家族歴濃厚な妊娠糖尿病の関連遺伝子プール構築による分子遺伝学的解析

通过构建具有强烈家族史的妊娠期糖尿病相关基因库进行分子遗传学分析

• 批准号: 11877281
• 负责人: 武田 純
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877281/
• 关键词: 遺伝子変異; 妊娠; 2型糖尿病; インスリン分泌; EST; MODY; 遺伝; 遺伝子タイピング

妊娠糖尿病は妊娠女性にしか出現しないので、発症に関連する遺伝素因を同定するためには通常の遺伝学的手法は有効ではない。本研究では、発現遺伝子をEST(expressed sequence tag)化およびマイクロアレイ化して、分子遺伝学的解析の研究基盤を構築することを目指した。(1)実験動物の膵ラ氏島遺伝子群の大量集積前年度に作成したラット膵ラ氏島cDNAライブラリー全体から無作為に約10,000個のクローンを選別してEST化した。得られたパネルから重複しないEST群を集積し、マイクロアレイの作成に供した。マウスモデルの解析も可能にするために、同動物のライブラリー(膵ラ氏島とMIN6細胞株)も新たに構築し、発現遺伝子を同様にEST化した。(2)ESTマイクロアレイの作成と妊娠によって発現レベルが変化する遺伝子群の解析ラット、マウスの膵ラ氏島および細胞株から集積した上記の重複しないESTを、PCR法によりインサートを増幅し、スライドグラス上にスポットしてマイクロアレイを作成した。種々のハイブリダイゼーション反応条件を検討し、特異的に発現プロフィールが検出される至適条件の確立に成功した。当該年度は、特にラットアレイを中心に候補遺伝子検索に供した。対象となるラット膵ラ氏島組織からmRNAを抽出し、蛍光(Cy3,Cy5)標識してプローブを作成し、上記のESTマイクロアレイと反応させた。その結果、遺伝子発現レベルが変化する多数の遺伝子を検出した。データベースサーチにより、ハウスキーパーを除去した後、対応するヒト遺伝子を獲得した。高次の候補遺伝子に対してSNPマーカーを大量収集し関連解析を展開しているので、関連坐位は近く同定される。

In pregnant women with gestational diabetes mellitus, it is found that the symptoms and symptoms of gestational diabetes are common in women with gestational diabetes. In this study, EST (expressed sequence tag) analysis of molecular biology and molecular biology was carried out. (1) A large number of sub-groups of animals and animals were collected in the previous year. The total number of people in the previous year was not considered as about 10000 people to choose to use ESTs. You have to make sure that the EST cluster is full of information, and that you are making a contribution. It is possible that the new virus is the same as the rest of the cell line (MIN6 cell line). (2) the pregnant women were divided into two groups: the subgroup of the EST, the cell line of the cell line, the weight of the cell line, the size of the cell line, All kinds of information are required to ensure that the conditions are correct, and the special conditions are not valid until the conditions are successful. In the current year, we are looking forward to a request for money from the center of the year. For example, the mRNA extraction system, the optical (Cy3,Cy5) information system, and the EST information system are displayed in the organization. The results show that most of the children show that there are some problems in the system. Please tell me that after you get rid of the baby, you will get it. High-order waiting time, waiting, sitting, waiting, sitting, sitting,

项目成果

S.Yamada et al: "Identification of mutation in hepatocyte nuclear factor-lα gene in Japanese subjects with early-onset NIDDM and functional analysis of mutant proteins"Diabetes. 48. 645-648 (1999)

S. Yamada 等人：“日本早发性 NIDDM 受试者肝细胞核因子-lα 基因突变的鉴定和突变蛋白的功能分析”糖尿病 48. 645-648 (1999)。

Y.Aihara et al.: "Molecular cloning of a novel brain-type Na^+-dependent inorganic phosphate cotransporter."J.Neurochem.. 74. 2622-2625 (2000)

Y.Aihara 等人：“新型脑型Na+依赖性无机磷酸盐协同转运蛋白的分子克隆。”J.Neurochem.. 74. 2622-2625 (2000)

H.Mashima et al: "Genes expressed during the differentiation of pancreatic AR42J cells into unsulin-secreting cells"Diabetes. 48. 304-309 (1999)

H.Mashima 等人：“胰腺 AR42J 细胞分化为胰岛素分泌细胞期间表达的基因”糖尿病。