ペプチドによる神経修飾作用とペプチド開口放出調節の分子生理学的解析

肽神经调节作用的分子生理分析和肽胞吐作用的调节

• 批准号: 03F00319
• 负责人: 岡 良隆
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00319/
• 关键词: ペプチドニューロン; 開口放出; 単一細胞PCR; 分子生理学; カルシウム; イメージング; パッチクランプ; GnRH

・GnRHニューロンのイオンチャネル活動・細胞内Ca^<2+>濃度のリアルタイム同時測定従来の岡らの研究成果から,環境の変化は神経伝達物質やホルモンという形で神経系・内分泌系の信号を生成することにより終神経GnRH細胞の細胞膜に存在する伝達物質・ホルモン受容体を活性化し,それと共役する細胞内情報伝達機構によって,終神経GnRH細胞の細胞体および脳内に広く分布する神経突起からのGnRH放出量を調節し,これによって,広範囲の神経系の機能を修飾して動物の神経系が環境の変化に柔軟に適応することを可能にする,と考えられる。このような考えを支持するために,まず,GnRH放出をリアルタイムに測定しつつ,神経伝達物質やホルモンなどを作用させたときにGnRH放出がどう変化するかを知る必要がある。また、一般に開口放出が起きるには細胞内Ca^<2+>濃度の上昇が必要だが,ペプチドニューロンにおいては細胞内Ca^<2+>濃度の時空間的変化と,SNARE蛋白質などの開口放出分子装置の働きとの関係が未解決である。そこで,まず脳スライスを用いて単一終神経GnRH細胞からパッチ電極で電気活動記録を行いつつ,電極を通じて細胞内に導入したCalcium Green, fura-2等の蛍光指示薬により細胞内Ca^<2+>濃度を計測するための予備実験を行った。また,同時に,今後平行して行う予定の,GnRHおよびGnRH受容体の単一細胞PCRを用いた解析を行うための予備実験も行った。

GnRH cell membrane activation, intracellular Ca^<2+> concentration, intracellular information transmission mechanism, and environmental changes in the production of signals from the nervous system and endocrine system. The distribution of GnRH in the cell body and the regulation of GnRH release in the nervous system of animals This is the first time that GnRH release has been detected. It is necessary to know the effect of GnRH release on GnRH release. In general, the rise of intracellular Ca ^<2 +> concentration is necessary, and the relationship between SNARE protein and molecular device of open release is unresolved. In this case, the use of a single electrode for recording electrical activity in GnRH cells and electrodes for measuring intracellular Ca^<2+> concentration through the introduction of fluorescent indicators such as Calcium Green and fura-2 into the cells. In the future, the GnRH receptor will be analyzed in a single cell PCR.

项目成果

Amano, M., Oka, Y., Yamanome, T., Okuzawa, K., Yamamori, K.: "Immunocytochemical localization and ontogenic development of melanin-concentrating hormone in the brain of a pleuronectiform fish, the barfin flounder."Cell and Tissue Research. 311. 71-77 (200

Amano, M.、Oka, Y.、Yamanome, T.、Okuzawa, K.、Yamamori, K.：“胸鳍鲽鱼大脑中黑色素浓缩激素的免疫细胞化学定位和个体发育。”细胞

Hajdu P., Varga Z., Pieri C., Panyi Gy., Gaspar R.: "Cholesterol modifies the gating of Kv1.3 in human T lymphocytes."Pflugers Archives, European Journal of Physiology. 445. 674-682 (2003)

Hajdu P.、Varga Z.、Pieri C.、Panyi Gy.、Gaspar R.：“胆固醇改变人 T 淋巴细胞中 Kv1.3 的门控。”Pflugers Archives，欧洲生理学杂志。