ディファレンシャルディスプレイを利用した病理標本の分子病態学的研究

利用差分显示进行病理标本的分子病理学研究

基本信息

批准号：
11877035
负责人：
居石克夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877035/
关键词：
マイクロディセクション肺線がん肺異型腺腫様過形成 PCR-SSCP 肺腺がん

项目摘要

癌では、ゲノムの遺伝子異常ほかに発現・代謝異常がある。ただ、治療に結びつく個々の癌の具体的な性格化や病理診断には、こうした「発現・代謝異常」の情報も重要と考えられるが、その方面からの基礎データは全くない。そこで我々は、レーザーマイクロディセクションによる標的病変部の遺伝子学的と発現状況を検討し、この概念の病理診断への応用の可能性を検討した。九州大付属病院での腺癌切除肺を細胞の異型度に合わせて分類し、腺癌細胞はマイクロディセクションにより採取した。これらについて、p53遺伝子(エクソン2-9)をsemi-nested PCR-SSCPを用い遺伝子解析し、p53とその発現制御に関与するMDM2の状況を免疫組織化学的に検討した。肺腺癌118症例のうちp53免疫染色陽性の48症例のなかで、10症例がp53蛋白のへテロの発現が観察された。p53蛋白高発現を認めた10症例中の7例は、低分化型でしばしば線維化した基質を伴っていた。また2症例は癌組織に高低のp53蛋白発現を認め、これらはエクソン7に変異の存在し、遺伝子変異と蛋白発現に相関を持たない症例であった。一方MDM2の免疫組織化学的発現はp53蛋白の発現と逆相関していた(p<0.05)。加えて、検索した全118例でのMDM2発現は、p53遺伝子変異症例では、p53に変異も発現異常も観察されない症例に比べ抑制されていた。これは、肺腺癌でのp53の組織学的にヘテロな安定化の一部は、MDM2の発現低下によって担われていることを示唆する。以上の事は、我々が当初予測したとおり、癌の病態は単純にゲノムの遺伝変異のみに依るものでない事を示しており、本研究は今後予後や対象因子を広げるとともに具体的な性格付け等の解析まで発展させることで、治療に結びつく病理診断の基礎データを与える可能性が明らかとなった。

在癌症中，除基因组基因异常外，表达和代谢也异常。但是，尽管有关“表达和代谢异常”的信息被认为对导致治疗的个体癌症的特定人格和病理诊断很重要，但从该角度来看，没有基本数据。因此，我们通过激光显微解剖研究了靶病变的遗传和表达状态，并检查了该概念在病理诊断中的潜在应用。根据细胞非典型水平对京都大学医院的腺癌切除肺进行了分类，并通过微分解收集腺癌细胞。为此，使用半巢PCR-SSCP分析了p53基因（外显子2-9），并在P53中涉及的MDM2状态，并通过对其表达控制进行了免疫组织化学检查。在118例肺腺癌病例中，观察到10例在48例阳性p53免疫染色的病例中表达p53蛋白质。 p53蛋白表达高表达的10例中有7例伴随着分化差的，通常是纤维化的底物。此外，两个病例在癌症组织中显示出p53蛋白的高表达和低表达，这些病例是外显子7中存在突变，并且基因突变与蛋白质表达之间没有相关性。另一方面，MDM2的免疫组织化学表达与p53蛋白的表达成反比（p <0.05）。此外，在p53中未观察到突变或异常表达的情况下，在所有118例搜索病例中的MDM2表达都被抑制。这表明p53在肺腺癌中p53的组织学异源稳定的一部分是由MDM2表达降低驱动的。正如我们最初预测的那样，以上表明，癌症病理不仅取决于基因组的遗传变异，并通过扩大未来的预后和目标因素，因此已经表明，这项研究可以提供有关病理诊断的基本数据，可以通过扩展其预后和目标因素并分析特定的特定特征来与治疗有关。