がん細胞の接着が誘発する血管内皮細胞間隙の開裂に関わるシグナル伝達分子の探索

寻找参与癌细胞粘附诱导的血管内皮细胞间隙裂解的信号分子

• 批准号: 10152237
• 负责人: 田中 稔之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152237/
• 关键词: がん転移; 接着分子; CD44; 信号伝達; 高内皮細静脈(HEV); 3'末端特異的cDNAライブラリ; transmigration; 遺伝子発現プロフィル

【1】 キメラCD44を用いた新しい接着シグナルの検出系の確立とCD44の機能的エピトープの解析:CD44の細胞内領域にFasのdeath domainを含む細胞内領域を連結したキメラ分子をCD44を発現しないAKR-1細胞に遺伝子導入し、CD44の接着シグナルを細胞死へ変換する新しい検出系を確立した。この検出系とCD44の異なるエピトープに対する単クローン抗体(mAb)を用いて、CD44のシグナル形成に関与する細胞外領域の特定を試みた。その結果、LyS49を含むCD44のヒアルロン酸結合に関連するエピトープを認識するmAbおよびPro108/Thr113を含むエピトープに対するmAbにアポトーシス誘導活性が認められた。【2】 血管内皮細胞に発現しtransmigrationを制御する信号伝達分子の検索:リンパ節の高内皮細静脈(HEV)はその表面に接着した細胞を高率にtransmigrateさせる特徴をもつ。そこで、精製したHEVから3′末端特異的cDNAライブラリを作製し、各々約1,500クローンの塩基配列(gene、signature:GS)の決定とGSの出現頻度解析を通じてHEVの「遺伝子発現プロフィル」を得た。また、CD31^+内皮細胞やリンパ球を含む他のライブラリの解析リストとの比較およびデータベース検索を通じてHEV特異的遺伝子の探索を試みた。その結果、HEVにはendoglinやCD34などの既知の内皮細胞マーカーに加え、炎症反応に関連する遺伝子などの発現が認めれられた。またHEVに選択的に検出された既知遺伝子のうち、出現頻度の高いmac25/TAFについてin situハイブリダイゼーションを行ったところ、HEVに選択的にシグナルが検出された。

【 1 】 キ メ ラ CD44 を with い た new し い then シ グ ナ ル の 検 out is の establish と CD44 の functionary エ ピ ト ー プ の analytic: CD44 の intracellular domain に Fas の death Field contains domain を む cell を link し た キ メ を ラ molecules CD44 を 発 now し な い AKR - 1 cell に heritage 伝 import し, CD44 の then シ グ ナ ル を cell death へ variations in す る new し い を 検 out department establish し た. こ の 検 out department と CD44 の different な る エ ピ ト ー プ に す seaborne る 単 ク ロ ー ン antibody (mAb) を い て, CD44 の シ グ ナ ル form に masato and す る extracellular domain specific を の try み た. そ の results, LyS49 を containing む CD44 の ヒ ア ル ロ ン acid combined with に masato even す る エ ピ ト ー プ を know す る mAb お よ び Pro108 / Thr113 を containing む エ ピ ト ー プ に す seaborne る mAb に ア ポ ト ー シ ス induction activity が recognize め ら れ た. [2] endothelial cells に 発 now し transmigration を suppression す 伝 る signal of molecular の 検 suo: リ ン パ section の high endothelial small veins (HEV) は そ の surface に then し た cells を high rate に transmigrate さ せ る, 徴 を も つ. そ こ で, refined し た HEV か ら 3 'end specific cDNA ラ イ ブ ラ リ を し, the different 々 about 1500 ク ロ ー ン の salt base with column (GS) gene, signature: の decide frequency と GS の parsing を tong じ て HEV の "heritage 伝 son 発 now プ ロ フ ィ ル" を た. ま た, CD31 ^ + endothelial cells や リ ン パ を contain む he の ラ イ ブ ラ リ の parsing リ ス ト と の is お よ び デ ー タ ベ ー ス 検 cable を tong じ て HEV specific heritage 伝 son の try to explore を み た. そ の results, HEV に は endoglin や CD34 な ど の already know の endothelial cells マ ー カ ー に え, anti inflammation 応 に masato even す る heritage 伝 son な ど の 発 が now recognize め れ ら れ た. The ま た HEV に sentaku に 検 out さ れ た son already know but 伝 の う ち high frequency, の い mac25 / TAF に つ い て in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン を line っ た と こ ろ, HEV に sentaku of に シ グ ナ ル が 検 out さ れ た.

项目成果

T.Iizuka et al.: "Cloning and characterization of the rat MAdCAM-1 cDNA and gene" Biochim.Biophys.Acta.1395. 266-270 (1998)

T.Iizuka 等人：“大鼠 MAdCAM-1 cDNA 和基因的克隆和表征”Biochim.Biophys.Acta.1395。

Y.Ohta et al.: "Direct antigen presentation through binding of donor ICAM-1 to recipient LFA-1 molecules in xenograft rejection" Transplantation. 65. 1094-1100 (1998)

Y.Ohta 等人：“在异种移植排斥反应中，通过供体 ICAM-1 与受体 LFA-1 分子结合来直接呈递抗原”移植。

S.Tsuzuki et al.: "Intracellular signal-transducing elements involved in transendothelial migration of lymphoma cells" Jpn.J.Cancer Res.89. 571-577 (1998)

S.Tsuzuki 等人：“参与淋巴瘤细胞跨内皮迁移的细胞内信号转导元件”Jpn.J.Cancer Res.89。