权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

新規アンチセンス核酸を用いるHIV-nefタンパク質の発現制御

使用新型反义核酸调节 HIV-nef 蛋白表达

基本信息

批准号：
12035205
负责人：
和田猛
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12035205/
关键词：
アンチセンス核酸 DNAアナログボラノホスフェートDNA エイズウイルス Nef mRNA

项目摘要

現在、エイズウイルス遺伝子を標的としたアンチセンス法はある種の限界に到達しており、飛躍的な新しいアイディアの出現が待たれているのが現状である。そこで、本研究では全く新しいアンチセンス核酸であるボラノホスフェートDNAに着目した。ボラノホスフェートDNAは天然型DNAの非架橋酸素原子の一つをボランで置換した構造を持ち、酸や塩基に対して極めて安定である。また、天然型DNAより脂溶性が高く、細胞膜透過性に優れ、ヌクレアーゼによる分解に耐性を示す。さらに、ボラノホスフェートDNAは、相補的な塩基配列を持つRNAとが形成する二重鎖がRNase Hの基質となることなどから、アンチセンス核酸として有望である。しかし、副反応などの問題から、これまでにA,G,C,T4種類の核酸塩基を有するオリゴヌクレオチドボラノホスフェートの合成例は無い。このような状況から、本年度はボラノホスフェートDNAの新規合成法を確立することを目標として研究を開始した。従来のボラノホスフェートDNA合成法は、ホスホロアミダイト法やH-ホスホネート法を用いて3価のオリゴヌクレオチド鎖を構築し、合成の最後のステップでインターヌクレオチドのボラノ化を行うために、核酸塩基部がボラノ化試薬と反応してしまう。従って、この副反応の比較的起こりにくいチミジル酸誘導体のみが合成されている。我々は、あらかじめリン原子にボランが導入された新規ボラノホスホリル化剤を開発し、これを用いてヌクレオシドをボラノホスホリル化することにより、従来法における核酸塩基に対するボラノ化剤の副反応の問題を本質的に解決した。本年度は新規合成法における核酸塩基の保護基の選択、縮合反応系の開発を行い、4種類の2量体TT,CT,GT,ATの合成に成功した。現在、HIV-nef mRNAに対するボラノホスフェート型アンチセンス核酸の合成を検討している。

Now, it's time for the new generation to emerge. This study is entirely new to DNA analysis. DNA is a natural form of DNA that is not bridged by acid atoms. Natural DNA has high lipid solubility, excellent cell membrane permeability, and high decomposition tolerance. The DNA sequence is complementary to the RNA sequence and forms a double lock with RNase H as the substrate. The synthesis of A,G,C,T4-type nucleic acid residues is not successful. This year, the new DNA synthesis method has been established and the research has begun. The DNA synthesis method of the present invention uses three different methods to construct and synthesize DNA, namely, the DNA synthesis method and the H-DNA synthesis method. A comparative study on the synthesis of these compounds was conducted. We are trying to solve the problem of nucleic acid base on the principle of introducing a new nucleic acid base into a new nucleic acid base. This year, new synthetic methods were introduced for the selection of protective groups for nucleic acid residues, the development of condensation reaction systems, and the successful synthesis of two quantities of TT,CT,GT and AT in four species. Now, the synthesis of HIV-nef mRNA is discussed.