がん細胞のアポトーシス誘導を目的としたアンチセンス治療法の開発

开发旨在诱导癌细胞凋亡的反义疗法

• 批准号: 12217039
• 负责人: 前川 平
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217039/
• 关键词: アンチセンス; アポトーシス

我々は活性化あるいは増幅されたがん遺伝子に対するアンチセンス・オリゴヌクレオチド(AS ODN)を用いて白血病細胞の増殖抑制とその機序を検討、AS ODNの作用機序、細胞膜透過性や至適培養条件、標的配列の選択基準について多くのノウハウを蓄積してきた。従来のホスホロチオエート型AS ODNでは非特異的作用があり、これを克服するためにキメラ型AS ODNを作製して、血液細胞、白血病細胞の分化・増殖に及ぼす影響とその機序を検討し、以下の諸点を明らかにした。(1)アンチセンス核酸の分子設計:あたらしく考案したホスホロチオエート結合とホスホジエステル結合からなるキメラ型アンチセンス核酸分子を合成し、その精製方法を確立した。(2)上記のキメラ型アンチセンス核酸分子は非特異的に蛋白質と結合したり、Bリンパ球を非特異的に刺激するなどの非特異的作用や非アンチセンス作用を示す程度が少ないことを示した。(3)カチオン性脂質DOTAPをもちいた細胞内へのアンチセンス核酸分子の取り込み効率の改善:カチオン性脂質DOTAP(N-[1-(2,3-Dioleoxyloxy)propyl]-N,N,N-trimethyl-ammoniummethylsulfate)をもちいてアンチセンス核酸分子を細胞内に効率よく取り込ませることに成功した。(4)キメラ型骨格をもったEPOレセプターに対するAS ODNをもちいて赤芽球系細胞においてEPOが自己産生されることを見い出した。(5)赤白血病の増殖にEPOのオートクライン産生が関与し、EPOR AS ODNによりアポトーシスに誘導されること。(6)トロンポポエチン(TPO)・レセプターに対するキメラ型AS ODNをもちいて巨核球系前駆細胞においてTPOが自己産生されること。

The mechanism of proliferation inhibition of leukemia cells was discussed, including the mechanism of action of AS ODN, cell membrane permeability, optimal culture conditions, and selection criteria for target alignment. The mechanism of non-specific effects of AS ODN on the differentiation, proliferation and proliferation of blood cells and leukemia cells is discussed. The following points are clarified. (1)Molecular design of nucleic acids: establishment of methods for synthesis and purification of nucleic acid molecules (2)Note that the nucleic acid molecule binds to a non-specific protein, and the B protein binds to a non-specific stimulus. (3)DOTAP(N-[1-(2,3-Dioleoxyloxy)propyl]-N,N,N-trimethyl-ammoniummethylsulfonate) is a novel lipid molecule for the detection of nucleic acid molecules. (4)Epo is produced by the cell line of the red bud. (5)The relationship between EPO production and erythroleukemia proliferation, EPOR AS ODN production and erythroleukemia induction (6)TPO is produced by megakaryocyte precursor cells.

项目成果

Sato,T. et al.: "Erythroid progenitors differentiate and maturate in response to endogenous erythropoietai"J.Clin.Invest.. 106. 263-270 (2000)

佐藤，T.

前川平: "アンチセンス法の原理,実験方法と臨床応用.-臨床血液実験操作法"科学評論社(高久史麿,溝口秀昭他編). 628 (2000)

Taira Maekawa：“反义方法的原理、实验方法和临床应用。-临床血液实验程序” Kagaku Hyoronsha（由 Fumimaro Takahisa、Hideaki Mizoguchi 等编辑）628（2000）。

Macida,U. et al.: "The effect of granulocyte colony-stimulating factor administration in healthy donor"Biol J Haematol. 108. 747-753 (2000)

马西达，U.

Hase,H. et al: "TCR-VB repertoire analysis with RT-PCR was useful for the early detection of …"Am.J.Hematol. 64(2). 124-127 (2000)

Hase, H. 等人：“RT-PCR 的 TCR-VB 谱分析对于早期检测……”Am.J.Hematol 64(2) 124-127 (2000)。

Sasaki,S. et al: "Growth inhibition of a Buckitt cell line by B-cell specific transcription factor"Oncogene. 19(33). 3739-3749 (2000)

佐佐木，S.