修飾塩基を含むRNAの化学合成および構造と機能の探索

含有修饰碱基的RNA的化学合成及其结构和功能的探索

• 批准号: 11155210
• 负责人: 和田 猛
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11155210/
• 关键词: 修飾塩基; RNA; tRNA; ホスホニル化; ホスホリル化; 保護基

天然には、tRNAをはじめとして、A,C,G,U以外の修飾塩基を含む核酸分子が数多く存在し、それぞれが固有の構造と生理活性を担っている。本研究は、これらの修飾塩基を含む核酸分子を化学合成し、修飾,塩基の構造特性、反応性、物理化学的性質、生理活性を化学的な立場から明かにすることを究極の目的とする。修飾塩基をもつヌクレオシドを酵素的にtRNAに組み込むためには、ヌクレオシドの5'-および3'-水酸基をホスホリル化する必要がある。一般に、ヌクレオシド類のホスホリル化反応に際して、副反応を防ぐために、核酸塩基には塩基性条件下除去される保護基が導入される。しかし、修飾塩基の多くは通常の核酸合成に用いられる保護基の除去条件下で分解してしまう。そこで、本研究では、穏和な酸性条件下除去可能なあたらしいリン酸基の保護基を開発し、修飾塩基をもつヌクレオシドの効率的なホスホリル化反応を確立することを目指した。まず、穏和な条件下で核酸塩基を保護することなくホスホニル化できる新しい試薬を開発した。種々のホスホン酸第三級アルキルエステルを合成し、ヌクレオシド5'-水酸基に対するホスホニル化反応を試みたところ、t-ブチル基および2-メチル-1-フェニル-2-プロピル基を置換基としてもつホスホニル化剤を用いた場合に良好な収率で5'-位がホスホニル化された目的物が得られた。これを酸化することにより、高収率で対応するホスフェートヘと変換できた。一方、2'および3'-位に遊離の水酸基をもつヌクレオシドに対して、同様の条件で反応をおこなったところ、2',3'-環状ホスホネート誘導体が得られた。これは、2'または3'-水酸基がホスホニル化された後に、隣接する水酸基の分子内攻撃によって第三級アルコールが脱離して生成したものと考えられる。得られた化合物を酸化することにより、ヌクレオシド2'、3'-環状ホスフェート誘導体を高収率で得た。この化合物はリボヌクレアーゼで処理するとヌクレオシド3'-ホスフェートへ定量的に誘導できるため、きわめて有用である。現在、これらの新規反応を、種々の修飾塩基をもつヌクレオシドに応用し、tRNAに組み込むための基礎的な検討をおこなっている。

The number of nucleic acid molecules containing modified groups other than A,C,G and U in nature is large, and the structure and physiological activity of the nucleic acid molecules are important. This study focuses on the chemical synthesis, modification, structural characteristics, reactivity, physicochemical properties and physiological activities of nucleic acid molecules. The modification of the 5'-and 3'-amino acid groups in the enzyme is necessary. In general, the protective group is introduced under the condition that the nucleic acid group is removed under the basic condition. Many of the modified groups are decomposed under the conditions normally used in nucleic acid synthesis to remove protective groups. In this study, the protective groups for the removal of possible acid groups under acidic conditions were developed and modified to establish the efficiency of acid groups. Under these conditions, the nucleic acid base is protected, and the new test is developed. The third level of the acid is synthesized by the reaction of 5 '-hydroxy acid group with 2-hydroxy-1-hydroxy-2-hydroxy acid group, and the target is obtained by the reaction of 5'-hydroxy acid group with 2-hydroxy-1-hydroxy-2-hydroxy acid group. The price of oil is high. On one side, the 2'and 3'-position free aqueous acid groups can be connected together, and under the same conditions, the opposite, 2', 3'-ring-like organoleptic inducers can be obtained. 2'-Hydroxy-3'-Hydroxy-4 '-methyl-N-methyl-N-methyl-N The compounds were obtained in high yields as 2', 3'-cyclic inducers. These compounds are useful for quantitative induction in the treatment of cancer. Now, the new rules and regulations, the seed modification base, the application base, the tRNA group base, the application base, the seed modification base.

项目成果

Moriguchi, T., Yanagi, T., Wada, T., Sekine, M.: "^<31>P NMR Study of Aminoacylation of 5'-AMP and its Analogs"J. Chem. Soc. Perkin Trans 1. 1859-1865 (1999)

Moriguchi，T.，Yanagi，T.，Wada，T.，Sekine，M.：“5-AMP及其类似物的氨基酰化的^ 31 P NMR研究”J。

Wada, T., Honda, F., Sato, Y., Sekine, M.: "First Synthesis of H-phosphonate Oligonucleotides Bearing N-Unmodified Bases"Tetrahedron Letters. 40・5. 915-918 (1999)

Wada, T.、Honda, F.、Sato, Y.、Sekine, M.：“带有 N-未修饰碱基的 H-膦酸寡核苷酸的首次合成”四面体快报 40・5（1999）。