トランスジェニックマウスを用いたHIV特異的キラーT細胞の認識と機能の解析
使用转基因小鼠分析 HIV 特异性杀伤 T 细胞的识别和功能
基本信息
- 批准号:13015202
- 负责人:
- 金额:$ 1.47万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2001
- 资助国家:日本
- 起止时间:2001 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
HIV初期感染防御にCTLが重要な役割を果たしていることが報告されているが、その詳細な機構は明らかではない。そこで、HIVに対するCTL活性化機構をin vivoで解明するため、HIV env gp160P18IIIB特異的CTLクローンRT-1由来TCRのTgマウスを作製し、抗原認識機構、CTL分化機構の解析を進めている。これまでにこのTgマウスを用いて、1)クロノタイプ特異的抗体の作成、2)TCRα鎖優位な抗原認識機構の解明、3)IL-2によるTCRシグナル非依存性CTL分化機構の発見、4)CD8+T細胞をHIV-Tgマウスに移入することによるin vivoでの抗原認識、を報告してきた。1)TCRα鎖優位な抗原認識機構の解明・non Tgマウス由来naive CD8+細胞よりVα42H11を有するTCRα鎖をランダムにクローニングし、予めRT-1β鎖を発現させたTG40に各々導入してその抗原応答を調べたところ、応答するクローンは見出されなかった。・抗原刺激を加えたRT-1α鎖Tgマウスより得られたβ鎖を再構成させたTG40において応答が確認されたクローンに関してTCRと抗原とのaffinityを調べたところ、ほとんどがRT-1そのものと同等なaffinityで応答を示すことが判明した。→α鎖に強く依存するRT-1 TCRの抗原認識機構が確証された。2)IL-2によるTCRシグナル非依存性CTL分化機構の解析・RT-1αβT細胞を用いて様々な細胞周期ブロッカー存在下で刺激し、CTL活性を調べた。その結果、MimosineのみがCTL活性を完全に阻害できることが判明した。→他の薬剤同様IL-2R誘導は阻害せず、cell cycleは阻害するが、CTL活性のみを完全に抑制することから、IL-2からCTL分化誘導へ至るシグナル伝達経路を解析する優れたツールとなり得ると考えられた。
In the initial stage of HIV, CTL infection prevention is an important part of the operation. The report shows that the health care agencies are responsible for the prevention of infection. The mechanism of activation of CTL by in vivo and HIV env gp160P18IIIB, the origin of CTL by TCR, Tg by CTL, and the analysis by CTL differentiation mechanism. The antigens were made by using specific antibodies, 1) specific antibodies, 2) TCR α antigens, 3) IL-2 antigens, TCR antigens, independent CTL differentiation mechanisms, 4) CD8+T antigens, HIV-Tg antigens, in vivo antigens, and reports. 1) the TCR α location antigen intelligence institute explains the origin of the non Tg gene. The V α 42H11 cell has the TCR α gene, the RT-1 β antigen, the TG40, the antigen, the antigen. The antigen stimulates RT-1 α, Tg the antigen, and then adds the TCR antigen to the TCR antigen, the TCR antigen, the affinity antigen, the RT-1 antigen, the equivalent affinity, the equivalent affinity, and so on. The alpha gene is strongly dependent on the RT-1 TCR antigen knowledge institute to make sure that it is correct. 2) the independent CTL differentiation mechanism of IL-2 α β T cells was used to analyze the presence of stimulation and CTL activity in RT-1 α β T cells. The results showed that the activity of Mimosine and CTL completely blocked the activity of DNA. In conjunction with IL-2R guidance, cell cycle blockage, CTL activity inhibition, IL-2 differentiation and CTL differentiation were used to determine the success of the test.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yokosuka, T.: "Predominant role of TCRα chain in forming pre-immune TCR repertoire revealed by clonal TCR reconstitution system"J.Exp.Med.. (In press).
Yokosuka, T.:“克隆 TCR 重建系统揭示了 TCRα 链在形成免疫前 TCR 库中的主要作用”J.Exp.Med..(出版中)。
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- 发表时间:
- 期刊:
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