生細胞内直視実験系による収縮環形成時のミオシンの動的構築機構解析
利用活细胞直接观察实验系统分析收缩环形成过程中肌球蛋白的动态组装机制
基本信息
- 批准号:08259208
- 负责人:
- 金额:$ 1.41万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1)収縮環形成時のミオシン繊維の動的構築の観察。ミオシン繊維を生きた細胞内で観察するため、蛍光標識粘菌ミオシンをエレクトロポレーション法で細胞内に導入した。低温下に細胞を置くことで、ミオシン繊維の運動速度を下げて超高感度カメラにより観察した。細胞分裂時にミオシン繊維が収縮環に集まる際の素過程をはじめて観察した。2)ケージド蛍光色素標識によるミオシン分子の収縮環部位でのターンオーバー速度の解析。ケージド蛍光色素標識したミオシンを細胞内に導入し、細胞の一部に解除光を照射して、その部位に存在するケージド蛍光色素を解除し、その蛍光の拡散速度からミオシン分子のターンオーバー速度や分子の運動速度を計測することを試みるため、ケージド蛍光色素標識の条件を決定しようとしたが、ミオシンのATPase活性が失われてしまうため、標識試薬の選択から検討すべきである。ケージド蛍光色素標識したBSAは対象実験として導入に成功した。BSAは1-2秒で細胞内を拡散移動できることがわかった。3)ミオシンのリン酸化部位改変による細胞質分裂機構の解析。ミオシンのリン酸化部位をリン酸化されないアラニンに改変した遺伝子をミオシンを欠損する細胞に導入した変異細胞を用いた。これらの変異細胞のすべてで細胞質分裂の際にミオシンが収縮環を形成した。この発見は、従来の仮説に矛盾する結果となった。4)セミインビトロ系を用いた実験系による収縮環へのミオシン局在化機構の検討。分裂時の細胞から細胞膜と収縮環の複合体を得た。これに含まれるミオシンのリン酸化の状態、またミオシンがATP処理で膜から放出される際のリン酸化の有無について調べた。
The construction of <s:1> 観 観 observation of <s:1> <s:1> シ シ 繊 繊 繊 繊 motion when the contraction ring is formed. ミ オ シ ン 繊 d を raw き た intracellular で す was 観 る た め 蛍 light logo slime mold ミ オ シ ン を エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン method で intracellular に import し た. Cold を に cells under く こ と で, ミ オ シ ン 繊 d の speed under を げ て ultrahigh sensitivity カ メ ラ に よ り 観 examine し た. Cell divides に ミ オ シ ン 繊 d が 収 shrinkage ring に set ま る を the の element process は じ め て 観 examine し た. 2)ケ ケ ジド蛍 ジド蛍 photopigment identification of the による <s:1> シ シ シ <s:1> molecular <s:1> contraction ring site で タ タ <s:1> <s:1> バ バ バ バ バ バ バ バ バ バ バ バ <s:1> speed <e:1> analysis. ケ ー ジ ド 蛍 photopigment logo し た ミ オ シ ン に import し を cell, cell の a に remove を sunlight し て, そ に の parts exist す る ケ ー ジ ド 蛍 photopigment を remove し, そ の 蛍 の light company, spread speed か ら ミ オ シ ン molecular の タ ー ン オ ー バ ー speed や molecular の を movement speed measuring す る こ と を try み る た め, ケ ー ジ ド 蛍 light pigmentation Conditions is の を decided し よ う と し た が, ミ オ シ ン の ATPase activity が lost わ れ て し ま う た め, identifies try 薬 の sentaku か ら beg す 検 べ き で あ る. Youdaoplaceholder0 ケ ジド蛍 photopigment marking <s:1> たBSA に object experiment と て て import に successful た た. BSA を拡 1-2 seconds で intracellular を拡 scattered movement で る る とがわ とがわ った った った. 3) Analysis of the transformation of the acidified site to the による cytoplasmic division structure <e:1> of the シ シ リ リ. ミ オ シ ン の リ ン acidification parts を リ ン acidification さ れ な い ア ラ ニ ン に change - し た posthumous son 伝 を ミ オ シ ン を owe loss す る cells に import し た - idioblasts を with い た. The <s:1> れら <s:1> variant cell <s:1> すべてで cytoplasmic division <s:1> interline に シ シ が が constrictive ring を forms た た. The 仮 based on the and 従 comes to the 仮 to say the に contradiction する result となった. 4)セ セ ビトロ ビトロ is を using セ た experimental system による development ring へ <s:1> <s:1> シ シ シ シ シ シ シ シ シ シ シ シ ビトロ the bureau of chemistry in シ 検 for discussion. During division, the <s:1> cell ら the cell membrane と constricts the circular <s:1> complex を to た. Contains こ れ に ま れ る ミ オ シ ン の リ ン acidification の status, ま た ミ オ シ ン が ATP 処 Richard で membrane か ら release さ れ る interstate の リ ン acidification の presence of に つ い て adjustable べ た.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
S.Yumura: "Spatial distribution of fluorescently labeled actin in living Dictyostelium amoebae." Cell Structure and Function. (印刷中).
