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プロテオバクテリアにおけるメチル化DNA関連遺伝子群の網羅的研究

变形菌中甲基化DNA相关基因的综合研究

基本信息

批准号：
12206071
负责人：
平賀壮太
金额：
--
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12206071/
关键词：
DNAメチレーション複製起点複製開始 DnaA SeqA 染色体分配 Muts ミスマッチ修復

项目摘要

我々は先に染色体分配に関与するmukB、mukFおよびmukE遺伝子の産物がMukFEB複合体を形成することを明らかにした。1.SeqA蛋白およびMukFEB複合体の細胞内分布とその役割:複製フォークの進行に伴いSeqA蛋白質が染色体の種々の領域に結合していく過程を複製の同調系を使ってChIP法で解析した。その結果、予想通りに二方向の複製の進行に伴い半メチル化したDNA領域が回収されたことから、SeqAの蛍光焦点が、複製フォークの新生DNAの半メチル化GATC配列に結合したSeqA分子のクラスターであることが証明された。新生細胞では2個のMukFEB-GFPのクラスターが細胞長の1/4、3/4の位置に存在し、また1個のSeqAの蛍光焦点が細胞の中心に存在することを明らかにした。電顕によりMukFEB複合体は約100nmのフィラメントを形成し、両端に大きな球状ドメインを持つ。MukFEB複合体分子は互に球状ドメインで結合して大きなネットワークを作り易いことが明らかになった。2.姉妹染色体の対合の発見:複製後、複製起点(oriC)DNAコピーどうしは直ちに互に対合し、この対合は長期間持続し、その後この対合は解かれてそれぞれ2方向に移動することを明らかにした(Hiraga et al.2000)。染色体上の種々の領域について同様に解析した結果、驚くべきことに、姉妹染色体の対合はほぼ染色体全体で起っており、そして複製後期にこの対合が染色体全体で一斉に解除された。これは、「細菌に姉妹染色体対合(粘着)が存在する」ことを最初に証明したものである。姉妹染色体対合(粘着)の発見により、今までに提唱されていた種々の染色体分配のモデルは全て不完全であることがわかり、我々は新しいモデルを提唱した。

The chromosomal distribution of mukB, mukF, mukE, son, and MukFEB complex is formed in our laboratory. Intracellular distribution of 1.SeqA protein MukFEB replicates: replication was performed with SeqA protein chromosomes in various domains combined with the process of replication and homologous analysis by ChIP method. The results show that you can use both directions to copy the data in the field of DNA. In the field of SeqA, you need to copy the data in the field of SeqA. In the field of DNA, you need to copy the data in the field of SeqA. You need to copy the data in the field of SeqA. There is a cell in the center of the cell in 2 MukFEB-GFP cycles. The MukFEB complex of electrical equipment is used to form a 100nm complex, and the end is large enough to be spherical. The MukFEB complex molecule interacts with each other in the shape of globes and in combination with each other, so that it can be easily detected. two。 Sister chromosomal conjunctivities see: after oriC, the starting point of the replication (DNA), the direct connection of each other, the long-term maintenance of each other, and the subsequent resolution of the transfer protocol (Hiraga et al.2000) in the direction of the transfer protocol. The results of the analysis of the results of the simultaneous analysis of the results of several kinds of chromosomes in the field of the chromosome, the results of the analysis of the results, the The chromosome adhesion (adhesion) of the sister chromosomes of the fungus and the fungus were detected in the first place. Sister chromosome confluence (adhesion) is very common, and now we are going to sing about the distribution of chromosomes in all kinds of chromosomes, which is not complete.