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遺伝子導入ベクターの開発とin vivo応用

基因转移载体的研制及体内应用

基本信息

批准号：
08877038
负责人：
居石克夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877038/
关键词：
HVJ-catinic liposome HVJ-liposome 血管肝導入効率 p53 遺伝子治療

项目摘要

1.HVJ-liposome法の生物学的応用性:1)本法による家兎総頚動脈壁内へのLacZ遺伝子導入効率は極めて高く、低圧下にても中膜平滑筋細胞の約90%に蛋白発現を認めた。また電顕的観察にて内皮傷害は限局性で軽微であった。2)VEGF遺伝子の動脈壁内導入により、内膜肥厚と内部の血管腫様内皮増生を招来し、ヒト動脈硬化病変に認められる血管新生に極似していた。今後同病変の動物モデルとして粥腫破綻機序の解明に役立つと考えられた。3)p53遺伝子の動脈壁内導入は、バルーン障害後内膜肥厚の抑制に有効である、その効果にはG1停止とともにM/G2期停止とアポトーシス誘導が関与している可能性が明らかとなった。このことはp21導入に比してより有効な臨床的応用性を示唆している。4)肝類洞壁内への遺伝子、アンチセンスオリゴ導入にも本法は極めて有効であり、移植肝の免疫抑制、サイトカイン誘発性炎症ならびに肝機能障害の予防法の確立の為の基礎的研究に有用であることが証明された。5)本法の反復投与による組織障害、催炎効果は小さいものの、今後pyrogen(-)のHVJ-liposome作製後に総合的な判断が必要と思われた。2.HVJ-catinic liposome法の基礎的研究1)本法の組織内遺伝子導入効率は、上記法に比して10-20倍、組織障害性は従って軽減されることが明らかとなった。2)本法の反復投与による組織障害性も上記方法と比較して有意差はなく、標的細胞や導入遺伝子のサイズに応じて上記法と併せて選択可能であることが判明した。以上の成績より、新規のHVJ-catinic liposome法はHVJ-liposome法同様に臨床的有用性が期待されるベクターの1つであり、とくに導入効率においてより優れたベクターであると考えられる。

1. Biological applicability of HVJ-liposome method:1) The efficiency of LacZ gene introduction into the arterial wall by HVJ-liposome method is extremely high, and about 90% of protein production in smooth muscle cells of middle membrane is recognized under high and low pressure. The electric field of vision is limited to the skin. 2)VEGF gene is introduced into the arterial wall, intimal hypertrophy, endothelial growth of vascular swelling in the interior, and angiogenesis is very similar to that in atherosclerosis. In the future, animals with the same disease will be able to understand the mechanism of swelling. 3) The possibility of inhibition of intimal hypertrophy induced by p53 gene in arterial wall after G1 arrest, M/G2 arrest, and M/G2 arrest is clear. The introduction of p21 in this study has been shown to be clinically useful. 4)This method is useful for establishing a basis for the study of immunosuppression and induced inflammation in liver transplantation and prevention of liver dysfunction. 5) The repeated application of this method is necessary for the determination of tissue damage, inflammatory effects, and future pyrogen(-) and HVJ-liposome synthesis. 2. Basic study of HVJ-catinic liposome method 1) The efficiency of gene introduction in tissues of HVJ-catinic liposome method is 10-20 times higher than that of the above method, and the tissue damage is reduced. 2) The method of repeated injection and tissue damage recording method is compared with the method of intentional difference, target cell and introduced gene. The above achievements, the clinical usefulness of the new HVJ-catinic liposome method and the HVJ-liposome method are expected to be the same, and the introduction efficiency is excellent.