ペプチドによる神経修飾作用とペプチド開口放出調節の分子生理学的解析

肽神经调节作用的分子生理分析和肽胞吐作用的调节

• 批准号: 03F03319
• 负责人: 岡 良隆
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03319/
• 关键词: ペプチドニューロン; 開口放出; 単一細胞PCR; 分子生理学; カルシウム; イメージング; パッチクランプ; GnRH

10個のアミノ酸よりなる生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)ペプチドは脊椎動物の生殖に重要なだけでなく,脳内のGnRH受容体を介して神経修飾を行うことが知られている。形態学的には、今回の研究対象となった終神経GnRH系のほか、視索前野及び中脳にも異なる分子種のGnRHペプチドを産生し、機能的にも異なる合計3つのGnRH神経系が脳内に存在することが脊椎動物を通じてわかっており、興味をもたれている。今回研究対象としたのは、当研究室の従来の研究結果から、脳内に広く投射してGnRHペプチドを放出し、GnRH受容体を持つニューロンに神経修飾作用を及ぼすことが知られている終神経GnRHニューロンである。従来の研究から、このGnRH細胞は免疫組織化学よりsGnRHと呼ばれる分子種のGnRHを産生すること、電気生理学的に、GnRH受容体を介して自己・旁分泌的にGnRHを受容し、自発活動などに影響を受けること、などがわかっている。そこで、今回の研究では、GnRH単一細胞からパッチクランプにて電気生理学的記録をした後に記録した細胞だけの細胞質をパッチピペットを用いて吸引し、それを出発材料として逆転写PCRする方法(RT-PCR)を用いて、熱帯魚ドワーフグーラミーの終神経GnRHニューロンに発現するGnRHおよびGnRH受容体(GnRHR)のタイプを同定した。特徴的かつ規則的な自発活動であるペースメーカー活動を記録した終神経GnRHニューロンにおいてこのような解析を行った結果、当研究室でドワーフグーラミーの脳からクローニングした3種類のGnRH受容体遺伝子のうちdgGnRHR1-1,1-2の2種類およびsGnRH遺伝子が発現していることが分かった。一方、dgGnRH-R2は発現していないことがわかった。これらは、GnRHニューロンにおいてGnRH受容体サブタイプの機能や、共役するGタンパク質及び細胞内情報伝達系が多様化している可能性を考えると大変興味深い結果であり、今後はこれらの問題について分子生理学的に解析していく予定である。

10 gonadal stimulation factors are important for vertebrate reproduction, and GnRH receptors in the gonads are mediated by neuromodification. Morphological and current research targets include the GnRH system, pre-visual field and mid-visual field, molecular species of GnRH, production of GnRH, and functional differences. This study aims to investigate the effects of GnRH receptor on GnRH receptor release and its modification, as well as the effects of GnRH receptor on GnRH receptor release. Recent studies have shown that GnRH cells are affected by immunohistochemistry, electrophysiology, GnRH receptors, paracrine GnRH receptors, and spontaneous activity. In this study, we recorded the electrical physiology of GnRH cells and then recorded the cytoplasm of GnRH cells. We used reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) to detect GnRH receptor (GnRHR) in GnRH cells. Characteristics of the rule of self-generation activities recorded in the final GnRH analysis results, when the laboratory is open to the three types of GnRH receptor gene, GnRHR 1- 1, 1 -2 and 2 types of GnRH gene, developed in the middle of the analysis. One side, dgRH-R2, appeared. The results of this study are of great interest to the future analysis of GnRH receptor functions and interactions with GnRH receptors and intracellular information systems.

项目成果

Non-typical Na+ channels and neural functions.

非典型Na通道和神经功能。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Seitai no Kagaku 56
• 作者: Tsutsui;H.;Oka;Y.
• 通讯作者: Y.

Ontogenic development of three GnRH systems in the brain of a pleuronectiform fish, barfin flounder

• DOI: 10.2108/zsj.21.311
• 发表时间: 2004-03-01
• 期刊: ZOOLOGICAL SCIENCE
• 影响因子: 0.9
• 作者: Amano, M;Okubo, K;Yamamori, K
• 通讯作者: Yamamori, K

Immunocytochemical localization and ontogenic development of α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH) in the brain of pleuronectiform fish, Barfin Flounder.

胸膜鲽鱼大脑中α-黑素细胞刺激激素（α-MSH）的免疫细胞化学定位和个体发育。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Cell and Tissue Research 320
• 作者: Amano;M
• 通讯作者: M

Strategies for sperm chemotaxis in the siphonophores and ascidians: A numerical simulation study

• DOI: 10.2307/1543540
• 发表时间: 2004-04-01
• 期刊: BIOLOGICAL BULLETIN
• 影响因子: 1.6
• 作者: Ishikawa, M;Tsutsui, H;Morisawa, M
• 通讯作者: Morisawa, M

Different modes of gonadotropin-releasing hormone(GnRH)release from multiple GnRH systems as revealed by radioimmunoassay using brain slices of a teleost, the dwarf gourami(Colisa lalia).

使用硬骨鱼（Colisa lalia）的脑切片进行放射免疫测定，揭示了多个 GnRH 系统释放促性腺激素释放激素 (GnRH) 的不同模式。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Endocrinology 145
• 作者: Ishizaki;M.;Iigo;M.;Amano;M.;Oka;Y.
• 通讯作者: Y.