植物遺伝子の新しい温度依存的発現制御機構

植物基因的新温度依赖性表达控制机制

• 批准号: 13017215
• 负责人: 射場 厚
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13017215/
• 关键词: イネ; RFLP; RNAポリメラーゼ; 葉緑体

(1)イネ核由来プラスチドRNA polymerase遺伝子の解析イネから、複数のプラスチド局在ファージ型RNA polymerase(NEP)遺伝子Osrpo Tpのクローンを単離し、それらの塩基配列を調べたところ、ORFの5'側に、367bpの欠失があるクローンが一定の割合で存在することを見出した。イネゲノムチーム(RGP)の完全長cDNAクローンと比較したところ、RGP由来のcDNAクローンの配列も同様の欠失を含んでいた。この欠失はフレームシフトを引き起こすため、活性のあるNEPは合成されないと考えられる。また、プラスチド局在型NEPに対する特異的ペプチド抗体を用いて、タンパク質レベルでのNEPの発現パターンを調べたところ、野生株においてはrpoBなど、NEPによって転写される遺伝子の転写パターンと一致していた。しかし、virescent変異株においては、葉の発生ステージ後期でrpoBのmRNA蓄積量が上昇するが、NEPタンパク量は逆に減少していた。このようなNEPの発現パターンはOsrpoTp mRNAの蓄積パターンと一致することから、NEPの翻訳後の活性化にvirescent遺伝子が関与することが示唆された。(2)イネvirescent遺伝子のクローニング(1)V_1遺伝子:遺伝子座近傍のAFLPをスクリーニングし、約1cMの距離にあるCAPSマーカーを見つけ、そこを基点に染色体歩行を進めている。(2)V_2遺伝子:V_2が座乗するBACクローンを同定し、V2の座乗領域を物理距離28kbpの範囲に絞り込んだ。アノテーションとcDNA検索の結果から、この領域上に2つの候補遺伝子を見いだし、その1つにアミノ酸置換を引き起こす点変異があることがわかった。(3)V_3遺伝子:第6染色体長腕側の約5.0cMの位置に存在する約40kbpの領域に絞り込んだ。アノテーションの結果から、この領域上に9個の候補遺伝子を見いだした。

(1) イ ネ nuclear origin プ ラ ス チ ド traces of RNA polymerase 伝 son の parsing イ ネ か ら, plural の プ ラ ス チ ド bureau in フ ァ ー ジ type of RNA polymerase (NEP) 伝 Osrpo son Tp の ク ロ ー ン を 単 し, そ れ ら の salt base with column を adjustable べ た と こ ろ, ORF の 5 'side に, lost 367 bp の owe が あ る ク ロ ー ン が の cut mixing exist で す る こ と を shows し た. イ ネ ゲ ノ ム チ ー ム (contig-oriented) の completely cDNA ク ロ ー ン と compare し た と こ ろ, contig-oriented origin の cDNA ク ロ ー ン の match column も with others の owe lost を containing ん で い た. The <s:1> is deficient in ムシフトを フレ ムシフトを ムシフトを ムシフトを, which leads to <s:1> すため, and the active <s:1> あるNEP <s:1> synthesis されな と と と is investigated in えられる. ま た, プ ラ ス チ ド bureau type in NEP に す seaborne る specific ペ プ チ を ド antibody with い て, タ ン パ ク qualitative レ ベ ル で の NEP の 発 now パ タ ー ン を adjustable べ た と こ ろ, wild strains に お い て は rpoB な ど, NEP に よ っ て planning write さ れ る posthumous son 伝 の planning write パ タ ー ン と consistent し て い た. し か し, virescent - different strains に お い て は, leaf の 発 raw ス テ ー ジ late で rpoB の mRNA volume rising が す る が, NEP タ ン パ ク decrease は inverse に し て い た. こ の よ う な NEP の 発 now パ タ ー ン は OsrpoTp mRNA の accumulation パ タ ー ン と consistent す る こ と か ら, NEP の turn after 訳 の activeness に virescent posthumous son 伝 が masato and す る こ と が in stopping さ れ た. (2) イ ネ virescent posthumous son 伝 の ク ロ ー ニ ン グ (1) V_1 heritage 伝 son: heritage 伝 stroma nearly alongside の markers を ス ク リ ー ニ ン グ し, distance of about 1 cm の に あ る CAPS マ ー カ ー を see つ け, そ こ を bp に chromosome step line を into め て い る. (2) V_2 heritage 伝 son: V_2 が seat 乗 す る BAC ク ロ ー ン を with fixed し, V2 の 乗 field を physical distance and KBP の van 囲 に ground り 込 ん だ. ア ノ テ ー シ ョ ン と cDNA 検 cable の results か ら, こ の field に 2 つ の alternate heritage 伝 を son see い だ し, そ の 1 つ に ア ミ ノ lead acid replacement を き up こ す points - different が あ る こ と が わ か っ た. (3)V_3 offspring 伝 : At approximately 5.0cM of the long carpal side of chromosome 6, there is a に of about 40kbp in the field of に twisting 込んだ 込んだ. The results of アノテ アノテ ショ ショ ショ た the results of に in the ら <s:1> field and に9 <s:1> candidates 伝 を can be found in だ だ た た.

项目成果

平田徳宏: "植物細胞"朝倉書店(印刷中). (2002)

平田典宏：《植物细胞》朝仓书店（出版中）（2002 年）。

K.Iba: "Acclimative response to temperature stress in higher plants : Approaches of gene engineering for temperature tolerance"Annu.Rev.Plant Biol.. 53. 225-245 (2002)

K.Iba：“高等植物对温度胁迫的适应反应：温度耐受性的基因工程方法”Annu.Rev.Plant Biol.. 53. 225-245 (2002)

楠見健介: "植物オルガネラの分化と多様性(印刷中)"細胞工学別冊「植物細胞工学シリーズ」. 17. (2002)

久住健介：“植物细胞器的分化和多样性（出版中）”细胞工程特别版“植物细胞工程系列”17。（2002）。

A.Yara: "Production of transgenic Japonica rice (Oryza sativa) cultivar, Taichung 65, by the Agrobacterium-mediated method"Plant Biotech. 18. 305-310 (2001)

A.Yara：“通过农杆菌介导的方法生产转基因粳稻（Oryza sativa）品种，台中 65”，Plant Biotech。

G.Horiguchi: "Characterization of Arabidopsis mutants that are associated with altered C18 unsaturated fatty acid metabolism"Plant Sci.. 161. 1117-1123 (2001)

G.Horiguchi：“与 C18 不饱和脂肪酸代谢改变相关的拟南芥突变体的表征”植物科学 161. 1117-1123 (2001)