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海洋微生物からの制がん活性に関連した酵素阻害物質の探索

从海洋微生物中寻找与抗癌活性相关的酶抑制剂

基本信息

批准号：
08F08437
负责人：
松永茂樹
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08437/
关键词：
海洋微生物放線菌カテプシンB ヒストンデアセチラーゼ糸状菌

项目摘要

海洋研究開発機構所属の海洋微生物の分類と生物学を専門とする能木裕一博士との共同研究により、能木研究室から提供された海洋起源微生物の放線菌およそ300種および同糸状菌60株を探索源とし、生物試験として、ヒストン脱アセチル化酵素ならびにカテプシンBに対する酵素阻害活性および培養がん細胞に対する細胞毒性スクリーニングを実施した結果、活性の認められた株からの活性成分の単離・構造決定を行った。海洋性放線菌のA-232株の培養液がカテプシンBに対して阻害活性を示したため、大量培養を行い活性成分の分離を行った。培養液を濾過し、ろ液を酢酸エチルにて抽出した。一方、菌体はアセトンで抽出した。抽出物を合一し、逆相クロマトグラフィーにて分画した。得られた60%メタノール溶出画分をさらにSephadex LH-20を用いるクロマトグラフィー、シリカゲルカラムクロマトグラフィーおよび逆相高速液体クロマトグラフィーで精製し、ピークを分取した。現在、これらの構造解析を質量分析および核磁気共鳴スペクトルによって行っている。他方では、海洋性糸状菌のJMFO34株に含まれる細胞毒性物質の探索を行った。培養液の酢酸エチル画分をシリカゲルカラムクロマトグラフィー、逆相フラッシュクロマトグラフィーおよびアセトニトリル-水混合溶媒を移動相とする逆相液体クロマトグラフィーで精製を行い、活性物質を単離した。主要な活性物質はカビ毒として知られているグライトトキシンであった。現在、それ以外の活性物質の構造決定中である。

The Marine Microorganism Taxonomy and Biology Division of the Marine Research and Development Institute provides 300 species of marine origin microorganisms and 60 strains of marine origin microorganisms for joint research. The activity of enzyme inhibition and cytotoxicity of cell culture were determined by the activity of enzyme inhibition. The culture solution of A-232 strain of marine actinomycetes was used to show the inhibition activity of B. The culture medium is filtered and the liquid is extracted. A party, the body is not easy to extract. The extract is divided into two parts. 60% of Sephadex LH-20 was dissolved in water. Now, the structure analysis and mass analysis of the nuclear magnetic resonance spectrum are carried out. The study of cytotoxic substances in JMFO34 strains of other marine fungi was carried out. The culture medium is composed of a mixture of acid and water, a mobile phase and a reverse phase liquid, and the active substance is isolated. The main active substance is toxic. Now, the structure of active substances other than.