神経可塑性における転写後調節の役割

转录后调控在神经可塑性中的作用

• 批准号: 11878154
• 负责人: 崎村 建司
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878154/
• 关键词: PSD; 転写後修飾; スプライシング; GRIP-I; GluRα2; パルミトイル化; コンディショナルターゲッティング

本研究の目的は、シナプス可塑性獲得の過程に転写後調節の機構がどのように関与するのかを明らかにすることである。これまでに、AMPA型グルタミン酸受容体チャネルに結合することが示されているGRIP-I(glutamate receptor interacting protein-I)に、2種類のN末端と3カ所での選択的スプライシングによる分子多型が存在していることを明らかにした。また、各々の分子の発現は、発達時期ならびに領域により異なっていることを見いだした。さらに、2種類のN末端の一方のみがパルミトイル化されることを見いだし、この修飾がGRIPを膜へ局在させる機構の一つであることが明らかになった。この結果は現在投稿中である。AMPA型受容体α2サブユニットC末端には、これまで報告されているGluRα2-CP以外に、GluRα1と同様な長い配列を持つGluRα2-CLが存在しており、このGluRα2-CLとGluRα1を共発現したチャネルは、GluRα2-CPとGluRα1を共発現したチャネルと異なったチャネル特性を示した。GluRα2が2種類のC末端を持つことを明らかにするために、遺伝子クローンを単離しその構造を解析した。その結果、GluRα2-CPとM4は同一のエクソンにあり、GluRα2-CLにはエクソンの途中からスプライスすることが明らかになった。また、生体での2種類の分子の生理的意義を明らかにするために、GluRα2-CLを選択的に欠損するマウスを作製した。

这项研究的目的是阐明转录后调节机制如何参与突触可塑性获取过程。迄今为止，我们透露，由于GRIP-I（谷氨酸受体相互作用蛋白I-I）的替代剪接引起的分子多态性，已显示与AMPA型谷氨酸受体通道结合，两种类型的N-末端和三个位置存在于AMPA型谷氨酸受体通道中。还发现，每个分子的表达取决于发育时间和区域。此外，我们发现只有两个N末端中的一个是棕榈酰，这表明这种修饰是将握把握在膜上的机制之一。此结果当前正在发布。除了先前报道的GlURα2-CP外，Glurα2-Cl具有与GlURα1相似的长序列外，还存在于AMPA型受体α2亚基的C端，并且共表达Glurα2-Cl和Glurα1的通道表现出与这些共表达glurα2-CP的不同通道特征。为了阐明Glurα2具有两个C末端，分离了基因克隆并分析了它们的结构。结果，揭示了Glurα2-CP和M4在同一外显子中，并且Glurα2-CL在外显子中间拼接。此外，为了阐明这两个分子在生物体中的生理意义，准备了小鼠在GLURα2-CL中有选择性缺陷。

项目成果

Kitayama,K.: "Purkinje cell specific and inducible gene recombination system generated from C57BL/6 mouse ES cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. (in press). (2001)

Kitayama,K.：“从 C57BL/6 小鼠 ES 细胞生成的浦肯野细胞特异性和可诱导基因重组系统”Biochem.Biophys.Res.Commun..（出版中）。

Hashimoto,K.: "Impairment of AMPA receptor function in cerebellar granule cells of ataxic mutant mouse stargazer"J.Neurosci.. 19(14). 6027-6036 (1999)

Hashimoto,K.：“共济失调突变型小鼠观星者小脑颗粒细胞中 AMPA 受体功能的损伤”J.Neurosci.. 19(14)。

Yamakura,T.: "N-methyl-D-aspartate receptor channel block by meperidine is dependent on extracellular pH"Anesthesia and Analgesia. 90(4). 928-932 (2000)

Yamakura,T.：“哌啶的 N-甲基-D-天冬氨酸受体通道阻断取决于细胞外 pH”麻醉和镇痛。

Ito,I.: "Input-specific targeting of NMDA receptor subtypes at mouse hippocampal CA3 pyramidal neuron synapses"Neuropharmacology. 39(6). 943-951 (2000)

Ito,I.：“小鼠海马 CA3 锥体神经元突触 NMDA 受体亚型的输入特异性靶向”神经药理学。

久野宗 監修: "細胞工学 別冊「脳を知る」"(株)秀潤社. 205 (1999)

久野宗监督：《细胞工程特刊‘理解大脑’》 Shujunsha Co., Ltd. 205 (1999)