トランスジェニックマウスを用いたHIV特異的キラーT細胞の認識と機能の解析
使用转基因小鼠分析 HIV 特异性杀伤 T 细胞的识别和功能
基本信息
- 批准号:12035202
- 负责人:
- 金额:$ 1.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
HIV初期感染防御にCTLが重要な役割を果たしていることが報告されているが、その詳細な機構は明らかでない。そこで、HIVに対するCTL活性化機構をin vivoで解明するため、HIV env gp160P18IIIB特異的CTLクローンRT-1由来TCRのTgマウスを作製した。TCRα鎖およびTCRβ鎖のみを発現するTgマウスを用いて、抗原に応答するT細胞のレパトアを解析したところ、α鎖は元来のRT-1α鎖が選択されるのに対し、β鎖のレパトアには多様性が認められた。さらに、TCRα鎖のトランスフェクタントを用いて、抗原認識に関与するTCRβ鎖を解析したところ、Tgマウスでない正常マウスのTCRβ鎖でも、CDR3領域非依存的に抗原を認識し得るという新しいTCRの抗原認識機構が明らかとなった。また、このTgマウスのCD8^+T細胞を抗原刺激することによって、gp120発現細胞に対するCTLを誘導することができた。この時FK-506、CsAでTCRシグナルをブロックしても、IL-2単独の添加によって抗原特異的CTL活性は誘導された。また抗原によるCTL誘導の際、抗IL-12、抗IL-18、抗体IFNγ抗体を添加しても抗原特異的CTL活性に影響はなかったが、抗IL-2R抗体の存在下ではCTL活性もパーフォリンの産生も検出されなかった。さらに、CD8^+T細胞を短時間IL-2存在下で培養すると、IL-2濃度依存的にパーフォリンを産生した。以上より、増殖に必須なサイトカインと考えられていたIL-2はCTLの誘導にも必須な因子であり、またCTL分化は必ずしも細胞増殖を伴わないことが明らかとなった。これらの結果は、今後HIV特異的CTLの誘導を考える上で重要な知見となり得ると考えられる。さらに、RT-1 TCRを認識するクロノタイプ特異的モノクローナル抗体を樹立し、現在CTLのin vivoでの動態を解析中である。
CTL is an important tool for early HIV infection prevention. HIV env gp160 P18 IIIB-specific CTL activation mechanism in vivo TCR α-lock and TCR β-lock expression, Tg, and antigen expression, T cell expression, and α-lock expression, and RT-1 α-lock expression, and β-lock expression, and polymorphism. TCR α lock detection, antigen recognition, TCR β lock detection, Tg detection, CDR3 domain independent detection, antigen recognition, TCR β lock detection. CD8 + T cell antigen stimulation, gp120-producing cell induction In response, FK-506, CsA, TCR, and IL-2 alone were added to induce antigen-specific CTL activity. Antigen specific CTL activity was affected by the addition of anti-IL-12, anti-IL-18, and anti-IFN γ antibodies to CTL induction, and CTL activity was inhibited by the presence of anti-IL-2R antibodies. In addition, when CD8 ^+ T cells are cultured in the presence of IL-2 for a short period of time, IL-2 concentration-dependent apoptosis occurs. IL-2 is an essential factor for CTL induction and differentiation. The results of this study suggest that HIV-specific CTL induction is important in the future. In addition, RT-1 TCR recognition, the establishment of specific antibodies, and the analysis of CTL dynamics in vivo
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yamasaki,S.: "A di-leucine in the ubiquitin moiety : possible involvement in ubiquitinnation-mediated endocytosis."J.B.iol.Chem.. 275. 26213-26219 (2000)
Yamasaki,S.:“泛素部分中的二亮氨酸:可能参与泛素化介导的内吞作用。”J.B.iol.Chem.. 275. 26213-26219 (2000)
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- 发表时间:
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- 通讯作者:
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