HIV-1 RevによるウイルスmRNA核外輸送系の作動機作解析

HIV-1 Rev对病毒mRNA核输出系统的机制分析

• 批准号: 13015225
• 负责人: 木村 富紀
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015225/
• 关键词: HIV-1 Rev; mRNA核外輸送; イントロンレスmRNA; CRM1; Ran; CTE; mRNA輸送因子の階層性

我々はこれ迄に、HIV-1 Rev蛋白の共発現がルシフェラーゼ(Luc)cDNA発現ベクターpRSVluc-wtの活性を抑制し、これがmRNAの核外輸送の抑制に原因する事から、イントロンを持たないmRNAの核外輸送において、Revを介したウイルスmRNAの核外輸送の場合と共通の細胞因子が利用される可能性を示してきた。本年度は、このLuc mRNA核外輸送の抑制がイントロンを持たない事に起因することを明らかにするため、同ベクター3'非翻訳領域にβ-globinのイントロン(pRSVluc-int)或いはSRV-1 CTE配列(pRSVluc-CTE)を挿入し、Rev発現の影響を見た。その結果、Revの共発現はint-Luc mRNA核外輸送には影響しなかったが、CTE-Luc mRNAの輸送を抑制した。この核外輸送抑制は、wt-Luc mRNAの場合と同様、Ranの共発現で解除される事から、CTEを介したmRNA輸送にもRanが関与する事が示唆された。一方、Rev核外輸送シグナルレセプターCRM1の阻害薬LMBの効果を検討したところ、wt-Luc mRNAの核外輸送のみが抑制されたにも関わらず、CRMIに結合し機能を抑制するnucleoporin CANのドミナントネガティブ変異体ΔCANの共発現は、wt-とint-Luc mRNAの双方の輸送を抑制した。これらの事実は、イントロンレスmRNAの核外輪送においては、Rev依存性RNA核外輸送系と同様、Ran及びCRM1が共通に利用されるが、スプライシングを受けたmRNAの輸送には、代わってCAN結合性の第2の輸送因子であるTAPが関与する可能性を示す。従って、RevによるイントロンレスmRNAの核外輸送抑制は、イントロンの有無により輸送因子が使い分けられる結果、後者がRevと因子を共有するようになった為と考えられた。

I 々, れ, れ to に, HIV-1 Rev protein の 発 now total が ル シ フ ェ ラ ー ゼ (Luc) cDNA 発 now ベ ク タ ー pRSVluc - wt の inhibition し, を こ れ が mRNA の nucleus delivery の reasons に す る matter か ら, イ ン ト ロ ン を hold た な い mRNA の nucleus delivery に お い て, Rev を interface し た ウ イ ル ス mRNA の conveying の field outside the core The と common <s:1> cytokine が utilizes the される possibility を to show that て て た た た た. This year は, こ の Luc mRNA nucleus delivery の inhibit が イ ン ト ロ ン を hold た な に い things cause す る こ と を Ming ら か に す る た め, with ベ ク タ ー 3 'not turn 訳 field に beta globin の イ ン ト ロ ン (pRSVluc - int) or い は SRV 1 The CTE pairing (pRSVluc-CTE)を insert into を and the impact of Rev occurrence を can be found in た. The そ <s:1> results showed that the co-occurrence of Rev <e:1> affected the extracellular transport of <s:1> int-Luc mRNA に に and affected the <s:1> な ったが ったが of CTE-Luc mRNA, and inhibited the <s:1> transport of cte-luc mrna を and <s:1> た. こ の nucleus conveying inhibit は, wt - Luc mRNA と の occasions with others and Ran の 発 で now remove さ れ る matter か ら, CTE を interface し た mRNA transport に も Ran が masato and す が る things in business さ れ た. Side, Rev nucleus conveying シ グ ナ ル レ セ プ タ ー CRM1 の resistance against 薬 LMB の unseen fruit を beg し 検 た と こ ろ, wt - Luc mRNA の nucleus delivery の み が inhibit さ れ た に も masato わ ら ず, CRMI に combining し function を inhibit す る nucleoporin CAN の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ - variant Δ CAN の 発 は now, wt - と int - Luc mRNA の both の conveying を inhibit し た. こ れ ら の things be は, イ ン ト ロ ン レ ス mRNA の nuclear ocean shipping send に お い て は nuclear transport department, Rev dependability RNA と with others, Ran and び CRM1 が に using common さ れ る が, ス プ ラ イ シ ン グ を by け た mRNA の conveying に は, generation わ っ て CAN associativity の の transmission factor 2 で あ る TAP が masato and す る possible Sex を indicates す. 従 っ て, Rev に よ る イ ン ト ロ ン レ ス mRNA の nucleus conveying inhibit は, イ ン ト ロ ン の presence of に よ り transmission factor が make い points け ら れ る results, the latter が Rev と factor を mutual す る よ う に な っ た for と exam え ら れ た.