レンチウイルスベクターを用いた新しい遺伝子機能解析システムの構築とその応用

新型慢病毒载体基因功能分析体系的构建及其应用

• 批准号: 18680036
• 负责人: 伊川 正人
• 金额: $ 18.97万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18680036/
• 关键词: レンチウイルス; 遺伝子組換え; 胎盤; トランスジェニック; ノックアウト; 遺伝子破壊; バイオリソース; 生殖; 遺伝子機能解析

レンチウイルスベクターはHuman Immunodeficiency Virus(HIV)由来のレトロウイルスベクターの1種であるが、特筆すべき利点として、非分裂期にある細胞にも効率良く感染できる特徴や、遺伝子発現が抑制されにくい特徴を併せ持つ。本研究では、動物個体レベルで遺伝子機能を解析するツールとして、レンチウイルスベクターの有用性について検討することを目的としている。これまでにレンチウイルスベクターを、透明帯を取り除いた受精卵に感染させることで、非常に効率よくトランスジェニックマウスを作製できること、さらにその応用として透明帯を取り除いた胚盤胞期胚にウイルスベクターを感染させると胎盤特異的に遺伝子発現できるシステムを開発した。20年度はジーントラップベクターを載せたレンチウイルスベクターを作製し、受精卵に感染させる方法でトランスジェニックマウスを大量に作製した。得られた産仔の約7割について、ゲノムDNAにレンチウイルスベクターが組み込まれていることをPCRにより確認するとともに、ベクターが組み込まれた遺伝子座を近傍のゲノム配列をPCRにより増幅して、454シーケンサーなどを用いて大量解析するシステムの構築を行った。その結果、ランダムに組み込まれたレンチウイルスベクターの約半数は、内在性遺伝子を破壊していることを確認できた。つまり受精卵にレンチウイルスベクターを感染させることで、内在性遺伝子をランダムに破壊できることをしめした。これらのランダム遺伝子破壊マウスは、リクエストに応じて広く配布することで、生命科学研究を下支えするバイオリソースとして活用する。

Human Immunodeficiency Virus(HIV) is a virus that has been identified in a variety of ways, including: (1) the characteristics of infection;(2) the characteristics of inhibition of virus development; and (3) the characteristics of inhibition of virus development. The purpose of this study is to analyze the function of individual animals, and to discuss the usefulness of individual animals. This is the first time that a placenta specific embryo has been developed, and the first time that a placenta specific embryo has been developed, the embryo is infected. 20 years ago, the number of infected eggs was increased by 100%. The results showed that the number of pups was about 7, the number of About half of the results of the study were confirmed by the results of the study. The eggs are fertilized and the eggs are infected. This is the first time that the United States has made such a move.

项目成果

Mechanisms of sperm-egg interactions emerging from gene-manipul ated animals

基因操作动物的精卵相互作用机制

• 发表时间: 2008
• 期刊: Int J Dev Biol 52
• 作者: Ikawa;M. et.al.
• 通讯作者: M. et.al.

Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb

• DOI: 10.1038/nature06281
• 发表时间: 2007-11-22
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Kobayakawa, Ko;Kobayakawa, Reiko;Sakano, Hitoshi
• 通讯作者: Sakano, Hitoshi

Choroidal neovascularization in transgenic mice expressing prokineticin 1 : an animal model for age-related macular degeneration.

表达前动力蛋白1的转基因小鼠中的脉络膜新血管形成：年龄相关性黄斑变性的动物模型。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mol Ther 13
• 作者: Tanaka N;Ikawa M;Mata NL;Verma IM
• 通讯作者: Verma IM

Complementation of placental defects and embryonic lethality by trophoblast cell specific lentiviral gene expressiontransfer

通过滋养层细胞特异性慢病毒基因表达转移来补充胎盘缺陷和胚胎致死率

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nat Biotechnol 25・2
• 作者: Okada Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

PGAP1 knock-out mice show otocephaly and male infertility

• DOI: 10.1074/jbc.m705601200
• 发表时间: 2007-10-19
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ueda, Yasutaka;Yamaguchi, Ryo;Kinoshita, Taroh
• 通讯作者: Kinoshita, Taroh