S. Yumura:“活体网柄菌细胞结构和功能中荧光标记的肌动蛋白的空间分布。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
S.Yumura,K.Furuya,I.Takeuchi: "Spatial regulation of free calcium responses during chemotaxis of Dictyostelium cells." Journal of Cell Science. (印刷中).
S. Yumura、K. Furuya、I. Takeuchi:“盘基网柄菌细胞趋化过程中游离钙反应的空间调节。”细胞科学杂志(正在出版)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
S.Yumura: "Rapid redistribution of myosin in living Dictyostelium amoebae, as revealed by fluorescent probes introduced by electroporation." Protoplasma. (印刷中).
S. Yumura:“通过电穿孔引入的荧光探针揭示了活体盘基网柄菌中肌球蛋白的快速重新分布(正在出版)。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
祐村 恵彦其他文献
祐村 恵彦的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('祐村 恵彦', 18)}}的其他基金
細胞膜損傷の修復装置の分子構成・構造とそのシグナル制御機構
细胞膜损伤修复装置的分子组成、结构及其信号控制机制
- 批准号:
20K06642 - 财政年份:2020
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
ミオシンモーターの細胞内ナノシステムの構築と制御
肌球蛋白运动细胞内纳米系统的构建与控制
- 批准号:
19037018 - 财政年份:2007
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
生細胞内アクチン繊維の新規可視化プローブの作成
创建活细胞中肌动蛋白纤维的新型可视化探针
- 批准号:
18657063 - 财政年份:2006
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
ミオシンモーターの細胞内ナノシステムと走化性運動
细胞内纳米系统和肌球蛋白运动的趋化运动
- 批准号:
17049020 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
エナージトランスファーを利用した生細胞内繊維化アクチンの選択的可視化の試み
尝试利用能量转移选择性地观察活细胞中的原纤维化肌动蛋白
- 批准号:
10878129 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
遺伝子改変による非筋細胞ミオシンの機能解析
通过基因修饰对非肌肉细胞肌球蛋白进行功能分析
- 批准号:
08680768 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
生細胞内直視実験系による細胞分裂、運動時のミオシンの動的構築機構解析
利用活细胞直接观察实验系统分析细胞分裂和运动过程中肌球蛋白的动态组装机制
- 批准号:
07267209 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
細胞分裂.運動時のミオシンの動的構築機構
细胞分裂:运动过程中肌球蛋白的动态组装机制
- 批准号:
06275208 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
細胞内シグナル伝達とミオシンの局在化機構
细胞内信号转导和肌球蛋白定位机制
- 批准号:
05780532 - 财政年份:1993
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
細胞性粘菌ミオシンのリン酸化を介した細胞内移動,局在化機構
盘基网柄菌肌球蛋白磷酸化介导的细胞内运动和定位机制
- 批准号:
04854072 - 财政年份:1992
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
相似海外基金
分裂酵母収縮環のin vitro収縮系を用いたタンパク質の高分解能配向解析
使用裂殖酵母收缩环体外收缩系统进行高分辨率蛋白质方向分析
- 批准号:
19K06661 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
分裂酵母ゴーストを用いた収縮環形成過程のin vitro再構成
使用裂变酵母幽灵体外重建收缩环形成过程
- 批准号:
25892026 - 财政年份:2013
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
分裂酵母ゴースト細胞を用いた収縮環収縮のin vitro解析
使用裂殖酵母鬼细胞进行收缩环收缩的体外分析
- 批准号:
23780088 - 财政年份:2011
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
分裂酵母からの収縮環単離と再活性化による収縮メカニズムの解明
通过分离和重新激活裂殖酵母的收缩环来阐明收缩机制
- 批准号:
11J00104 - 财政年份:2011
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
単離表層と卵抽出液による無細胞系における収縮環構築
使用分离表面层和鸡蛋提取物在无细胞系统中构建收缩环
- 批准号:
21657048 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
収縮環非依存的細胞質分裂機構の解明
阐明收缩环独立的胞质分裂机制
- 批准号:
18770187 - 财政年份:2006
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
細胞質分裂における収縮環構造とその構成成分のターンオーバの関係
胞质分裂过程中收缩环结构与其成分周转的关系
- 批准号:
17049005 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
収縮環形成におけるアクチンのダイナミクスの制御機構
收缩环形成过程中肌动蛋白动力学的控制机制
- 批准号:
15770122 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
細胞質分裂シグナル伝達と収縮環形成のメカニズム
胞质分裂信号传导和收缩环形成的机制
- 批准号:
10213202 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
無細胞系における収縮環の形成とその分子機構の解析
无细胞系统中收缩环的形成及其分子机制分析
- 批准号:
08259204 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 1.41万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas