哺乳類細胞を用いたオートファゴソーム形成機構の解析

利用哺乳动物细胞分析自噬体形成机制

• 批准号: 21677002
• 负责人: 水島 昇
• 金额: $ 29.62万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (S)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21677002/
• 关键词: オートファジー; オートファゴソーム; 小胞体; PI3キナーゼ; ULK1; At14; Atg2; p62; Atg14

これまでに哺乳類オートファゴソーム形成に関わるAtg因子を多数同定してきた。そこで、本年度はそれらを5つのモジュールに分類してその遺伝学的階層構造を決定した。その結果、ULK1-Atg13-FIP200-Atg101複合体が小胞体の一部にまず局在化し、それに依存してクラスIIIPI3キナーゼ複合体であるAtg14-Beclin 1-Vps34-Vps15がリクルートされることが判明した。その下流では、PI3Pのエフェクターと考えられるDFCP1、WIPI-1、さらに膜伸長因子であると考えられるAtg12-Atg5-Atg16L複合体とLC3-PEがリクルートされる。さらに小胞体膜タンパク質であるVMP1の解析結果を踏まえて、オートファゴソーム形成部位は小胞体の微小ドメインであることを提唱した。さらにこれらの関連をもとにして、オートファジーの選択的基質であるp62がどのステップでオートファジー関連構造体にリクルートされるかを検討した。従来はp62がオートファゴソーム膜のLC3と直接結合することがその認識機構であると考えられてきたが、今回の解析からp62はLC3を含むほとんどのAtg因子に非依存的にオートファゴソーム形成部位に集積しうることが明らかとなった。さらに哺乳類Atg9もこの部位に一過的に集積することを見いだした。各因子の変異細胞の電子顕微鏡解析を含めながら、オートファゴソーム形成部位の超微形態学的・生化学的解析を進めている。

The <s:1> れまでに mammals <s:1> ム ム ム ム form に related わるAtg factors を are mostly the same, and the て て た た た. そ こ で, this year's は そ れ ら を 5 つ の モ ジ ュ ー ル に classification し て そ の but 伝 learn class structure を decided し た. そ の results, ULK1 - Atg13 - FIP200 - Atg101 complex が small cell body の a に ま ず bureau in し, そ れ に dependent し て ク ラ ス IIIPI3 キ ナ ー ゼ complex で あ る Atg14 - Beclin 1 - Vps34 - Vps15 が リ ク ル ー ト さ れ る こ と が.at し た. そ の obscene で は, PI3P の エ フ ェ ク タ ー と exam え ら れ る DFCP1, WIPI - 1, さ ら に membrane elongation factors で あ る と exam え ら れ る Atg12 Atg5 - Atg16L complex と LC3 - PE が リ ク ル ー ト さ れ る. さ ら に small cell body membrane タ ン パ ク qualitative で あ る VMP1 の analytical results を tread ま え て, オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム forming parts は small cell body の tiny ド メ イ ン で あ る こ と を mention sing し た. さ ら に こ れ ら の masato even を も と に し て, オ ー ト フ ァ ジ ー の sentaku substrate で あ る p62 が ど の ス テ ッ プ で オ ー ト フ ァ ジ ー masato even constructs に リ ク ル ー ト さ れ る か を beg し 検 た. 従 to は p62 が オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム membrane の LC3 と directly combined す る こ と が そ の know institutions で あ る と exam え ら れ て き た が, today back to の analytic か ら p62 は LC3 を containing む ほ と ん ど の に Atg factor of interdependent に オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム forming parts に set product し う る こ と が Ming ら か と な っ た. Youdaoplaceholder0 the に accumulation of に passing through the <s:1> part of the さらに mammalian Atg9 cyst する とを can be seen in the だ だ た た. Each factor の - idioblasts の electronic 顕 micromirror parsing を containing め な が ら, オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム forming parts の ultrastructural morphology, biochemical analytic を into め て い る.

项目成果

オートファジーの分子機構と生理機能

自噬的分子机制及生理功能

• 发表时间: 2011
• 期刊: 血液内科
• 作者: Miyahara;H.;K.Kitazawa;K.Nagaya;Y.Yokoyama;H.Matsuzaki;K.Masuda;T.Nakamura;Y.Muraki;大槻玲;貝塚剛志
• 通讯作者: 貝塚剛志

Dynein- and activity-dependent retrograde transport of autophagosomes in neuronal axons

• DOI: 10.4161/auto.6.3.11262
• 发表时间: 2010-04-01
• 期刊: AUTOPHAGY
• 影响因子: 13.3
• 作者: Katsumata, Kiyoshi;Nishiyama, Jun;Yuzaki, Michisuke
• 通讯作者: Yuzaki, Michisuke

どんどん入れ替わっている私達の体 ～新鮮さを保つ秘密～

我们的身体在不断的更新换代～保持新鲜的秘诀～

• 发表时间: 2010
• 作者: 穴井陽祐;村上幸治;後藤浩二;水島昇
• 通讯作者: 水島昇

哺乳類ULK1-Atg13-FIP200複合体の新たな構成因子Atg101の発見

发现 Atg101，哺乳动物 ULK1-Atg13-FIP200 复合物的新成分

• 发表时间: 2009
• 作者: N. Ikeda;T. Natori;T. Okubo;A. Sugo;M. Aoki;M. Kimura;T. Yamaguchi;H. Harada;A. Ohashi;S. Uemura;金原数;佐藤ゆたか;細川奈生
• 通讯作者: 細川奈生

Atg14 and UVRAG Mutually exclusive subunits of mammalian Beclin 1-PI3K complexes

• DOI: 10.4161/auto.5.4.8062
• 发表时间: 2009-05-16
• 期刊: AUTOPHAGY
• 影响因子: 13.3
• 作者: Itakura, Eisuke;Mizushima, Noboru
• 通讯作者: Mizushima, Noboru