第二のFAK族チロシンキナーゼCAKβの機能に関する研究

FAK第二家族酪氨酸激酶CAKβ的功能研究

• 批准号: 11139257
• 负责人: 佐々木 輝捷
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11139257/
• 关键词: タンパク質チロシンキナーゼ; 核移行; 焦点接着; CAKβ; PYK2; Hic-5; SH3ドメイン; GFP

非受容体型タンパク質チロシンキナーゼCAKβ/PYK2のC末端側領域には2つのprolineに富む配列があり、SH3 domainのリガンドとして働く。これらの配列にある717番のprolineあるいは859番のprolineをalanineに点変異して、PXXPモチーフをこわした点変異体を作り細胞に発現する実験を行った。(1)野生型CAKβは核周囲の細胞質にdiffuseに存在しており、焦点接着部位にも、一部が存在した。(2)859番のprolineをalanineに変えた点変異体を細胞に発現すると、この変異CAKβの細胞内局在部位は野生型とは全く違って、核に局在した。717番のprolineをalanineに変異したもう一方の点変異体の細胞内局在部位は、野生型と同じであった。(3)タンパク質の核外移送を阻害する薬物であるleptomycin Bを細胞に作用すると、野生型CAKβのかなりの部分が細胞質から核に移行した。この事実は、野生型CAKβが細胞質と核との間を行き来している事を示唆する。野生型CAKβの核移行を促進する条件も検討した。(4)CAKβに結合するタンパク質として知られているHic-5およびp130^<Cas>も、CAKβの核移行に伴いCAKβと共に核に集積した。<考察>核移行したCAKβの機能は、未だ明らかではないが、最近、Hic-5がandrogen receptorのcoactivatorとして働き、androgen刺激に伴う転写を活性化すると報告されているので、CAKβは核内における転写の制御などに関与すると推定している。チロシン残基リン酸化による核内タンパク質の活性制御は、未開拓な研究領域であり、今後、核におけるCAKβの機能を明らかにしたい。また、P859A点変異CAKβが、細胞核に集積するメカニズムと、CAKβ核移行の制御機構も今後の研究課題である。

Non-receptor type: CAKβ/PYK2 C-terminal domain: Proline 2, Proline 3, Proline 4, Proline 5, Proline 6, Proline 7, Proline 8, Proline 8, Proline 9, Proline 9, Pro The 717-point proline is displayed in the cell. (1)Wild-type CAKβ is present in the cytoplasm of the nucleus, in the focal position, and in one part. (2) The 859-point proline was found in the mutant CAK β cells, and the mutant CAKβ was found in the wild type cells, and the mutant CAKβ was found in the nucleus. 717 Proline is different from wild type. (3)The protein that prevents extracellular migration of CAKβ is leptostatin B, and some of it is cytosolic. This is the case with wild-type CAKβ, which is a cytoplasmic and nuclear pathway. Conditions for promoting nuclear migration of wild-type CAKβ(4)CAKβ binding is associated with Hic-5 and p130<Cas>, CAKβ nuclear migration is associated with CAKβ nuclear aggregation. &lt;Investigation&gt; The function of CAKβ in nuclear migration is unclear, recent, Hic-5 as coactivator of androgen receptor, androgen stimulation associated with activation, report, CAKβ in nuclear regulation, and presumptive. In the future, the function of CAKβ in the nuclear system will be clarified. P859A is different from CAKβ, nuclear accumulation, CAKβ nuclear migration control mechanism, and future research topics.

项目成果

Ishino, M. et al.: "Identification of an Efs isoform that lacks the SH3 domain and chromosomal mapping of human Efs"Oncogene. 15・14. 1741-1745 (1997)

Ishino, M. 等人：“缺乏 SH3 结构域的 Efs 亚型的鉴定和人类 Efs 的染色体定位”Oncogene 15・14 (1997)。

Sasaki, H.et al.(分担): "Cell adhesion kinaseβ(CAK β)forms a complex with a new member, Hic-5, of proteins localized at focal adhesions. in“Cytoskeleton and G-proteins in the reglation of Cancer"edited by Noboru Kuzumaki." Hokkaido University Medical Librar

Sasaki, H. 等人（贡献者）：“细胞粘附激酶β (CAK β) 与位于细胞骨架和 G 蛋白调节癌症的粘着斑的新成员 Hic-5 形成复合物。 “北海道大学医学图书馆编辑”

Ohba, T. et al.: "Interction of two Proline-rich sequences of cell adhesion kinaseβ with SH3 domains of p130^<Cas>-related proteins and GTPase-activating protein, Graf"Biochem. J.. 330・3. 1249-1254 (1998)

Ohba, T. 等人：“细胞粘附激酶β 的两个富含脯氨酸的序列与 p130^<Cas> 相关蛋白和 GTP 酶激活蛋白的 SH3 结构域的相互作用”Biochem J. 330・3。 -1254 (1998)

Mitaka, T. et al.: "Restricted expression of cell adhesion kinase-β in rat tissues"Amer. J. Pathol.. 150・1. 267-281 (1997)

Mitaka, T. 等：“大鼠组织中细胞粘附激酶-β 的限制性表达”Amer. J. Pathol.. 150・1 (1997)。