線条体由来非蛋白性物質によるドーパミンニューロン死の制御

纹状体来源的非蛋白质物质控制多巴胺神经元死亡

• 批准号: 10176214
• 负责人: 赤池 昭紀
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10176214/
• 关键词: 一酸化窒素; エステラジオール; グルタミン酸; 神経毒性; 神経保護; 線条体; ドーパミン; パーキンソン病

これまで我々はNOを介するグルタミン酸神経毒性がドーパミン(DA)ニューロンに対するMPP^+の選択的毒性発現に重要な役割を果たすこと、さらに、ドーパミンD2受容体アゴニストおよび培養線条体細胞条件培地(CM)エーテル抽出物がグルタミン酸神経毒性に対して保護作用を発現すること、さらにCM中の神経保護活性物質の一部はCMに添加されている牛胎仔血清(FCS)に由来することを報告してきた。そこで、本研究ではグルタミン酸-NO系により誘発されるDAニューロン死を抑制する内在性物質としてFCSおよびCM由来蛋白性神経保護活性物質に注目し、以下の研究を行った。1)FCS由来神経保護活性物質の精製と化学構造の解析:FCSのエーテル抽出物をアセトニトリル/水相糸、および、メタノール/水相系の2段階の逆相クロマトグラフィーにて分類することにより、NO神経毒性とグルタミン酸神経毒性の両者を強く抑制する分画を得た。その分画についてマススペクトリー解析を行ったところ、ほぼ単一物質にまで精製されており、分子量に255に大きなフラグメントピークを持つ分子量365ないし383の物質であることが確認された。MS/MS解析の結果、本化合物はステロイド骨格を持つこと、既存の生理活性ステロイドとは異なることなどが明らがになった。3位のケトンが水酸化されていることから水酸化ステロイドの一種であると推定している。2)エステラジオールの神経保護作用:ラット胎仔由来培養中脳細胞を用いて、抗酸化作用を持つステロイドの一つとしてエステラジオール(17β-esteradiol)のグルタミン酸神経毒性に対する作用を検討した。17β-esteradiolはDAニューロンおよび非DAニューロンにおけるグルタミン酸神経毒性をともに抑制したが、その神経保護作用はエストロゲン受容体拮抗薬および蛋白合成阻害薬の影響を受けなかった。さらに、不活性光学異性体の17α-esteradiolもグルタミン酸神経毒性を抑制した。一方、コルチコステロンおよびテストステロンはグルタミン酸神経毒性を抑制しなかった。17β-esteradiolは過酸化水素により誘発される神経毒性も抑制した。以上の結果はエステラジオールが活性酸素種による神経毒性を抑制することにより中脳DAニューロンに対する保護作用を発現することを示唆する。

