构建针对脑功能分析优化的转基因小鼠创建系统-猫眼课题宝

构建针对脑功能分析优化的转基因小鼠创建系统

批准号：

20019019

负责人：

崎村建司

金额：

$4.86万

依托单位：

Niigata University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

财政年份：

2008

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2008 至 2009

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20019019/

关键词：

神経科学バイオテクノロジー遺伝子発生工学 ES細胞ノックアウトマウス

项目摘要

项目成果

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本研究の目的は、脳の特定な部位や細胞に限定した標的遺伝子の欠損が出来るCreリコンビネース発現マウスを系統的に作出し、脳機能を分子レベルで解明するリソースを開発することである。このために、我々は本年度新たな方法を開発した。第1に迅速遺伝子改変ベクター作成法である。構築の迅速化を図るために、ES細胞での相同組換えに必要な薬剤耐性カセットやネガティブ選択に用いるジフテリア毒素遺伝子カセットなどをあらかじめ組み込んだ汎用ベクターを用いて、BACクローンでのRED/ET組み換え法、さらにラムダファージの組み換え系を利用して多種類のDNA断片を一時に結合して相同組換えベクターを作成する。この方法の特徴は、これまでベクター作成時に問題になっていたDNAライゲーションのステップを用いないので、特別な訓練を受けていない学生や技官にも出来るところにある。第2に、ES細胞での相同組換え効率を高めるために薬剤耐性カセットを改良した。UPA-trap型ターゲティングベクターを用いることで、薬剤耐性コロニーの中に占める相同組換え体の割合を上げることができた。これらの技術改良は、遺伝子改変マウスを迅速かつ安価に作成する上できわめて重要なものである。また、本研究では各種細胞選択的にCreリコンビナーゼ発現するマウスを作製した。海馬CA3錐体細胞で特異性高く組替えが惹起できるGRg1Creの他、海馬CA1錐体細胞選択的なCP14、小脳プルキンエ細胞のD2CRE、小脳顆粒細胞に選択性の高いGRe3iCre、ほぼ全ての顆粒細胞にCreを発現するTiam1Creである。これらCre発現マウスは特定研究「統合脳」の班員のみならず広く脳研究をおこなう研究者に提供する予定である。

期刊论文(47)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

マウス脳AMPA受容体サブユニットの定量的解析

小鼠脑 AMPA 受体亚基的定量分析

DOI： --

发表时间： 2009

期刊：

影响因子： --

作者：

[Inoue,N., Watanabe,S., 宮川剛, 渡辺美智子, 松林伸幸, 星詳子, Toh H, 滝沢琢己, 渡辺美智子, 畦地裕統]

通讯作者：畦地裕統

The endocannabinoid 2-arachidonoylglycerol produced by diacylglycerol lipase alpha mediates retrograde suppression of synaptic transmission

二酰甘油脂肪酶α产生的内源性大麻素2-花生四烯酰甘油介导突触传递的逆行抑制

DOI： --

发表时间： 2010

期刊：

Neuron

影响因子： 16.2

作者：

[Tanimura A, Yamazaki M, (他3名) Abe M, Kita Y, Hashimoto K, Shimizu T, Watanabe M, Sakimura K, Kano M.]

通讯作者： Kano M.

Functionnal coupling between mGlurl and Cav3.1 t-type calcium channels enhances cerebellar Purkinje cell excitability and local signaling

mGlurl 和 Cav3.1 t 型钙通道之间的功能耦合增强小脑浦肯野细胞兴奋性和局部信号传导

DOI： --

发表时间： 2008

期刊：

影响因子： --

作者：

[Sakimura, K, Yumi Watanabe, 杉本真由美, 柳田圭介, 金子涼輔, 田代善崇, 薄井宏, 石井聡, Yamazaki M, Hildebrand ME, 笹川展幸, 崎村建司, Yamazaki M., Otsu Y, Isope P]

通讯作者： Isope P

神経変性疾患モデル作製のための26Sプロテアソームコンディショナルノックアウトマウスの確立

26S蛋白酶体条件敲除小鼠神经退行性疾病模型的建立

DOI： --

发表时间： 2008

期刊：

影响因子： --

作者：

[Sakimura, K, Yumi Watanabe, 杉本真由美, 柳田圭介, 金子涼輔, 田代善崇, 薄井宏, 石井聡, Yamazaki M, Hildebrand ME, 笹川展幸, 崎村建司, Yamazaki M., Otsu Y, Isope P, 植村健, 安村美里, 岸岡歩, 渡辺文寛, 山崎真弥, 笹川展幸, 田代善崇]

通讯作者：田代善崇

変異シンタキシン1A(R151G)ノックインマウスにおけるシナプス小胞輸送の解析'

突变突触蛋白 1A (R151G) 敲入小鼠中突触小泡运输的分析

DOI： --

发表时间： 2009

期刊：

影响因子： --

作者：

[Takeuchi, T., et.al, 八矢幸大, H.Azechi, M.Abe, Y.Tashiro, 畦地裕統, 明石馨, 山崎真弥, 渡邊裕美]

通讯作者：渡邊裕美