Identifizierung und Charakterisierung von molekularbiologischen Grundlagen zur Wirkung und Resistenz gegen Topoisomerasen gerichteter antineoplastischer Zytostatika

针对拓扑异构酶的抗肿瘤细胞抑制剂的作用和耐药性的分子生物学基础的鉴定和表征

• 批准号: 5304034
• 负责人: Professor Dr. Dirk Strumberg
• 金额: --
• 依托单位: Medizinische Klinik III - Hämatologie/Onkologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5304034?language=en
• 关键词: Identifizierung; und; Charakterisierung; von; molekularbiologischen

Ziel dieses Forschungsvorhabens ist die Charakterisierung der molekularen Grundlagen des Wirkmechanismus von Topoisomerasespezifischer antineoplastischer Chemotherapien.Es gibt Hinweise, daß analog zum Replikations-Kollisions-Modell auch durch Kollision von RNA-Polymerase mit Topoisomerase I-DNA Komplexen zunächst reversible "Topoisomerase I-cleavage complexes" in irreversible, zytotoxische DNA-Strangbrüche überführt werden können. Ein neuerartiges, auf "Ligation-mediated PCR" (LMPCR) basierendes Verfahren zur in vivo Untersuchung von Topoisomerase Typ I induzierten DNA-Läsionen soll die Interaktion von DNA-Topoisomerase I-Komplexen mit Transkription analysieren.In einem weiteren Punkt soll mit diesem Verfahren, basierend auf umfangreiche, eigene Vorarbeiten, die Reparatur von Topoisomerase I-induzierten DNA-Läsionen untersucht werden.Ausgehend von Vorarbeiten zur Quinolon-Resistenz bei Typ II-Topoisomerasen sowie vergleichenden molekularen Analysen von DNA-Protein Interaktionen und Chemo-Sensitivitäten bei humanen- und Hefe-Typ II Topoisomerasen soll die Bedeutung der a4-Helix als Bestandteil der CAP-Homologie Domaine dieses TopoisomeraseEnzymes für die Erkennung von DNA-Schnittstellen und für Inhibitor-Interaktionen analysiert werden. Analog zur Resistenz gegen humane Topoisomerasen gerichteter Zytostatika entwickelt DNA-Gyrase, eine bakterielle Typ II-Topoisomerase, ebenfalls Resistenzen gegen spezifische Inhibitoren, in erster Linie gegen Fluoroquinolone. Es gibt Hinweise, daß bestimmte Mutationen in humanen sowie Hefe Typ II-Topoisomerasen zu einer Resistenz gegen Quinolone führen bei kollateraler Etoposid-Hyersensitivität. Es soll untersucht werden, ob Resistenz-verursachende Mutationen in Typ II-Topoisomerasen neuartige Chemo-Sensitivitäten für weitere Substanzklassen induzieren können.

这些研究是Topoisomerasespezifischer antisomerplastischer Chemotherapien作用机制的分子基础的特征。Hinweise给出了一种类似于拓扑异构酶I-DNA复合物的RNA聚合酶的聚合反应模型，在不可逆的、毒性DNA-Strangbrüche überführt韦尔登聚合反应中形成可逆的“拓扑异构酶I-裂解复合物”。一种新的方法，基于“连接介导的PCR”（LMPCR）的体内检测拓扑异构酶I型的方法，通过转录分析诱导DNA-连接，通过DNA-拓扑异构酶I-复合物的相互作用。拓扑异构酶I诱导的DNA-酶联免疫吸附试验韦尔登。拓扑异构酶可用于人和Hefe-Type II的DNA-蛋白质相互作用和化学敏感性的分子分析，而拓扑异构酶可用于CAP-同源域的α 4-障碍物的研究，用于DNA-蛋白质相互作用和抑制剂-相互作用的分析韦尔登。类似于人的拓扑异构酶的耐药酶，包括DNA-回旋酶，II型拓扑异构酶，抑制剂，氟喹诺酮类药物。在Hinweise的研究中发现，依托泊苷-超敏药物对喹诺酮类药物耐药的II型拓扑异构酶在人体中的突变是最好的。Es soll untersucht韦尔登，ob Resistenz-verursachnut Mutationen in Type II-Topoisomerasen neuartige Chemo-Sensitivitäten für weitere Substanzklassen induzieren können.