こ れ ま で I 々 は NO を interface す る グ ル タ ミ ン acid toxicity of god 経 が ド ー パ ミ ン (DA) ニ ュ ー ロ ン に す seaborne る MPP ^ + の sentaku toxicity 発 に now important な "を cut fruit た す こ と, さ ら に, ド ー パ ミ ン D2 by let body ア ゴ ニ ス ト お よ び culture lines somatic conditions the petty (CM) エ ー テ ル extract が グ ル タ ミ ン acid of god 経 toxicity に し seaborne て protection を 発 now す る こ と, さ ら に の 経 god protect the active material in the CM の a は CM に add さ れ て い る bovine fetal seed serum (FCS) に origin す る こ と を report し て き た. そ こ で, this study で は グ ル タ ミ ン acid - NO に よ り 発 lure さ れ る DA ニ ュ ー ロ ン die を inhibit す る internality material と し て FCS お よ び CM origin sex god 経 of proteins that protect the active substances に attention し line, the following の を っ た. 1) FCS by return 経 protection active substances の refined chemical structure の と analytic: FCS の エ ー テ ル extract を ア セ ト ニ ト リ ル / water phase si, お よ び, メ タ ノ ー ル / water phase is の 2 paragraph order の anti-phase ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に て classification す る こ と に よ り, NO god 経 toxicity と グ ル タ ミ ン acid toxic の 経 god who struck strong を く inhibit す る points Draw を to た. そ の points draw に つ い て マ ス ス ペ ク ト リ ー parsing line を っ た と こ ろ, ほ ぼ 単 に a substance ま で refined さ れ て お り, large molecular weight 255 に に き な フ ラ グ メ ン ト ピ ー ク を つ molecular weight 365 な い し 383 の substance で あ る こ と が confirm さ れ た. MS/MS analytical の results, the compound は ス テ ロ イ ド bone を hold つ こ と, existing の physiological activity ス テ ロ イ ド と は different な る こ と な ど が Ming ら が に な っ た. Three の ケ ト ン が water acidification さ れ て い る こ と か ら water acidification ス テ ロ イ ド の a で あ る と presumption し て い る. 2) エ ス テ ラ ジ オ ー ル の 経 protection: god ラ ッ ト tire seed culture origin in 脳 を with い て, acidification を hold つ ス テ ロ イ ド の a つ と し て エ ス テ ラ ジ オ ー ル (17 beta esteradiol) の グ ル タ ミ ン acid toxicity of god 経 に す seaborne る role を beg し 検 た. 17 beta esteradiol は DA ニ ュ ー ロ ン お よ び non DA ニ ュ ー ロ ン に お け る グ ル タ ミ ン acid toxicity of god 経 を と も に inhibit し た が, そ の 経 god protect は エ ス ト ロ ゲ ン by let body antagonism 薬 お よ び protein synthesis resistance against 薬 の を by け な か っ た. Youdaoplaceholder0, inactive optically anisotropic <s:1> 17α-esteradiol グ グ タ タ タ <s:1> acid toxicity を inhibition た た た. One party: コ チコステロ チコステロ およびテストステロ およびテストステロ およびテストステロ グ グ タ タ the <s:1> acid has a neurotoxic を inhibitory effect on な な った った った. 17β-esteradiol <s:1> acidified hydrolysin によ される induce される neurotoxicity <s:1> inhibit た た. の above results は エ ス テ ラ ジ オ ー ル が acid active element of に よ る god 経 toxicity を inhibit す る こ と に よ り 脳 in DA ニ ュ ー ロ ン に す seaborne る protection を 発 now す る こ と を in stopping す る.

项目成果

Kihara, T.et al: "Stimulation of α4β2 nicotinic acetylcholine receptors inhibits β-amyloid toxicity." Brain Res.792. 331-334 (1998)

Kihara, T. 等人：“刺激 α4β2 烟碱乙酰胆碱受体可抑制 β-淀粉样蛋白毒性。”Brain Res.792 (1998)。

Kinoshita, M.et al: "Inhibitory effects of bifemelane on brain Ca^<2+> channel subtypes expressed in Xenopus oocytes." Jpn.J.Pharmacol.78. 39-44 (1998)

Kinoshita, M.等人：“bifemelane 对非洲爪蟾卵母细胞中表达的脑 Ca^2 通道亚型的抑制作用。”

Sakurai, E.et al: "Inhibition by [Arg^8]-vasopressin of long term potentiatino in guinea pig hippocampal slice." Jpn.J.Pharmacol.77. 103-105 (1998)

Sakurai, E.et al：“[Arg^8]-加压素对豚鼠海马切片中长期电位的抑制。”

Urushitani, M.et al: "Mechanism of selective motor neuronal death after exposure of spinal cord to glutamate : involve-ment of glutamate-induced nitric oxide in motor neuron toxicity and nonmotor neuron protection." Ann.Neurol.44. 796-806 (1998)

Urushitani, M.等人：“脊髓暴露于谷氨酸后选择性运动神经元死亡的机制：谷氨酸诱导的一氧化氮参与运动神经元毒性和非运动神经元保护。”

Kaneko, S.et al.: "Differential regulation of N-and Q-type Ca^<2+> channels by cyclic nucleotides and G-proteins." Life Sci.62. 1543-1547 (1998)

Kaneko, S.et al.：“环核苷酸和 G 蛋白对 N 型和 Q 型 Ca^2 通道的差异调节”。