p53関連遺伝子の発現を指標とする抗腫瘍活性の新検索システムの開発と応用

以p53相关基因表达为指标的新型抗肿瘤活性搜索系统的开发与应用

• 批准号: 10153260
• 负责人: 望月 正隆
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153260/
• 关键词: 抗腫瘍活性スクリーニング; p53; アポトーシス; 制がん性化合物

本研究は、抗腫瘍油性の一次スクリーニングのためにヒト白血病細胞を用いた検索システムを開発し、より効果的な制がん化合物の創製に役立てることを目的とした。ヒト由来白血病細胞4種についてp53遺伝子の表現型とDNA損傷性ストレスに対する応答との関連を調べた。その結果、正常p53遺伝子(+/+)を持つCCRF-HSB-2細胞においてp53タンパク発現誘導に基づくアポトーシスおよびGl期停止が顕著に認められた。作用機序が異なる種々のDNA損傷性抗腫瘍化合物11種を用い、CCRF-HSB-2細胞におけるp53タンパク発現、アポトーシス誘導を調べた結果、全ての化合物が50%生育阻害濃度においてp53夕ンパクを発現させ、それに伴うアポトーシスが観察された。この現象は抗腫瘍性化合物に特異的だった。新規 DNA損傷性化合物である bis(bromomethyl)quinoline、類およびN-nitroso-N-(acetoxymethyl)-ω-chloroalkylamine類について本検索システムを適用した。その結果、CCRF-HSB-2細胞に対してcisplatinと同等の強い細胞毒性を示し、同程度のp53遺伝子発現誘導能を持つものが存在することが明らかとなった。これら新規化合物の作用機構は既知の制がん剤と同様のDNAクロスリンクおよびDNA鎖切断であるため、本検索システムを用いた結果と併せると、in vivoにおける抗腫瘍活性が期待されることが示唆される。ヒト白血病由来CCRF-HSB-2細胞はp53遺伝学が正常型であり、さらにヒト由来の細胞であるため、より現実的な活性スクリーニングが可能である。新規化合物への適用も可能であることから、本法が抗腫瘍活性の新検索システムとして有用であると考える。

This study explores the use of anti-swelling oily leukemia cells The システムを开発し, the より effect of the ながん compound のcreation に佫立てることをpurpose とした.ヒト origin of leukemia cells 4 kinds of についてp53 inherited 伝子のphenotype and DNA damaging ストレスに対する応respond とのrelated をadjusted べた.そのResults, normal p53 legacy (+/+) をhold つCCRF-HSB-2 cells においてp 53タンパク発appears to induce the にbased づくアポトーシスおよびGl period to stop the が顕怫 recognized められた. Mechanism of action: 11 types of DNA-damaging anti-tumor compounds, CCRF-HSB-2 cells, 11 kinds of DNA-damaging anti-tumor compoundsスinducing をadjusted べた results, all ての compounds が50% fertility inhibitor concentration においてp53 夜ンパクを発appears させ, それに companion うアポトーシスが観看された. This phenomenon is the result of the specificity of anti-tumor compounds. New regulations include DNA-damaging compounds bis(bromomethyl)quinoline and N-nitroso-N-(acetoxymethyl)-ω-chloroalkylamine-like compounds. The results showed that CCRF-HSB-2 cells had the same strong cytotoxicity as cisplatin. To the same extent, the p53 legacy can be induced by the presence of the disease.これらThe mechanism of action of the new regulated compound is already known, and the system is the same as the DNA.よびDNA lock cutting であるため、本検SO システムを用いた results と和せると、in Vivo's anti-tumor activity is expected to be positive.ヒトLeukemia origin CCRF-HSB-2 cells はp53 genetics がNormal type であり、さらThe origin of the cell is the cell, and the active cell of the origin is the active cell. The new regulated compounds are applicable and possible, and the anti-tumor activity of this method is new and the new compounds are useful and effective.

项目成果

U.-Ishikawa,S.,Sawada,A.,Kasuya,K.,Mochizuki,M.: "Mutagenicity of isomeric alkanediazotates,precursors for ultimate alkylating species of carcinogenic N-nitroso compounds." Mutation Research. 412. 99-107 (1998)

U.-Ishikawa,S.、Sawada,A.、Kasuya,K.、Mochizuki,M.：“异构链烷重氮化物的致突变性，致癌性 N-亚硝基化合物最终烷基化的前体。”

U.-Ishikawa,S.,Seki,M.,Mochizuki,M.: "Mutagenicity of potassium alkanediazotates in Chinese hamster V79 cells and their alkylating activity." Biological and Pharmaceutical Bulletin. (in press). (1999)

U.-Ishikawa,S.、Seki,M.、Mochizuki,M.：“中国仓鼠 V79 细胞中链烷重氮化钾的致突变性及其烷基化活性。”