HIVタンパク分解活性を有する抗体酵素とエイズ治療への展開

具有HIV蛋白水解活性的抗体酶及其在艾滋病治疗中的进展

• 批准号: 10180225
• 负责人: 宇田 泰三
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hiroshima Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10180225/
• 关键词: エイズ; 抗体酵素; gp41; catalytic triad

今年度は以下に述べる項目を研究目標として取り上げ実験を行った。1)抗体酵素のrefolding時の微量金属の影響、2)double catalytic triadの意義と活性との関連、3)抗体酵素の新展開、4)HIV増殖抑制活性の検討。1) 抗体酵素41S-2-Lを用いて微量金属の影響を調べた。反応初期にEDTAを加えると抗原の分解反応が完全に阻害された。この系にFe,Zn,Mg,Ca,Cu,Coなどの2価イオン(Feは3価)を添加するとFeでは完全に活性が回復した。Znでは80〜90%の活性回復が見られたが他のイオンでは全く効果がなかった。反応途中にEDTAを加えても活性の阻害は受けないことから、Feイオンは活性サイトにあるのでなく、41S-2-Lの構造変化に効いていると推定された。2) 41S-2抗体の構造解析から、double catalytic triadが軽鎖に存在することは指摘してきたが、重鎖にcatalytic triadが一カ所存在していた。しかもその位置はCDRとは関係がなく、しかも分子表面上に存在していると推定された。そこで重鎖とHIV抗原とを反応させたところ重鎖が軽鎖ほでではないがやはりHIV抗原を分解した。これはcatalytic triadが酵素活性の一部を間違いなく担っていると言える。3) 41S-2-Lに続く2例目の抗体酵素の探索を手掛けている。我々の所有するあらゆる抗体の遺伝子配列を読んで行っているが、非常に興味ある抗体が見つかっており、今後の研究に大いに期待が持てる。4) いろいろな事情でこの検討が遅れ気味であったが、やっと第1回目の検討結果が届いた。この41S-2-LはHIV増殖抑制活性を有していることが判明した。今後詳細に詰めて行く予定である。

This year, に the following に described the べる project を research objective と と て て to obtain げ practical experience を and った. 1) The influence of trace metals during the <s:1> refolding of antibody enzymes; 2) The significance of double-catalytic triad; と activity; と association; 3) new development of antibody enzymes; 4) Inhibition of HIV proliferation activity; 検 discussion. 1) The antibody enzyme 41S-2-Lを was treated with a を て trace metal rod for を adjustment べた. Reverse 応 initial にEDTAを plus えると antigen platin decomposition reverse 応が complete に inhibition された. こ の is に Fe, zinc, Mg, Ca, Cu, Co な ど の 2 価 イ オ ン (Fe は 3 価) を add す る と Fe で は completely に active reply が し た. Znで が 80-90% <s:1> activity recovery が see られたが his <s:1> <s:1> で で で く full く effect がな で った. Way against 応 に EDTA を plus え て の resistance against は も activity by け な い こ と か ら, Fe イ オ ン は active サ イ ト に あ る の で な く, 41 s - 2 - L の structure - the に unseen い て い る と presumption さ れ た. 2) 41 s - 2 antibodies の structure か ら, double catalytic triad が 軽 lock に exist す る こ と は blame し て き た が, heavy lock に catalytic triad が existing a カ し て い た. The position of the <s:1> CDRと と is related to the がなく, the surface of the に existence of the <s:1> そ ると ると ると ると ると ると ると presumption された. そ こ で heavy lock と HIV antigen と を anti 応 さ せ た と こ ろ heavy lock が 軽 lock ほ で で は な い が や は り HIV antigen を decomposition し た. <s:1> れ なく catalytic triadが enzyme activity <s:1> a を post about なく なく Dan って ると ると える words える. 3) 41S-2-Lに続く2 cases of <s:1> antibody enzyme <e:1> exploration を hand-hung けて る る. All my 々 の す る あ ら ゆ る antibody の heritage 伝 with sequence を 読 ん で line っ て い る が, very に tumblers あ る antibody が see つ か っ て お り, future study に の い に expect が hold て る. 4) い ろ い ろ な things で こ の beg が 検 遅 れ 気 flavour で あ っ た が, や っ と 1 pa2 の 検 beg the results が い た. The inhibitory activity of <s:1> 41S-2-L <s:1> HIV proliferation is を determined by <s:1> て る る とが とが とが とが た. In the future, it will be detailed in に, めて, く and である.

项目成果

T.Uda,E.Hifumi and M.Ishimaru: "How and why does 41S-2 antibody light chainn catalyze the destruction of its target protein, gp41 of HIV-1?" Satellite meeting in cunjunction with the 10th International Congress of Immunology. 24 (1998)

T.Uda、E.Hifumi 和 M.Ishimaru：“41S-2 抗体轻链如何以及为何催化其靶蛋白 HIV-1 的 gp41 的破坏？”

西村知晃、一二三恵美、清水浩輔、宇田泰三: "分子積層法による表面プラゾモン共鳴(SPR)の信号増幅" 化学センサ. 14. 193-196 (1998)

Tomoaki Nishimura、Emi Hifumi、Kosuke Shimizu、Taizo Uda：“使用分子堆积方法的表面等离子体共振 (SPR) 信号放大”化学传感器。 14. 193-196 (1998)

E.Hifumi,H.Sakata,M.Nango,T.Uda: "Design of artificial molecular catalyst showing peptidase activity to the conserved sequence of HIV-1 envelope gp41." J.Mol.Catal.in press. (1999)

E.Hifumi、H.Sakata、M.Nango、T.Uda：“人工分子催化剂的设计显示出对 HIV-1 包膜 gp41 保守序列的肽酶活性。”

宇田泰三、一二三恵美: "HIV-1 gp41の保存領域をターゲットとする抗体酵素とgp41分子の破壊" 第28回日本免疫学会. 175 (1998)

Taizo Uda，Emi Hifumi：“针对 HIV-1 gp41 保守区域的抗体酶和 gp41 分子的破坏”第 28 届日本免疫学会 175（1998）。

T.Uda,E.Hifumi,Y.Okamoto,Z.Yan,and M.Ishimaru: "Destruction of gp41 of HIV-1 envelope by its catalytic antibody light chain." Clinical Science. 2. 429-433 (1998)

T.Uda、E.Hifumi、Y.Okamoto、Z.Yan 和 M.Ishimaru：“通过其催化抗体轻链破坏 HIV-1 包膜的 gp41”。