シトクロムP450化学モデル系によるN-ニトロン化合物の代謝活性化分子機構の解明

使用细胞色素 P450 化学模型系统阐明 N-硝酮化合物代谢活化的分子机制

• 批准号: 07672287
• 负责人: 望月 正隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672287/
• 关键词: N-ニトロソジアルキルアミン; シトクロムP450; 化学モデル系; ポルフィリン金属錯体; 酸化剤; 代謝活性化; 突然変異原性; ニトロサミノラジカル

本研究では活性化の代替系としてシトクロムP450化学モデル系を用い、N-ニトロソジアルキルアミンの代謝機構の研究に応用することを目的とした。ポルフィリン金属錯体には脂溶性のテトラキス(ペンタフルオロフェニル)ポルフィリン鉄錯体(Fe(F_5P)Cl)を用い、酸化剤としてt-ブチルヒドロペルオキシド(t-BuOOH)の存在下、モデル反応系において不安定中間体の捕捉を試み、N-ニトロソジアルキルアミン由来の炭素ラジカル種の生成をESR測定により確認した。この結果は、N-ニトロソジアルキアミンのα-水酸化で、水素引き抜き反応により生じるα位炭素ラジカルをもつニトロサミンを中間体としている可能性を示した。さらに、化学モデル系による代謝活性化を細菌の突然変異原性を指標に検討し、4種の異なる側鎖をもつN-ニトロソジアルキルアミン(アルキル=メチル、エチル、プロピル、ブチル)についてアルキル化剤に感受性の高いS.typhimuriumYG7108に対して強い変異原性を発現した。この変異原性は代謝酵素系での試験と同様、菌濃度の増加および弱酸性条件によって変異原活性が上昇し、N-ニトロソジアルキルアミンの代謝活性化がα-水酸化経由で進行していることを明確にした。さらにFe(F_5P)Cl/t-BuOOHの存在下、フレームシフト型の変異を検出するS.typhimuriumTA1538を用い、発がん物質である2-アミノフルオレン、ベンゾ(a)ピレンおよびトリプトファン熱分解物であるTrp-p-1とTrp-p-2の代謝活性化能を観察したところ、いずれの化合物においても用量に依存して変異原性が発現した。以上の結果から、ポルフィリン金属錯体/酸化剤によるシトクロムP450の化学モデル系は、代謝研究における反応機構の検討に有用であり、様々な発がん物質への応力が可能である。

This study で は activeness の instead of と し て シ ト ク ロ ム P450 chemical モ デ ル を use い, N - ニ ト ロ ソ ジ ア ル キ ル ア ミ ン の metabolic institution の research に 応 with す る こ と を purpose と し た. ポ ル フ ィ リ ン metal misprinted に は fat-soluble の テ ト ラ キ ス (ペ ン タ フ ル オ ロ フ ェ ニ ル) ポ ル フ ィ リ ン iron objects misprinted (Fe (F_5P) Cl) を い, acidification tonic と し て t - ブ チ ル ヒ ド ロ ペ ル オ キ シ ド (t - BuOOH), in the presence of の モ デ ル anti 応 department に お い て unrest intermediates の capture を み, N - ニ ト Youdaoplaceholder0 ロソジア キ キ ア ア ア ロソジア origin of <s:1> carbon ラジカ ラジカ species <e:1> generation をESR determination によ confirmation た. こ の results は, N - ニ ト ロ ソ ジ ア ル キ ア ミ ン の alpha water acidification で, element lead き sorting き anti 応 に よ り raw じ る alpha a carbon ラ ジ カ ル を も つ ニ ト ロ サ ミ ン を intermediates と し て い る possibility を shown し た. さ ら に, chemical モ デ ル department に よ る metabolic activation を bacteria の suddenly - different original を index に beg し 検, four の different な る side chain を も つ N - ニ ト ロ ソ ジ ア ル キ ル ア ミ ン (ア ル キ ル = メ チ ル, エ チ ル, プ ロ ピ ル, ブ チ ル) に つ い て ア ル キ ル the tonic に sensitivity high の い S.t yphimuriumYG7108 Youdaoplaceholder0 shows を た for the strong に variability of て. こ の - different original sex は metabolic enzyme で の test と with others, bacteria concentration の raised お よ び weakly acidic conditions に よ っ て - different original active が rise し, N - ニ ト ロ ソ ジ ア ル キ ル ア ミ ン の metabolic activation が alpha water acidification 経 by で し て い る こ と を clear に し た. さ ら に Fe (F_5P) Cl/t - BuOOH の presence, フ レ ー ム シ フ ト type の - different を 検 out す る S.t yphimuriumTA1538 を い, 発 が ん material で あ る 2 - ア ミ ノ フ ル オ レ ン, ベ ン ゾ (a) ピ レ ン お よ び ト リ プ ト フ ァ ン pyrolysis content で あ る Trp と Tr - p - 1 P - p - 2 の metabolic activation can を 観 examine し た と こ ろ, い ず れ の compound に お い て も dosage に dependent し て - different original sex が 発 now し た. の above results か ら, ポ ル フ ィ リ ン metal misprinted/acidification tonic に よ る シ ト ク ロ ム P450 の chemical モ デ ル は, metabolic research に お け る の 応 authorities beg に 検 useful で あ り, others 々 な 発 が ん material へ の が 応 force may で あ る.

项目成果

E.Okochi, M.Mochizuki: "Dealkylation of N-Nitrosodibenzyamine by Metalloporphyrin/oxidant Model Systems for Cytochrome P450" Chem. Pharm. Bull.43. 2173-2176 (1995)

E.Okochi、M.Mochizuki：“细胞色素 P450 的金属卟啉/氧化剂模型系统对 N-亚硝基二苯胺进行脱烷基化” Chem。

E.Okochi, E.Namai K.Ito, M.Mochizuki: "Activation of N-Nitrosodialkylamines to Mutagens by a Metalloporphyrin/oxidant Model System for Cytochrome P450" Biol. Pharm. Bull.18. 49-52 (1995)

E.Okochi、E.Namai K.Ito、M.Mochizuki：“细胞色素 P450 的金属卟啉/氧化剂模型系统将 N-亚硝基二烷基胺激活为诱变剂”Biol。