傷害血管壁再構築におけるTGF-βおよび細胞外マトリクスの動的役割 組換えアデノウィルスを利用した血管壁遺伝子導入による分子細胞生物学的解析

TGF-β和细胞外基质在受损血管壁重建中的动态作用使用重组腺病毒进行血管壁基因转移的分子细胞生物学分析。

• 批准号: 10177224
• 负责人: 上野 光
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10177224/
• 关键词: TGF-β; 細胞外マトリクス; 遺伝子導入; アデノウィルス; 変異型TGF-β受容体

1. 細胞外マトリクスの産生・蓄積が血管壁の硬化(弛緩反応の低下)と内腔の狭窄の主因であり、この過程はTGF-βで制御されている可能性が高い。この仮説を検証するために、TGF-βの作用を特異的に抑制できる変異型TGF-β受容体産生アデノウイルスを作製し、傷害血管壁への導入を開始した。2. 変異型TGF-β受容体遺伝子を肝臓線維症モデルに導入したところ、肝臓線維化が著明に抑制され、血清中の肝細胞酵素は低値に保たれ、全例肝不全から救命できた。不可逆的線維化におけるTGF-βの中心的役割を実証するとともに線維化の抑制が治療的であることを初めて明らかにした(論文印刷中)。TGF-βの役割解明での上述の戦略の有効性が検証できた。3. 受容体の細胞外ドメインのみの可溶型受容体を過剰発現させるとリガンドを吸着してその作用を抑制できる。生体内でもこの戦略が有効か否かを肝臓線維化モデルで検証したところ、変異型受容体と同様の抑制効果を観察し得た(論文投稿中)。可溶型受容体の導入は標的臓器とは離れた組織(筋肉)でも同様の抑制効果が得られた。この戦略では標的臓器の一部の細胞に遺伝子導入されればよいばかりか、全く離れた部位への導入でもよいことになる。短時間内に遺伝子導入を行う必要のある血管壁への遺伝子導入ではとくに重要な知見である。4. 研究計画で予定していたいくつかの新しい発現ベクターの作製に成功した。

1. It is highly probable that the production and accumulation of extracellular substances and the main cause of lumen stenosis are controlled by TGF-β. This study demonstrates that TGF-β specifically inhibits the expression of TGF-β receptors and inhibits the introduction of TGF-β receptors that damage the vascular wall. 2. Transforming growth factor-β receptor gene is introduced into liver cancer, liver cancer maintenance is inhibited, serum hepatocyte enzyme is protected, and all cases of liver failure are saved. Irreversible linear dimensionalization of TGF-β centers has been demonstrated to inhibit linear dimensionalization of therapeutics (paper in print). TGF-β activity analysis of the above-mentioned strategy has been proved to be effective. 3. The extracellular membrane of the receptor and the soluble receptor are over-developed, and the adsorption of the receptor is inhibited. In vivo, the effects of different receptors and similar inhibition were observed (paper submission). The soluble receptor is introduced into the target tissue and the inhibitory effect is obtained. A part of the target organ is introduced into the cell, and the whole part is introduced into the cell. The introduction of the gene in the blood vessel wall is necessary in a short time. 4. The research project was designed to be successful in the development of new technologies.

项目成果

Yamamoto H,et al: "Roles of H-ras in signaling by TGF-β:H-ras is essential in activation of MAP kinase,partially involved in transcriptional activation TGF-β but not in signaling of anti-proliferative response of TGF-β." Eur.J.Biochem.in press.

Yamamoto H 等人：“H-ras 在 TGF-β 信号传导中的作用：H-ras 对于 MAP 激酶的激活至关重要，部分参与 TGF-β 的转录激活，但不参与 TGF-β 抗增殖反应的信号传导” β。”Eur.J.Biochem.正在出版。

Sakamoto T,et al: "A vitrctomy improves the transfection efficiency of adenoviral vector-mediated gene transfer to Muller cells." Gene Ther.5. 1088-1097 (1998)

Sakamoto T 等人：“玻璃体切除术提高了腺病毒载体介导的基因转移至 Muller 细胞的转染效率。”

Li Q,et al: "Stretch-induced collagen synthesis in cultured in cultured muscle cells from rabbit aortic media and possible involvment of angiotensin and TGF-β." J.Vasc.Res.35. 93-103 (1998)

Li Q 等人：“在兔主动脉培养基中培养的肌肉细胞中拉伸诱导的胶原合成，并且可能涉及血管紧张素和 TGF-β。”J.Vasc.Res.35 (1998)。

Qi Z,et al.: "Blockade of TGF-β signaling prevents liver fibrosis and dysfunction." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.(in press).

Qi Z 等人：“阻断 TGF-β 信号可预防肝纤维化和功能障碍”，《美国国家科学院院刊》。

Ohashi M,et al.: "Adenovirus-mediated p53 tumor suppressor gene therapy of human gastric cancer cells in vitro and in vivo." Gut. (in press).

Ohashi M 等人：“腺病毒介导的 p53 肿瘤抑制基因治疗人胃癌细胞的体外和体内”。