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エナージトランスファーを利用した生細胞内繊維化アクチンの選択的可視化の試み

尝试利用能量转移选择性地观察活细胞中的原纤维化肌动蛋白

基本信息

批准号：
10878129
负责人：
祐村恵彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878129/
关键词：
エナージトランスファー

项目摘要

エナージトランスファーの効率がよい2種の色素で精製したアクチンに標識した。標識アクチンの混合比を最大のエナージトランスファー効率になるように、試験管内で決定した。試験管内で標識アクチンを繊維化させ、繊維化したアクチンのみが観察できる条件を設定した。in vitroの状態では、アクチン繊維一本一本を見ることが予想されたが、トランスファー効率が低いため、束になったもので確認できるレベルであった。次に、上での予備実験をもとに、2種の標識アクチンを細胞内に導入した。導入は、エレクトロポレーション法を用いた。エナージトランスファーによって繊維化アクチンのみが観察できた。ただやはりトランスファー効率が低いため、画像としては弱く、さらに超高感度のカメラが必要であろう。精製蛋白を化学的に蛍光標識する代わりに、green fluorescence proteinとbluefluorescence protein(GFP.BFP;ともに、クラゲ蛍光蛋白質)とそれぞれ融合させたアクチンを細胞内で発現させることを試みている。現在GFP-アクチン遺伝子の発現に問題があり、検討中である。この両蛍光蛋白質間でもエナージトランスファーが起こることが報告されているので、細胞内の繊維化アクチンを可視化できると考えられる。

Two kinds of pigments are refined according to their efficiency. The maximum mixing ratio is determined by the test tube. Try to set the conditions for the maintenance of the logo in the tube. In the vitro, the state of the body is different from that of the body. The second, the third, the fourth, the The method of introducing and removing impurities is used. The first step is to improve the quality of the products. It is necessary to have a low sensitivity, a low sensitivity, and a high sensitivity. Refined proteins are chemically identified by fluorescence, green fluorescence protein and fluorescence protein(GFP.BFP; green fluorescence protein), and are fused to intracellular production. Now GFP-1000 gene discovery problem, search in the middle of the problem This is the first time that a cell has been visualized.