癌抑制遺伝子p16のエピジェネティックな失活に着目した新しい分子標的予防法の開発

开发以抑癌基因p16表观遗传失活为重点的新型分子靶点预防方法

• 批准号: 17790370
• 负责人: 与五沢 真吾
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790370/
• 关键词: 遺伝子; 癌; 発現制御; 食品; 薬剤反応性; INK4ファミリー; エピジェネティクス; メチル化; p16

近年、DNA塩基配列の変異を伴わずに、後成的にDNAが修飾されて起こるエピジェネティックな遺伝子発現の変化が、発癌の普遍的な機構として注目されている。中でもDNA高メチル化による癌抑制遺伝子の発現消失は様々な癌で観察されている。サイクリン依存性キナーゼ(cdk)を阻害することで細胞周期進行を抑制するINK4ファミリー(p16、p15など)も、DNAプロモーター領域の高メチル化により遺伝子発現消失し、発癌に深く関与していると考えられる。このような、エピジェネティックな要因で消失した癌抑制遺伝子の発現を回復できる薬剤や食品成分を発見し、その作用機構を解明できれば、画期的な分子標的癌予防法の確立に繋がると考えられる。まず、p16遺伝子プロモーター領域においてメチル化特異的PCRを行ったところ、ヒト大腸癌由来SW480、HT29細胞などでメチル化特異的な増幅がみとめられた。そこで、DNAメチルトランスフェラーゼ(Dnmt)の活性が高いSW480細胞に対し、Dnmt阻害剤である5-AZA-dCによる効果を検討したところ、Dnmt1の発現減少とp16、p15の発現回復がウェスタンブロットで確認できた。これを受け、SW480細胞について、細胞増殖抑制、細胞毒性を指標に食品成分・薬剤の探索を行ってきたが、増殖抑制効果のみられた食品成分の中に、p16の発現回復がみられるものは現在までのところ見つかっていない。一方、p15はp16と機能的に同一と考えられ、家族性メラノーマのように、p16がジェネティックに失活した癌に対しても、p15を誘導する事でp16の機能を代償できると考えられる。p15について、HT29細胞でEGFレセプターを分子標的とするZD1839(ゲフィチニブ、イレッサ)がp15を誘導する事、p15が転写因子Oct-1によって負に制御されている事を明らかにした。5-AZA-dCによるp15の発現回復がp16に比べて特に顕著であったこと等からも、今後はp16に加えて、p15についても留意しつつ、エピジェネティックに作用して癌を抑制する食品成分の探索を続けて行きたい。

In recent years, DNA salt base with column の - different を with わ ず に, epigenetic に が DNA modified さ れ て up こ る エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク な posthumous son 伝 発 の now - が, 発 carcinoma の common な institutions と し て attention さ れ て い る. In the process of で long DNA, a high メチ による is used to inhibit による cancer, resulting in the occurrence and disappearance of 伝 offspring, and <s:1> similar 々な cancer で観 is detected in されて and る る. サ イ ク リ ン dependency キ ナ ー ゼ (CDK) を resistance against す る こ と で cell cycle を inhibit す る INK4 フ ァ ミ リ ー (p16 and p15 な ど) も, DNA プ ロ モ ー タ ー domain の high メ チ ル change に よ り heritage 伝 発 now disappear し, 発 carcinoma に deep く masato and し て い る と exam え ら れ る. こ の よ う な, エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク な will disappear で し た cancer inhibition of heritage 伝 son の 発 reply now を で き る 薬 tonic や food composition を 発 し, そ の role institutions を interpret で き れ ば, painting な molecular targets of cancer to prevent method の establish に 繋 が る と exam え ら れ る. ま ず, p16 but 伝 プ ロ モ ー タ ー field に お い て メ チ ル line of specific PCR を っ た と こ ろ, ヒ ト colorectal origin SW480, HT29 cell な ど で メ チ ル な of specific rights of が み と め ら れ た. そ こ で, DNA メ チ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ (Dnmt) の high active が い SW480 cells に し seaborne, Dnmt resistance against tonic で あ る 5 - AZA - dC に よ る unseen fruit を beg し 検 た と こ ろ, Dnmt1 の 発 now reduce と p16 and p15 の 発 now reply が ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト で confirm で き た. こ れ を け, SW480 cells に つ い て inhibition, cell toxicity, cell rights colonization を index に food composition, 薬 tonic の exploration line を っ て き た が, inhibition of unseen rights colonization fruit の み ら れ た に, p16 in food composition の の 発 now reply が み ら れ る も の は now ま で の と こ ろ see つ か っ て い な い. Function of one party, p15 は p16 と に same と exam え ら れ, familial メ ラ ノ ー マ の よ う に, p16 が ジ ェ ネ テ ィ ッ ク に inactivation し た carcinoma に し seaborne て も, p15 を induced す る matter で p16 の function を compensatory で き る と exam え ら れ る. P15 に つ い て, HT29 cell で EGF レ セ プ タ ー を molecular mark と す る ZD1839 (ゲ フ ィ チ ニ ブ, イ レ ッ サ) が p15 を induced す る, p15 が planning write factor Oct 1 に よ っ て negative に suppression さ れ て い る matter を Ming ら か に し た. 5 - AZA - dC に よ る p15 の 発 now reply が p16 に than べ て, に 顕 the で あ っ た こ と etc か ら も, future は p16 に plus え て, p15 に つ い て も advertent し つ つ, エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク に role し を て cancer inhibition す る food composition の explore を 続 け て line き た い.

项目成果

Quercetin induces gadd45 expression through a p53-independent pathway.

槲皮素通过 p53 独立途径诱导 gadd45 表达。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Oncol Rep 14
• 作者: Takagaki N;Sowa Y;Oki T;Nakanishi R;Yogosawa S;Sakai T;Maeda T. et al.;Murata K. et al.;Das SK et al.;Shimizu K et al.;Yoshida T et al.
• 通讯作者: Yoshida T et al.

Lysocellin, a metabolite of the novel drug' alopestatin', induces G1 arrest and prevents cytotoxicity induced by etoposide.

溶血素是新药“alopestatin”的代谢产物，可诱导 G1 期阻滞并防止依托泊苷诱导的细胞毒性。

• 发表时间: 2006
• 期刊: International Journal of Oncology 28・4
• 作者: 石岡みずき;渡邊弘樹;三木友香理;他;Hitomi T et al.;Koyama M et al.;Takahara Y et al.
• 通讯作者: Takahara Y et al.

Inhibitory effects of cancer cell proliferation by novel histone deacetylase inhibitors involve p21/WAF1 induction and G2/M arrest.

• DOI: 10.1248/bpb.28.849
• 发表时间: 2005-05
• 期刊: Biological & pharmaceutical bulletin
• 影响因子: 2
• 作者: Taishi Maeda;Y. Nagaoka;Y. Kawai;Nobumasa Takagaki;C. Yasuda;Shingo Yogosawa;Y. Sowa;T. Sakai;S. Uesato

A novel synthetic drug, LB-18, closely related to lembehyne-A derived from a marine sponge, induces caspase-independent cell death to human neuroblastoma cells

一种新型合成药物 LB-18，与源自海绵的 lembehyne-A 密切相关，可诱导人神经母细胞瘤细胞的不依赖于 caspase 的细胞死亡

• 发表时间: 2006
• 期刊: Int J Oncol. 29
• 作者: Izumi M;Yogosawa S;Aoki S;Watanabe H;Kamiyama J;Takahara Y;Sowa Y;Kobayashi M;Hosoi H;Sugimoto T;Sakai T
• 通讯作者: Sakai T