Identifizierung und Charakterisierung von molekularbiologischen Grundlagen zur Wirkung und Resistenz gegen Topoisomerasen gerichteter antineoplastischer Zytostatika

这些研究是Topoisomerasespezifischer antisomerplastischer Chemotherapien作用机制的分子基础的特征。Hinweise给出了一种类似于拓扑异构酶I-DNA复合物的RNA聚合酶的聚合反应模型，在不可逆的、毒性DNA-Strangbrüche überführt韦尔登聚合反应中形成可逆的“拓扑异构酶I-裂解复合物”。一种新的方法，基于“连接介导的PCR”（LMPCR）的体内检测拓扑异构酶I型的方法，通过转录分析诱导DNA-连接，通过DNA-拓扑异构酶I-复合物的相互作用。拓扑异构酶I诱导的DNA-酶联免疫吸附试验韦尔登。拓扑异构酶可用于人和Hefe-Type II的DNA-蛋白质相互作用和化学敏感性的分子分析，而拓扑异构酶可用于CAP-同源域的α 4-障碍物的研究，用于DNA-蛋白质相互作用和抑制剂-相互作用的分析韦尔登。类似于人的拓扑异构酶的耐药酶，包括DNA-回旋酶，II型拓扑异构酶，抑制剂，氟喹诺酮类药物。在Hinweise的研究中发现，依托泊苷-超敏药物对喹诺酮类药物耐药的II型拓扑异构酶在人体中的突变是最好的。Es soll untersucht韦尔登，ob Resistenz-verursachnut Mutationen in Type II-Topoisomerasen neuartige Chemo-Sensitivitäten für weitere Substanzklassen induzieren können.

Ziel dieses Forschungsvorhabens ist die Charakterisierung der molekularen Grundlagen des Wirkmechanismus von Topoisomerasespezifischer antineoplastischer Chemotherapien.Es gibt Hinweise, daß analog zum Replikations-Kollisions-Modell auch durch Kollision von RNA-Polymerase mit Topoisomerase I-DNA Komplexen zunächst reversible "Topoisomerase I-cleavage complexes" in irreversible, zytotoxische DNA-Strangbrüche überführt werden können. Ein neuerartiges, auf "Ligation-mediated PCR" (LMPCR) basierendes Verfahren zur in vivo Untersuchung von Topoisomerase Typ I induzierten DNA-Läsionen soll die Interaktion von DNA-Topoisomerase I-Komplexen mit Transkription analysieren.In einem weiteren Punkt soll mit diesem Verfahren, basierend auf umfangreiche, eigene Vorarbeiten, die Reparatur von Topoisomerase I-induzierten DNA-Läsionen untersucht werden.Ausgehend von Vorarbeiten zur Quinolon-Resistenz bei Typ II-Topoisomerasen sowie vergleichenden molekularen Analysen von DNA-Protein Interaktionen und Chemo-Sensitivitäten bei humanen- und Hefe-Typ II Topoisomerasen soll die Bedeutung der a4-Helix als Bestandteil der CAP-Homologie Domaine dieses TopoisomeraseEnzymes für die Erkennung von DNA-Schnittstellen und für Inhibitor-Interaktionen analysiert werden. Analog zur Resistenz gegen humane Topoisomerasen gerichteter Zytostatika entwickelt DNA-Gyrase, eine bakterielle Typ II-Topoisomerase, ebenfalls Resistenzen gegen spezifische Inhibitoren, in erster Linie gegen Fluoroquinolone. Es gibt Hinweise, daß bestimmte Mutationen in humanen sowie Hefe Typ II-Topoisomerasen zu einer Resistenz gegen Quinolone führen bei kollateraler Etoposid-Hyersensitivität. Es soll untersucht werden, ob Resistenz-verursachende Mutationen in Typ II-Topoisomerasen neuartige Chemo-Sensitivitäten für weitere Substanzklassen induzieren können.