時間空間特異的な遺伝子発現制御系を用いた記憶・学習の分子機構の解明

使用时空特异性基因表达控制系统阐明记忆和学习的分子机制

• 批准号: 13210056
• 负责人: 崎村 建司
• 金额: $ 4.93万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13210056/
• 关键词: コンディショナル組換え系; シナプス可塑性; 記憶・学習; C57BL; 6; グルタミン酸受容体

シナプス形成過程に関与する分子機構が、シナプスの可塑性発現と記憶・学習にも使用されるという仮説を証明するために、脳の部位と発達段階の時期を限局して機能分子を欠損させたマウスを作成し解析する。このために我々は、学習能力の高いC57BL/6系統マウス由来のES細胞を実用化し、遺伝子背景の問題を解消できるようにした。さらに、活性誘導可能なcreリコンビネースとその認識配列loxPを用いたコンディショナル組換え系を開発した。この系を用いて分子欠損をおこなうために、興奮性シナプス伝達を担うAMPA型グルタミン酸受容体α2サブユニット、カイニン酸型受容体β2、γ1、γ2サブユニットおよびNMDA型受容体ε2サブユニット、シナプス肥厚に局在するPSD95、さらに細胞接着分子βカテニンなどの遺伝子にloxP配列を挿入した標的マウスを作成した。これらのマウスは、FRT-FLP組換え系を用いてオマイシン耐性遺伝子領域を除去し、野生型のマウスと表現型が同一であることを確認した。これらloxP挿入標的マウスと海馬CA3錐体細胞、小脳プルキンエ細胞、小脳穎粒細胞、海馬CA1領域それぞれでcre組換え酵素を発現するマウスを交配させて、部位・時期特異的分子欠損マウスの作製を進めている。これまでに、海馬CA3錐体細胞で特異的にNMDA型受容体ε2サブユニットとβカテニン分子がそれぞれ欠失した個体を得、その表現型を形態学的、電気生理学的、行動学的手法で解析し、シナプス形成過程に関与するこれら分子がシナプスの可塑性発現と記憶・学習にどのような役割を果たすのかを解析している。

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项目成果

Minami, T.: "Characterization of the glutamatergic system for Induction and maintenance of allodynia"Brain Research. 895. 178-185 (2001)

Minami, T.：“诱导和维持异常性疼痛的谷氨酸能系统的特征”脑研究。

Yarnazaki, M.: "Differential palmitoylation of two mouse glutamate receptor interacting protein 1(GRIPl)formes with different N-terminal sequences"Neuroscience Letters. 304. 81-84 (2001)

Yarnazaki, M.：“具有不同 N 末端序列的两种小鼠谷氨酸受体相互作用蛋白 1 (GRIP1) 的差异棕榈酰化”神经科学快报。

Ikeno, K.: "The Lurcher mutation reveals Ca2+ permeability and PKC modification of the GIuR δ channnels"Neuroscience Research. 41. 193-200 (2001)

Ikeno, K.：“Lurcher 突变揭示了 GIuR δ 通道的 Ca2+ 通透性和 PKC 修饰”《神经科学研究》，41. 193-200 (2001)。

Kitayama, K.: "Purkinje Cell-Specific and Inducible Gene Recombination System"Biochemical and Biophysical research Communications. 281. 1134-1140 (2001)

Kitayama, K.：“浦肯野细胞特异性和诱导基因重组系统”生物化学和生物物理研究通讯。

Takeuchi, T.: "Roles of the glutamate receptor ε2 and δ2 subunits In the potentiation and prepulse Inhibition of the acoustic startle reflex"Europian journal of Neuroscience. 14. 153-160 (2001)

Takeuchi, T.：“谷氨酸受体 ε2 和 δ2 亚基在声惊吓反射的增强和前脉冲抑制中的作用”《欧洲神经科学杂志》14. 153-160 (2001)。