two。 Analysis of the interaction between TFIIE RNA yeast and Rpb2 yeast II (PolII) interaction Analysis of split yeast TFIIE

项目成果

Watanahe, T. et al.: "The carboxy terminus of the small subunit of TFIIE regulates the transition from transcription initiation to elongation by RNA polymerase II."Mol.Cell.Biol.. 23・8. 2914-2926 (2003)

Watanahe, T. 等人：“TFIIE 小亚基的羧基末端通过 RNA 聚合酶 II 调节从转录起始到延伸的转变。”Mol.Cell.Biol.. 23・8 (2003)。

Fujita, N. et al.: "MCAF mediates MBD1-dependent transcriptional repression"Mol.Cell.Biol.. 23・8. 2834-2843 (2003)

Fujita, N. 等：“MCAF 介导 MBD1 依赖性转录抑制”Mol.Cell.Biol.. 23・8（2003）。