発癌に関与するユビキチンリガーゼBRCA1の機能解析

泛素连接酶BRCA1参与癌变的功能分析

• 批准号: 01J60075
• 负责人: 松本 雅記
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J60075/
• 关键词: タンパク質分解; ユビキチン; プロテオミクス; 発癌; プロテアソーム

ユビキチン・プロテアソーム系はエネルギー依存的に細胞内タンパク質の分解を行うシステムであり、小さなポリペプチドであるユビキチンが基質分子に鎖状に付加され、これがプロテアソームによって認識されることで特異的な基質分子の分解が可能である。本研究では発癌に関与するBRCA1などのユビキチンリガーゼの基質分子の探索を通しでユビキチン化と発癌との関係を理解することを目的とする。タンパク質のユビキチン化反応は非常に複雑なため、いくつかのモデル基質を用いたin vitroユビキチン化反応系の構築を試みた。いくつかのモデル基質の中で神経変性疾患との関連が示されているタンパク質Ataxic-3が非常に効率よくユビキチン化を受けることを見出した。そこで、Ataxin-3をモデル基質としてin vitroユビキチン化反応系を用いてAtaxin-3に対するユビキチン化関連酵素の同定を試み、VCP/E4BがAtaxin-3のユビキチン化および分解に関与することを示し、本研究内容をEMBO J.に投稿し受理された。また、BRCA1などのユビキチンリガーゼに対する基質分子を探索する手段として、細胞内でユビキチン化しているタンパク質の網羅的探索法を構築している。細胞内から抗ユビキチン化抗体を用いたユビキチン化タンパク質を濃縮し、オンラインLC-タンデム質量分析計によるショットガン解析によってユビキチン化タンパク質(およびその結合タンパク質)を数百種類同定することに成功している。現在、本方法と遺伝子ノックダウンなどを併用して基質分子の探索を行っている。

In addition, the matrix molecules are locked together in a variety of ways, such as in a variety of ways, and the specific matrix molecules can be decomposed. The purpose of this study is to explore the relationship between BRCA1 and cancer development, and to understand the relationship between BRCA 1 and cancer development. In order to improve the quality of the product, we should try to construct a new product system. The relationship between neurologic disorders in the medium and the matrix is shown in the following table: Ataxin-3 is an important component of the VCP/E4B system. The VCP/E4B system is used in the VCP/E4B system. The method of exploring matrix molecules in cells and BRCA1 cells is constructed. The intracellular anti-virus antibody has been successfully identified in hundreds of similar ways by using the LC-DNA mass analysis system. Now, this method is applied to the exploration of matrix molecules.

项目成果

松本雅記, 中山敬一: "ポリグルタミン病とユビキチン・プロテアソーム系によるタンパク質分解"神経研究の進歩. Vol.46No.5. 681-695 (2002)

Masaki Matsumoto、Keiichi Nakayama：“泛素蛋白酶体系统引起的多谷氨酰胺疾病和蛋白质降解”神经学研究进展第 46 卷第 681-695 卷（2002 年）。

松本 雅記: "安定同位体代謝ラベル法によるディファレンシャル・プロテオミクス"実験医学. 21(16). 2239-2244 (2003)

Masanori Matsumoto：“使用稳定同位素代谢标记的差异蛋白质组学”实验医学 21(16)。

Oshikawa et al.: "Preferential interaction of TIP120A with Cul1 that is not modified by NEDD8 and not associated with Skp1."Biochem Biophys Res Commun.. 303(4). 1209-1216 (2003)

Oshikawa 等人：“TIP120A 与 Cul1 的优先相互作用不受 NEDD8 修饰，且与 Skp1 无关。”Biochem Biophys Res Commun. 303(4)。

C.Kaneko, S.Hatakeyama, M.Matsumoto, M.Yada, K.Nakayama, K.I.Nakayama: "Characterization of the mouse gene for the U-box-type ubiquitin ligase UFD2a"Biochemical and Biophysical Research Communications. 300. 297-304 (2002)

C.Kaneko、S.Hatakeyama、M.Matsumoto、M.Yada、K.Nakayama、K.I.Nakayama：“U-box 型泛素连接酶 UFD2a 小鼠基因的表征”生物化学和生物物理研究通讯。

Matsumoto M. et al.: "Molecular clearance of ataxin-3 is regulated by a mammalian E4"EMBO J.. (in press). (2004)

Matsumoto M. 等人：“ataxin-3 的分子清除由哺乳动物 E4 调节”EMBO J..（出版中）。