新規カルモデュリン拮抗薬の抗アポトーシス作用の神経薬理学的研究

新型钙调蛋白拮抗剂抗细胞凋亡作用的神经药理学研究

• 批准号: 11877018
• 负责人: 福永 浩司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877018/
• 关键词: カルモデュリン; アポトーシス; 遅発性神経細胞死; 脳虚血; 一酸化窒素合成酵素; 一酸化窒素; 神経保護薬; 海馬; CaMキナーゼII; アストロサイト

新規カルモデュリン拮抗薬であるDY-9760eはin vitroにおいて種々のカルモデュリン依存性酵素を阻害する。白崎ら(第一製薬)はラット中大脳動脈閉塞モデルにおいて虚血に伴う神経細胞死を有意に抑制することを報告した。本研究では新たな作用機構を有する新規脳保護薬、DY-9760eのin vivoにおける作用点を明らかにすることである。マウス神経芽腫細胞N1E-115細胞においてカルシウムイオノフォア、A23187によって誘発されるNO産生に対する効果を検討した。1μM以下の濃度で有意にNOの産生を抑制した。このNO産生抑制効果と同じ濃度でDY-9760eはA23187によるN1E-115細胞からのLDH(lactate dehydrogenase)の遊離を抑制し、細胞保護効果を示した。さらに、砂ネズミの前脳虚血モデルを用いて神経保護作用と、虚血による海馬でのNO産生に対する効果を検討した。ラット中大脳動脈閉塞モデルと同様に虚血負荷による遅発性神経細胞死をDY-9760eは有意に抑制した。また、マイクロダイアリシス法で海馬内のNO濃度を測定すると、虚血直後、海馬でNO濃度が有意に上昇することが解った。このNO濃度上昇に対してDY-9760eは抑制した。これらのin vitroとin vivoの結果からDY-9760eはカルモデュリン依存性NOSを阻害することによって神経保護作用を示すことが明らかとなった。さらに、神経型、内皮細胞型NOSに対する選択性について検討する必要がある。

New rules カ ル モ デ ュ リ ン antagonism against 薬 で あ る DY - 9760 - e は in vitro に お い て kind 々 の カ ル モ デ ュ リ ン dependency enzyme を resistance against す る. 薬 shirosaki ら (the system) は ラ ッ ト cuhk 脳 artery occlusion モ デ ル に お い て virtual blood に を 経 cell death with う god deliberately に inhibit す る こ と を report し た. This study で は new た な role institutions を have す る new rules 脳 薬 protection, DY - 9760 - e の in vivo に お け る point を Ming ら か に す る こ と で あ る. マ ウ ス god 経 buds swell N1E - 115 cells に お い て カ ル シ ウ ム イ オ ノ フ ォ ア, A23187 に よ っ て 発 lure さ れ る NO produce に す seaborne る unseen fruit を beg し 検 た. <s:1> concentrations below 1μM で intentionally にNO <e:1> produces を inhibition た た. The inhibitory effect of <s:1> <s:1> NO on と was the same as that at the じ concentration of でDY-9760e じ A23187によるN1E-115 cells ら ら <s:1> LDH(lactate dehydrogenase) <s:1> free を inhibited <s:1> and the cell protective effect を showed that た た. さ ら に, sand ネ ズ ミ の 脳 empty before blood モ デ ル を with い て 経 protection と god, empty blood に よ る hippocampal で の NO produce に す seaborne る unseen fruit を beg し 検 た. ラ ッ ト cuhk 脳 artery occlusion モ デ ル と with others in blood に virtual load に よ る 遅 発 sex god 経 cell death を DY - 9760 - e は intentionally に inhibit し た. ま た, マ イ ク ロ ダ イ ア リ シ ス で を の NO concentration in hippocampus determined す る と, empty blood straight after, hippocampal で NO concentration rising が intentionally に す る こ と が solution っ た. An increase in the concentration of <s:1> <s:1> NO に inhibits て て and DY-9760e <s:1> た. こ れ ら の in vitro と the in vivo results の か ら DY - 9760 - e は カ ル モ デ ュ リ ン dependency NOS を resistance against す る こ と に よ っ て を god 経 protection role す こ と が Ming ら か と な っ た. Youdaoplaceholder0, economic type, endothelial cell type NOSに against する select 択 sex に する て検 て検 て検 discuss する necessity がある.

项目成果

J.Kasahara: "Activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase IV in cultured rat hippocampal neurons"J. Neurosci. Res.. 59. 594-600 (2000)

J.Kasahara：“培养的大鼠海马神经元中Ca^2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV的激活”J。

I. Munir: "Mitogen-activated protein kinase activation and regualtion of cycloxygenase 2 expression by platelet-actevating factor and hCG in human endometrial adenocarcinoma cell line HEC-1B"J. Reprod. Fertil.. 117. 49-59 (1999)

I. Munir：“人子宫内膜腺癌细胞系 HEC-1B 中丝裂原激活蛋白激酶的激活以及血小板激活因子和 hCG 对环加氧酶 2 表达的调节”J。

J. Kasahara: "Activation of CA^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase IV in cultured rat nippocampal neurons."J. Neurosci. Res.. 59. 594-600 (2000)

J. Kasahara：“在培养的大鼠尼波坎神经元中CA^2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV的激活。”J.

I.Munir: "Expression of cyclo-oxygenase 2 by prostaglandin E_2 in human endometrial adenocarcinoma cell line HEC-1B"Biol. Reprod.. 63. 933-941 (2000)

I.Munir：“前列腺素 E_2 在人子宫内膜腺癌细胞系 HEC-1B 中表达环加氧酶 2”Biol。

T.Moriya: "Close linkage between calcium/calmodulin kinase II α/β and NMDA-2A receptors in the lateral amygdala and significance for retrieval of auditory fear conditioning"Eur. J. Neurosci.. 12. 3307-3314 (2000)

T.Moriya：“外侧杏仁核中钙/钙调蛋白激酶 II α/β 和 NMDA-2A 受体之间的密切联系及其对听觉恐惧条件恢复的意义”Eur. J. Neurosci.. 12. 3307-3314 (2000)