腫瘍細胞のアポトーシス誘導を目的としたアンチセンス治療法の開発

开发旨在诱导肿瘤细胞凋亡的反义疗法

• 批准号: 10153217
• 负责人: 前川 平
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153217/
• 关键词: アンチセンス; アポトーシス; Bcl-2; c-myc; BCR-ABL; 細胞治療

我々は活性化あるいは増幅された癌遺伝子に対するアンチセンス・オリゴヌクレオチド(AS ODN)を用いて白血病細胞の増殖抑制とその機序を検討し、以下の諸点を明らかにした。(1) 慢性骨髄性白血病(CML)の特異的再構成遺伝子BCR-ABLに対するAS ODNがCML細胞の増殖を抑制し、その機序はアポトーシスの誘導であること。c-myc AS ODNでc-mycの発現を低下させると白血病細胞株HL60の増殖が抑制され、さらにその状態からc-mycの発現を急に増強させると、G_1/S期境界の細胞が選択的に、かつ大量にアポトーシスをおこすこと。また、慢性関節リウマチで増殖する滑膜細胞にc-mycアンチセンス核酸分子を導入したところ、Fas/Fas ligandを介したアポトーシスが誘導されることを示した。(2) アンチセンス核酸分子の5'端および3'端の両端から4塩基間の3つの化学結合をホスホロチオエート型結合とし、中央の塩基の化学結合をホスホジエステル型としたキメラ型分子の合成方法、精製方法を確立し、このキメラ型分子が、すべての塩基間結合がホスホロチオエート型結合の核酸分子と同様、ヌクレアーゼによる分解に耐性であること。(3) 従来のホスホロチオエート型結合をもつアンチセンス核酸分子と異なり、同様上記のキメラ型アンチセンス核酸分子は非特異的に蛋白質と結合したり、Bリンパ球を非特異的に刺激するなどの非特異的作用や非アンチセンス作用を示す程度が少ないこと。(4) キメラ型骨格をもったBcl-2,c-myc,EPOレセプター、およびケモカインSDF-1のレセプターであるCXCR4に対するアンチセンス核酸分子が有効な機能を有していること。Bcl-2アンチセンス核酸分子の最も有効な、従来の報告とは異なる標的配列を決定したこと。

The mechanism of leukemia cell proliferation inhibition using ASODN (ASODN) is discussed. The following points are discussed. (1)BCR-ABL, a specific reconstructive gene of chronic osteoblastic leukemia (CML), inhibits the proliferation of CML cells and induces the development of various mechanisms. c-myc AS ODN, c-myc production decreased, the proliferation of leukemia cell line HL60 was inhibited, and the state of c-myc production increased rapidly. C-myc gene expression in synovial cells is induced by Fas ligand. (2)Chemical binding between the 5'and 3' termini of nucleic acid molecules and the 3'termini of the 4' termini of nucleic acid molecules. Chemical binding between the 5 'termini and 3' termini of nucleic acid molecules. Chemical binding between the 5 'termini and 3' termini of nucleic acid molecules. Chemical binding between the 5 'termini and 3' termini.ヌクレアーゼによる分解に耐性であること。(3)A nucleic acid molecule that binds to a non-specific protein binds to a non-specific stimulus. A nucleic acid molecule binds to a non-specific protein. A nucleic acid molecule binds to a non-specific stimulus. A nucleic acid molecule binds to a non-specific protein. A nucleic acid molecule binds to a non-specific stimulus. (4)CXCR4 is a functional molecule of Bcl-2,c-myc,EPO, SDF-1 and CXCR4. Bcl-2 gene expression is the most important gene in the nucleic acid molecule.

项目成果

前川 平 他: "B細胞分化" 血液・免疫・腫瘍. 4. 31-39 (1999)

Maekawa, H. 等人：“B 细胞分化”血液学/免疫学/肿瘤。4. 31-39 (1999)

Kishi,K et al.: "Hematopoietic cytokine-dependent differentiation to esesinophils and neutrophils in a newly established…" Exp.Hematol. 26. 135-142 (1998)

Kishi, K 等人：“新建立的造血细胞因子依赖性分化为嗜酸性粒细胞和中性粒细胞……”Exp.Hematol。

Hashiramoto,A et al: "Induction of apoptosis and Fas downregulation by c-myc antiserls oligodaexy nucleotides in rheume." Arthrit Rheumatism. 印刷中. (1999)

Hashiramoto, A 等人：“关节炎风湿病中 c-myc 抗血清寡聚核苷酸诱导细胞凋亡和 Fas 下调”。

前川 平: "がんの遺伝子治療とアンチセンス治療"治療. 81. 865-870 (1999)

Taira Maekawa：“癌症的基因疗法和反义疗法”治疗。81. 865-870 (1999)。

Chikayama,S et al: "Effects of dantrarubiair on cell growth cell cycle and induction of apoptosis in HL-60 cells" Hematologia. 29. 115-121 (1998)

Chikayama,S 等人：“dantrarubiair 对细胞生长、细胞周期和诱导 HL-60 细胞凋亡的影响”Hematologia。