c-mp1を介する巨核球の増殖・分化の分子機構に関する研究

c-mp1介导巨核细胞增殖和分化的分子机制研究

• 批准号: 11162216
• 负责人: 松村 到
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11162216/
• 关键词: トロンボポエチレン; 増殖; 分化; 巨核球; 細胞周期; サイクリンD1

トロンボポエチン(TPO)は巨核球系細胞の増殖・分化において最も重要な役割を担う造血因子である。TPOはその受容体c-Mplと結合しSTATs、Ras、PI3-Kなどの細胞内シグナル伝達分子を活性化するが、TPOによる増殖・分化誘導機構における個々の分子の役割については明かではなかった。最近、我々は、TPO、IL-3による増殖にはSTAT5とRasの両者が関与すること、巨核球への分化誘導にはTPO特異的に誘導される持続性のRasの活性化が重要であることを明らかにした。本研究では、STAT5とrasによる細胞増殖機構、巨核球の多倍体化機構を細胞周期制御の観点から解析した。ヒトのIL-3依存性細胞株F-36PがIL-3依存性に増殖する際にdominant negative(dn)-STAT5、dn-Rasを発現させた場合と発現させなかった場合とで細胞周期制御分子の発現を比較した。その結果、dn-STAT5、dn-Rasを発現させた場合にはいずれの場合にもサイクリンD1の発現の低下が認められた。この結果に一致して、STAT5とrasは各々単独でまた両者は協調的にサイクリンD1遺伝子のプロモーターを活性化した。また、サイクリンD1を過剰発現させるとdn-STAT5、dn-Rasの増殖抑制効果は完全にキャンセルされた。以上よりSTAT5とRasは共にサイクリンD1の発現を介してIL-3による増殖を制御すると考えられた。巨核球の多倍体化の際にはサイクリンD1、D2、D3の発現上昇とcdc2の活性低下が認められた。また、dn-cdc2をサイクリンDl、D2、D3のいずれかと共発現させるとTPO非存在下でも多倍体化が誘導された。この結果から、巨核球の多倍体化にはサイクリンDl、D2、D3のいずれかの発現上昇とcdc2の活性の低下の両者が重要であると考えられた。

TPO is the most important factor in the proliferation and differentiation of megakaryocytic cells. TPO receptor c-Mpl binds to STATs, Ras, PI3-K, and the intracellular pathway for activation of TPO receptor c-Mpl binds to STATs, Ras, PI3-K, PI3-K. Recently, TPO and IL-3 have been implicated in the induction of TPO-specific Ras. In this study, STAT5 and ras were used to analyze the cell proliferation mechanism, megakaryocyte polyploidy mechanism and cell cycle control. IL-3-dependent cell line F-36P was developed to compare the development of IL-3-dependent dominant negative(dn)-STAT5 and dn-Ras. The results, dn-STAT5, dn-Ras, and the occurrence of D1 are shown below. The results are consistent, STAT5 and ras are independent, but coordinated, and STAT 5 and ras are active. The growth inhibition effect of dn-STAT5 and dn-Ras is completely eliminated. The above STAT5 and Ras are responsible for the production of IL-3. During the polyploidization of megakaryocytes, the expression of D1, D2 and D3 increased and the activity of cdc2 decreased. In the absence of TPO, polyploidization was induced in D1, D2 and D3. As a result, polyploidization of megakaryocytes increased in D1, D2 and D3 and decreased in cdc2 activity.

项目成果

Oritani K.et al.: "Both Stat3-activation and Stat3-independent BCL2 downregulation are important for interleukin-6-induced apoptosis of 1A9-M cells"Blood. 93. 1346-1354 (1999)

Oritani K.等人：“Stat3 激活和 Stat3 独立的 BCL2 下调对于白细胞介素 6 诱导的 1A9-M 细胞凋亡都很重要”血液。

Tsujimura T.et al.: "Activating mutation in the catalytic domain of c-kit elicits hematooietic transformation by receptor self-association not at the ligand-induced dimerization site"Blood. 93. 1319-1329 (1999)

Tsujimura T.等人：“激活 c-kit 催化结构域中的突变，通过受体自缔合而不是在配体诱导的二聚化位点引发造血转化”血液。

Matsumura,I., et al: "Increased D-type cyclin expression together with decreased cdc2 activity confers megakaryocytic differentiation of a human thrombopoietin-dependent hematopoietic cell line."J.Biol.Chem.. 275. 5553-5559 (2000)

Matsumura,I., 等人：“D 型细胞周期蛋白表达的增加和 cdc2 活性的降低导致人类血小板生成素依赖性造血细胞系的巨核细胞分化。”J.Biol.Chem.. 275. 5553-5559 (2000)

Daino H.et al.: "Induction of apoptosis by extracellular ubiquitin in human hematopoietic cells: possible involvement of STAT3 degradation by proteasome pathway in interleukin 6-dependent hematopoietic cells"Blood. (in press).

Daino H.等人：“人类造血细胞中细胞外泛素诱导细胞凋亡：白细胞介素 6 依赖性造血细胞中蛋白酶体途径可能参与 STAT3 降解”血液。

Tanaka,H. et al.: "GATA-1 blocks IL-6-induced macrophage differentiation and apoptosis through the sustained expression of cyclin D1 and Bcl-2 in a murine myeloid cell line M1."Blood. 95. 1264-1273 (2000)

田中，H.