細胞死における細胞内情報伝達分子のターゲティング機構の解明と薬物開発への応用

阐明细胞死亡过程中细胞内信号分子的靶向机制及其在药物开发中的应用

• 批准号: 04J03889
• 负责人: 梶本 武利
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J03889/
• 关键词: スフィンゴシンキナーゼ; スフィンゴシン-1-リン酸; ターゲティング; トランスロケーション

中枢神経系におけるスフィンゴシンキナーゼ(SK)のターゲティング機構およびその役割を明らかにするために、ラット胎児海馬の初代培養神経細胞を用いて以下の解析を行った。まずラット海馬初代培養神経細胞におけるSK1の細胞内局在を調べたところ、定常状態においてSK1は前シナプス部位に限局的に発現していることが分かった。さらに脱分極刺激やグルタミン酸刺激による活動電位の誘発によって、前シナプスでのSK1の細胞質から膜へのトランスロケーションが観察された。また活動電位の誘発時にSKによるS1Pの産生増加も観察された。これらはSK1が神経細胞の前シナプスにおいて細胞質から膜ヘターゲティングしている事を示している。次にこのSK1のターゲティング機構の神経細胞機能における役割を調べた。SKの阻害剤は脱分極刺激による海馬神経細胞からのグルタミン酸の放出を抑制した。また、RNAi法によるSK1の発現抑制によっても同様に脱分極刺激によるグルタミン酸放出の抑制が観察された。これらの結果は、神経伝達物質放出機構においてSK1が重要な役割を担っている事を示している。さらに、脱分極刺激時にSKによって産生されたS1Pが前シナプス上に発現するS1P受容体に結合する事が分かった。また、外来のS1P刺激は海馬神経細胞におけるグルタミン酸の放出を誘発した。これらはS1Pが前シナプスにおいて自己分泌様に作用して神経伝達物質の放出を誘導している事を示している。本研究により、神経細胞の活動電位発生時にスフィンゴシンキナーゼ1が前シナプス膜ヘターゲティングし、S1Pの産生を促進し、このS1Pが自己分泌様に前シナプスのS1P受容体に作用し、その下流で神経伝達物質の放出および神経伝達物質放出の増強が引き起こされる、という新たなシグナル伝達機構の存在が明らかとなった。現在、細胞内情報伝達分子のターゲティング機構を光シグナルとして簡便に検出する新規プローブを開発中である。この新規プローブ開発は細胞内情報伝達分子のターゲティング機構を指標とした新規薬剤開発への応用へと発展するものと期待される。

Department of central god 経 に お け る ス フ ィ ン ゴ シ ン キ ナ ー ゼ (SK) の タ ー ゲ テ ィ ン グ institutions お よ び そ の "を cut Ming ら か に す る た め に, ラ ッ ト tire where at the beginning of hippocampal の trainees resting to restore energy 経 cells を い analytical line を っ て following の た. ま ず ラ ッ ト early training resting to restore energy 経 hippocampus cell に お け る SK1 の cells inside bureau in を adjustable べ た と こ ろ, steady state に お い て SK1 は before シ ナ プ ス parts に limit bureau に 発 now し て い る こ と が points か っ た. さ ら に points off very stimulating や グ ル タ ミ ン acid stimulation に よ る activity potential の 発 lure に よ っ て, former シ ナ プ ス で の SK1 の cytoplasm か ら membrane へ の ト ラ ン ス ロ ケ ー シ ョ ン が 観 examine さ れ た. When the また active potential is induced by induction, the にSKによるS1P potential is produced and increased また 観 observe された. こ れ ら は SK1 が before god 経 cells の シ ナ プ ス に お い て cytoplasm か ら membrane ヘ タ ー ゲ テ ィ ン グ し て い を る things in し て い る. Youdaoplaceholder0 べた <s:1> SK1 <s:1> タ ゲティ ゲティ ゲティ グ グ institution における neuro-cell function における division を regulation べた. The SK <s:1> inhibitor <s:1> depolarizes and stimulates the による hippocampus cells ら ら グ タ タ タ to release を inhibitory た た. ま た, RNAi に よ る SK1 の 発 now inhibit に よ っ て も with others に points off very stimulating に よ る グ ル タ ミ ン acid released の control が 観 examine さ れ た. こ れ ら の results は, god 経 伝 to material institution に お い て SK1 が cut を bear important な service っ て い を る things in し て い る. さ ら に, polarization stimulation に SK に よ っ て produce さ れ た S1P が before シ ナ プ ス on に 発 now す る S1P by let body に combining す る matter が points か っ た. Youdaoplaceholder0, the foreign <s:1> S1P stimulates the epinetic neuronal cells of the epinetic hippocampus におけるグ におけるグ タ タ and the release of the <s:1> acid <e:1> を induces the <s:1> た. Before こ れ ら は S1P が シ ナ プ ス に お い て themselves others に role し て god 経 伝 of substances released の を induced し て い る matter を shown し て い る. This study に よ り when born, god 経 cell potential 発 の activity に ス フ ィ ン ゴ シ ン キ ナ ー ゼ before 1 が シ ナ プ ス membrane ヘ タ ー ゲ テ ィ ン グ し, S1P の を promote し, こ の S1P が themselves others before に シ ナ プ ス の S1P subjected to let body に し, そ の obscene で god 経 伝 of substances released の お よ び god 経 伝 of material の raised strong が き The <s:1> される, と う う う new たなシグナ たなシグナ 伝 伝 institutions <s:1> exist が and ら となった となった となった. Now, intelligence 伝 of molecules in cells の タ ー ゲ テ ィ ン グ institutions を light シ グ ナ ル と し て simple に 検 out す る new rules プ ロ ー ブ を in open 発 で あ る. こ の new rules プ ロ ー ブ open 発 は intelligence 伝 of molecules in cells の タ ー ゲ テ ィ ン グ institutions を index と し た new rules 薬 tonic open 発 へ の 応 with へ と 発 exhibition す る も の と expect さ れ る.

项目成果

スフィンゴシン1-リン酸による神経伝達物質の放出促進機能を応用した新規てんかん治療薬の開発

利用1-磷酸鞘氨醇促进神经递质释放功能的新型抗癫痫药物的开发

• 发表时间: 2007