遺伝子導入ベクターの開発とin vivo応用

基因转移载体的研制及体内应用

• 批准号: 08877038
• 负责人: 居石 克夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877038/
• 关键词: HVJ-catinic liposome; HVJ-liposome; 血管; 肝; 導入効率; p53; 遺伝子治療

1.HVJ-liposome法の生物学的応用性:1)本法による家兎総頚動脈壁内へのLacZ遺伝子導入効率は極めて高く、低圧下にても中膜平滑筋細胞の約90%に蛋白発現を認めた。また電顕的観察にて内皮傷害は限局性で軽微であった。2)VEGF遺伝子の動脈壁内導入により、内膜肥厚と内部の血管腫様内皮増生を招来し、ヒト動脈硬化病変に認められる血管新生に極似していた。今後同病変の動物モデルとして粥腫破綻機序の解明に役立つと考えられた。3)p53遺伝子の動脈壁内導入は、バルーン障害後内膜肥厚の抑制に有効である、その効果にはG1停止とともにM/G2期停止とアポトーシス誘導が関与している可能性が明らかとなった。このことはp21導入に比してより有効な臨床的応用性を示唆している。4)肝類洞壁内への遺伝子、アンチセンスオリゴ導入にも本法は極めて有効であり、移植肝の免疫抑制、サイトカイン誘発性炎症ならびに肝機能障害の予防法の確立の為の基礎的研究に有用であることが証明された。5)本法の反復投与による組織障害、催炎効果は小さいものの、今後pyrogen(-)のHVJ-liposome作製後に総合的な判断が必要と思われた。2.HVJ-catinic liposome法の基礎的研究1)本法の組織内遺伝子導入効率は、上記法に比して10-20倍、組織障害性は従って軽減されることが明らかとなった。2)本法の反復投与による組織障害性も上記方法と比較して有意差はなく、標的細胞や導入遺伝子のサイズに応じて上記法と併せて選択可能であることが判明した。以上の成績より、新規のHVJ-catinic liposome法はHVJ-liposome法同様に臨床的有用性が期待されるベクターの1つであり、とくに導入効率においてより優れたベクターであると考えられる。

1. の biology HVJ - liposome method 応 use sex: 1) this law に よ る home 兎 総 頚 within the arterial wall へ の LacZ posthumous son 伝 import は sharper rate extremely め て く, lower 圧 に て も の membrane smooth muscle cells in about 90% protein に 発 を now recognize め た. Youdaoplaceholder0 electrical 顕 観 examination にて endothelial injury localized で軽 microで あった. 2) VEGF heritage 伝 son の import within the artery wall に よ り, lining hypertrophy と internal の angioma others in endothelial rights caused し を, ヒ ト atherosclerosis disease - に recognize め ら れ る angiogenesis に very し て い た. In the future, animals with the same disease will be subject to モデ, <s:1>, て, て, て, に, に, と, と and えられた examinations. 3) traces of p53 伝 son の import は inside arteries, バ ル ー ン handicap of lining hypertrophy の inhibit に have sharper で あ る, そ の unseen fruit に は G1 stop と と も に M/G2 stop と ア ポ ト ー シ ス induced が masato and し て い る possibility が Ming ら か と な っ た. The introduction of に to に と と p21 is more effective in な clinical 応 use を indicates that て て る る る る る. 4) liver class within the cave walls へ の heritage 伝, ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ import に も provisions は extremely め て have sharper で あ り, graft の immunosuppression, サ イ ト カ イ ン 発 lure sex inflammation な ら び に liver function handicap of の to prevent method の establish の に useful for の foundation study で あ る こ と が prove さ れ た. 5) this law の repeatedly cast with に よ る organization handicap, push inflammation unseen small fruit は さ い も の の, pyrogen in future (-) の HVJ - after the liposome cropping に 総 な judgment of が と thought necessary わ れ た. 2. Research on the <s:1> Basis of the HVJ-catinic liposome Method 1) The induction efficiency of 伝 liposomes in the tissue of this method is, which is 10 to 20 times higher than that of the above method に, and the tissue hindrance is 従って軽 従って軽 less than される とが とが ら となった. の repeatedly cast and 2) this law に よ る organization handicap of と も written method of comparing し て deliberately bad は な く や, target cells import legacy 伝 son の サ イ ズ に 応 じ と て in notation and せ て sentaku may で あ る こ と が.at し た. Above の achievement よ り, new rules の HVJ - catinic liposome method は HVJ liposome method with others in clinical usefulness of に が expect さ れ る ベ ク タ ー の 1 つ で あ り, と く に import working rate に お い て よ り optimal れ た ベ ク タ ー で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

石橋達朗: "血管新生のメカニズムと疾患" 医薬ジャーナル社, 11 (1996)

石桥达郎：“血管生成和疾病的机制”Iyaku Journalsha，11（1996）

Toshinori Murata: "The relation between expression of vascular endothelial growth factor and breakdown of the blood-retinal barrier in diabetic rat retinas." Lab Invest. 74. 819-825 (1996)

Toshinori Murata：“糖尿病大鼠视网膜中血管内皮生长因子的表达与血视网膜屏障破坏之间的关系。”

Toshiaki Kadokami: "Altered serotonin receptor subtypes mediate caronary microvascular hyperreactivity in pigs with chronic inhibition of nitric oxide synthesis." Circulation. 94. 182-189 (1996)

Toshiaki Kadokami：“改变的血清素受体亚型介导猪的冠状微血管高反应性，并长期抑制一氧化氮合成。”

Yoshikazu Yonemitsu: "In situ detection of frequent and active infection of human cytomegalovirus in inflammatory abdominal aortic aneurysms." Lab Invest. 74. 723-736 (1996)

Yoshikazu Yonemitsu：“原位检测炎症性腹主动脉瘤中人类巨细胞病毒的频繁和活跃感染。”

Yoshikazu Yonemitsu: "Characterization of in vivo gene transfer into the arterial wall mediated by the Sendai virus (hemagglutinating virus of Japan) liposomes." Lab Invest. 75. 313-323 (1996)

Yoshikazu Yonemitsu：“仙台病毒（日本血凝病毒）脂质体介导的体内基因转移至动脉壁的特征。”