Identifizierung und Charakterisierung von molekularbiologischen Grundlagen zur Wirkung und Resistenz gegen Topoisomerasen gerichteter antineoplastischer Zytostatika

点击翻译按钮获取中文摘要

Ziel dieses Forschungsvorhabens ist die Charakterisierung der molekularen Grundlagen des Wirkmechanismus von Topoisomerasespezifischer antineoplastischer Chemotherapien.Es gibt Hinweise, daß analog zum Replikations-Kollisions-Modell auch durch Kollision von RNA-Polymerase mit Topoisomerase I-DNA Komplexen zunächst reversible "Topoisomerase I-cleavage complexes" in irreversible, zytotoxische DNA-Strangbrüche überführt werden können. Ein neuerartiges, auf "Ligation-mediated PCR" (LMPCR) basierendes Verfahren zur in vivo Untersuchung von Topoisomerase Typ I induzierten DNA-Läsionen soll die Interaktion von DNA-Topoisomerase I-Komplexen mit Transkription analysieren.In einem weiteren Punkt soll mit diesem Verfahren, basierend auf umfangreiche, eigene Vorarbeiten, die Reparatur von Topoisomerase I-induzierten DNA-Läsionen untersucht werden.Ausgehend von Vorarbeiten zur Quinolon-Resistenz bei Typ II-Topoisomerasen sowie vergleichenden molekularen Analysen von DNA-Protein Interaktionen und Chemo-Sensitivitäten bei humanen- und Hefe-Typ II Topoisomerasen soll die Bedeutung der a4-Helix als Bestandteil der CAP-Homologie Domaine dieses TopoisomeraseEnzymes für die Erkennung von DNA-Schnittstellen und für Inhibitor-Interaktionen analysiert werden. Analog zur Resistenz gegen humane Topoisomerasen gerichteter Zytostatika entwickelt DNA-Gyrase, eine bakterielle Typ II-Topoisomerase, ebenfalls Resistenzen gegen spezifische Inhibitoren, in erster Linie gegen Fluoroquinolone. Es gibt Hinweise, daß bestimmte Mutationen in humanen sowie Hefe Typ II-Topoisomerasen zu einer Resistenz gegen Quinolone führen bei kollateraler Etoposid-Hyersensitivität. Es soll untersucht werden, ob Resistenz-verursachende Mutationen in Typ II-Topoisomerasen neuartige Chemo-Sensitivitäten für weitere Substanzklassen induzieren können.