Phosphorylierung der Tyrosin Phosphatase SHP2 durch Protein Kinase-C: Untersuchungen zur physiologischen Relevanz sowie zur Bedeutung innerhalb der Insulinsignalkette

蛋白激酶 C 对酪氨酸磷酸酶 SHP2 的磷酸化：胰岛素信号链内生理相关性和重要性的研究

• 批准号: 5328283
• 负责人: Professor Dr. Hans-Ulrich Häring, since 5/2007
• 金额: --
• 依托单位: Innere Medizin IV: Endokrinologie und Diabetologie, Angiologie, Nephrologie und Klinische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5328283?language=en
• 关键词: Phosphorylierung; der; Tyrosin; Phosphatase; SHP2

Im Rahmen der Pathogenese des Diabetes mellitus Typ 2 spielt die Insulinresístenz der Zielgewebe eine zentrale Rolle. Zum Verständis der Resistenz-Entwicklung ist vor allem die Aufklärung der molekularen Mechanismen von Bedeutung, die für die negative Regulation des Insulinsignals verantwortlich sind. Neben den Serin/Threonin-Kinasen der Protein Kinase-C (PKC)-Familie werden vor allem Protein-Tyrosin-Phosphatasen als wichtige negative Modulatoren des Insulinsignals diskutiert. Die AG konnte in Vorarbeiten eine spezifische Interaktion verschiedener PKCIsoformen mit der Protein-Tyorisn-Phosphatase SHP2 nachweisen und Ser 576 sowie 591 als die relevanten, PKC-abhängigen Phosphorylierungsstellen identifizieren. Im Rahmen des vorgeschlagenen Projektes soll nun die physiologische Relevanz dieser Serinphosphorylierung näher untersucht werden. Im Einzelnen sollen dabei folgende Fragen beantwortet werden: (1) Führt die Serinphosphorylierung der zytosolischen SHP2 zu einer Translokation innerhalb der Zelle und zu einer Kolokalisation mit PKC? (2) Kommt es nach Phosphorylierung der SHP2 an den von der AG identifizierten Positionen 576 und 591 zu einer Aktivitäts- oder Affinitätsänderung der Phosphatase gegenüber verschiedenen Substraten? (3) Hat die Interaktion zwischen PKC und SHP2 einen Einfluß auf metabolische oder mitogene Effekte des Insulinsignals? (4) Parallel dazu soll ein spezifischer Phosphoserin-Antikörper für die identifizierten Serinrest 576 und 591 generiert werden und mit diesem ein PKC Aktivitäts-Assay für in vivo Untersuchungen entwickelt werden.

在2型糖尿病的发病机制中，胰岛素抵抗是Zielgeweb的中心作用。抵抗力发展的研究主要是为了增强胰岛素信号分子的负调节作用。蛋白激酶C（PKC）家族的丝氨酸/苏氨酸激酶与酪氨酸磷酸酶（Protein-Tyrosin-Phosphatasen）有关，它们对胰岛素信号具有负调节作用。该AG在Vorarbeiten中有一种特异性的与蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2和Ser 576的相互作用，其中Ser 591与相关的PKC-阻断剂磷酸化有关。在营养学项目中，生理学相关性与韦尔登磷酸化密切相关。韦尔登的另一个解决方案是：（1）将固相SHP 2的丝氨酸磷酸化转化为Zelle的内参，并与PKC进行共定位？(2)SHP 2的磷酸化和AG识别位点576和591之间的相互作用是激活还是激活底物中的磷酸酶？(3)PKC与SHP 2的相互作用对胰岛素信号的代谢或有丝分裂有何影响？(4)平行的方法是使用一种特异性的磷酸丝氨酸-抗血清用于鉴别Serinrest 576和591 generiert韦尔登，并使用这种方法进行体内PKC激活试验，以进行韦尔登试验。